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动物克隆技术的发展及应用前景 李文章 摘要：所谓克隆就是指由一个细胞或个体以无性方式重复分裂或繁殖体所形成的一群个体。克隆动物即动物的无性繁殖。就是供体细胞核移入去核的卵母细胞中，使后者不经精子穿透等有性过程即可被激活、分裂并发育成个体，使得核供体的基因得到完全复制。诺贝尔奖获得者、德国胚胎学家1938年提出了动物克隆的最早设想。经过近百年的发展，动物克隆技术现已实现并取得了许多突破性的成果。本文就动物克隆的基本原理及应用前景作一简单的探讨。clone或cloning的音译，而英文clone则起源于希腊文Klone，原意是指以幼苗或嫩枝插条，以无性繁殖或营养繁殖的方式培育植物，如扦插和嫁接。在大陆译为“无性繁殖”在台湾与港澳一般意译为复制或转殖或群殖。 中文也有更加确切的词表达克隆，“无性繁殖”、“无性系化”以及“纯系化”。克隆是指生物体通过体细胞进行的无性繁殖，以及由无性繁殖形成的基因型完全相同的后代个体组成的种群。通常是利用生物技术由无性生殖产生与原个体有完全相同基因组织后代的过程。 克隆也可以理解为复制、拷贝（港澳台的意译），就是从原型中产生出同样的复制品，它的外表及遗传基因与原型完全相同。 时至今日，“克隆”的含义已不仅仅是“无性繁殖”，凡是来自同一个祖先，无性繁殖出的一群个体，也叫“克隆”。这种来自同一个祖先的无性繁殖的后代群体也叫“无性繁殖系”，简称无性系。简单讲就是一种人工诱导的无性繁殖方式。但克隆与无性繁殖是不同的。无性繁殖是指不经过雌雄两性生殖细胞的结合、只由一个生物体产生后代的生殖方式，常见的有孢子生殖、出芽生殖和分裂生殖。由植物的根、茎、叶等经过压条、扦插或嫁接等方式产生新个体也叫无性繁殖。绵羊、猴子和牛等动物没有人工操作是不能进行无性繁殖的。——因此，高中一些练习题里将扦插排除在“克隆”之外。另外，花药离题培养成单倍体，不受精的卵细胞孤雌发育成个体如雄蜂雄蚁，叫做单性繁殖，严格来说也不算克隆。而试管婴儿由于有受精过程所以也不属于克隆。科学要求严谨，定义非常关键，有时候概念的内涵和外延变化了，我们大部分人还使用旧有的内容，这样就造成了混淆和混乱。 关于克隆的设想，中国明代的大作家吴承恩已有精彩的描述——孙悟空经常在紧要关头拔一把猴毛变出一大群猴子，这当然是神话，但用今天的科学名词来讲就是孙悟空能迅速的克隆自己。从理论上讲，猴子毛含有的蛋白质是指导该部分毛发合成的DNA的部分表达（与其内含子和外显子有关），可以进行逆转录，也就是可以克隆，但是事实上，我们的技术没有先进到这样的地步。 　　 另外一种克隆方法是提取两个或多个人的基因细胞进行组合形成胚胎,出生后的克隆人将有提供基因的几个人的特征. 　　 由于克隆技术是无性生殖所以它并不是根据基因重组、基因突变、染色体变异等原理而发明的技术。 　　 虽然克隆很神奇，但是它诱人的地方也就是它最危险的地方。 二、动物克隆的原理 1、动物克隆的理论 动物克隆技术所依靠的理论基础是细胞潜在全能性。细胞所说的全能性是指细胞包含个体的全套遗传信息，在特定环境因素的调节下，可回到受精卵一样的状态，从头开始发育成一个完整的生物个体，只有具备全能性的动物组织细胞，才可用于克隆动物。 2、动物克隆的技术核心 目前动物克隧的技术的核心就是核移植，根据供体的来源不同，可以分为胚胎细胞克隆和体细胞克隆。 2.1胚胎细胞克隆 胚胎干细胞是从初期胚胎内细胞团和附植后原始生殖细胞分离出来的一种细胞，它具有全能性或多能性，可以发育为任何一种组织或器官的前体细胞，再由该前体细胞发育成功能细胞。胚胎干细胞同正常的体细胞一样可以在体外进行增殖、克隆、冷冻、保存而保持不分化。这样就可以为人们提供大量的可利用的胚胎干细胞。1980年，Willadsen将从绵羊八细胞胚胎中分出的胚胎细胞，移入已经去核的同种绵羊卵细胞中，经培养获得胚胎，再将胚胎植入代理母羊子宫中，首次获得了胚胎细胞克隆羊。现在人们能将胚胎干细胞体外培殖传40—60代而不分化，而这样大量的细胞就为我们利用它奠定了基础。胚胎干细胞具有可操作性。在机体外人们可以对其从事遗传操作选择，如转基因、基因打靶、配合基因诱捕等一系列技术，再结合核移植技术，生产出入们所希望的动物。 2.2体细胞克隆 对于体细胞克隆来说，在细胞分化过程中，细胞核全能性的潜能受到限制。虽然细胞核内的DNA序列没有改变，但基因在特定的细胞内所表达的蛋白质成分有限。这主要是因为染色体组织改变和稳定阻遏核蛋白复合体阻遏以及相应转录激活的缘故。因此有效的核移植供体核必须像正常受精卵细胞核一样进行细胞周期活动，才能发育成新个体，那么作为受体的细胞质就要求必须有再程序化供体核的能力。对于启动供体核的再程序化过程中，ca2+起到了至关重要的作用，细胞周期调节因子（如MPF）也有着重要作用。除