基因工程练习.doc

基因工程 1．为达到相应的目的，必须通过分子检测的是 A．携带链霉素抗性基因受体菌的筛选 B．产生抗人白细胞介素-8抗体的杂交瘤细胞的筛选 C．转基因抗虫棉植株抗虫效果的鉴定 D．21三体综合征的诊断 2．基因芯片的测序原理是DNA分子杂交测序方法，即通过与一组已知序列的核酸探针杂交进行核酸序列测定的方法。先在一块芯片表面固定序列已知的核苷酸的探针，当溶液中带有荧光标记的靶核酸序列与基因芯片上对应位置的核酸探针产生互补匹配时，通过确定荧光强度最强的探针位置，获得一组序列完全互补的探针序列。据此可重组出靶核酸的序列TATGCAATCTAG(过程见下图图1) 若靶核酸序列与八核苷酸的探针杂交后，荧光强度最强的探针位置如图2所示，溶液中靶序列为( ) A．AGCCTAGCTGAA B．TCGGATCGACTT C．ATCGACTT D．TAGCTGAA 3．下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tetR表示四环素抗性基因，ampR表示氨苄青霉素抗性基因，BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ直线所示为三种限制酶的酶切位点。据图回答： （1）图中将人乳铁蛋白基因插入载体，需用________限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含________的培养基上进行。 （2）能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是________（母代号）。 A．ampR B．启动子　　　　C．终止子 D．复制原点 （3）过程①可采用的操作方法是_______ _(填字母代号)。 A．农杆菌转化 B．显微注射 C．大肠杆菌转化 D．细胞融合 （4）过程②采用的生物技术是____ ____。 （5）对早期胚胎进行切割，经过程②可获得多个新个体。这利用了细胞的____ __性。 （6）为检测人乳铁蛋白是否成功表达，可采用_____ ___（填字母代号）技术。 A．核酸分子杂交 B．基因序列分析 C．PCR D．抗原—抗体杂交 4．嗜热土壤芽胞杆菌产生的β—葡萄糖苷酶（BglB）是一种耐热纤维素酶，为使其在工业生产中更好地应用，开展了以下试验： Ⅰ.利用大肠杆菌表达BglB酶 ⑴PCR扩增bglB基因时，选用 基因组DNA作模板。 ⑵下图为质粒限制酶酶切图谱。bglB基因不含图中限制酶识别序列。为使PCR扩增的bglB基因重组进该质粒，扩增的bglB基因两端需分别引入 和 不同限制酶的识别序列。 ⑶大肠杆菌不能降解纤维素，但转入上述构建好的表达载体后则获得了降解纤维素的能力，这是因为 。 Ⅱ．温度对BglB酶活性的影响 ⑷据图1、2可知，80℃保温30分钟后，BglB酶会 ；为高效利用BglB酶降解纤维素，反应温度最好控制在 （单选）。 A．50℃ B．60℃ C．70℃ D．80℃ Ⅲ．利用分子育种技术提高BglB酶的热稳定性 在PCR扩增bglB基因的过程中，加入诱变剂可提高bglB基因的突变率，经过筛选，可获得能表达热稳定性高的BglB酶的基因。 ⑸与用诱变剂直接处理嗜热土壤芽胞杆菌相比，上述育种技术获取热稳定性高的BglB酶基因的效率更高，其原因是在PCR过程中 （多选） A．仅针对bglB基因进行诱变 B．bglB基因产生了定向突变 C．bglB基因可快速积累突变 D．bglB基因突变不会导致酶的氨基酸数目改变 5．下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，圈l、圈2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题： （1）一个图1所示的质粒分子经Sma Ⅰ切割前后，分别含有 ▲ 个游离的磷酸基团。 （2）若对图中质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性越 ▲ 。 （3）用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不能使用Srna Ⅰ切割，原因是 ▲ 。 （4）与只使用EcoR I相比较，使用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止 ▲ 。 （5）为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入 ▲ 酶。 （6）重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了 ▲ 。[来源:学科网ZXXK] （7）为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因，将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的