猪圆环病毒病2型灭活疫苗(LG株)工艺规程分析报告.doc

编号: SC-TS-02-218 猪圆环病毒2型灭活疫苗（LG株） 工艺规程 上海海利生物药品有限公司 工艺规程 生产管理 上海海利生物药品有限公司 编号: SC-TS-02-218 生效日: 1 / 16 页 标题: 猪圆环病毒2型灭活疫苗（LG株）工艺规程 起草?: 起草日期?: 部门审核?: 审核日期?: QA审核?: 审核日期?: 批准?: 批准日期?: 分发部门?: 质管部、技术研发部、生产部 目 录 1. 主题内容 2 2. 适用范围 2 3. 引用标准 2 4. 规程内容 2 4.1 品名 2 4.2 剂型 2 4.3 规格 2 4.4 菌（毒）种 2 4.5 批准文号 2 4.6 工艺流程图 2 4.7 质量控制点 4 4.8 活性物质制备工艺过程 4 4.9 活性物质生产技术经济指标和原料利用率计算 7 4.10油乳剂灭活疫苗制造工艺过程 7 4.11油乳剂剂制造技术经济指标 9 4.12设备一览表 10 4.13生物安全及劳动保护 10 4.14物料 11 4.15成品质量标准 13 4.16贮藏和有效期 14 4.17包装材料要求 14 4.18标签、说明书 15 题目?: 猪圆环病毒2型灭活疫苗（LG株）工艺规程 编号: SC-TS-02-218 2 / 16 页 主题内容 本标准规定猪圆环病毒2型灭活疫苗（LG株）达到的技术要求。 适用范围 本标准适用于猪圆环病毒2型灭活疫苗（LG株） 引用标准 国家标准(猪圆环病毒2型灭活疫苗（LG株）制造及检验试行规程)。 规程内容 品名 通用名称：猪圆环病毒2型灭活疫苗(LG株) 英 文 名：Porcine Circovirus Type 2 Vaccine,Inacitvated（Strain LG） 汉语拼音：Zhu Yuanhuanbingdu Erxing Miehuoyimiao(LG Zhu) 剂型 水包油剂型 规格 20ml/瓶、40 ml/瓶、100ml/瓶、250 ml/瓶 菌（毒）种 来源：中国农业科学院哈尔滨兽医生物研究所保存 毒株：猪圆环病毒LG株 代次：56～60代 保存温度：-80℃以下保存 批准文号 兽药生字（2010）090201071 工艺流程图  题目?: 猪圆环病毒2型灭活疫苗（LG株）工艺规程 编号: SC-TS-02-218 4 / 16页 质量控制点 工序名称 控制项目 控制标准 细胞消化 消化液 0.125%胰蛋白酶+0.01EDTA溶液；50-100mL/转瓶 消化温度 37℃ 消化时间 转动转瓶，待细胞层开始出现裂缝时终止，一般为45秒 转瓶培养 温度 37℃恒温室的控制 时间 细胞生长成单层即可结束培养，一般为24小时左右 转速 转瓶机设置为10～12转/小时 接 毒 接种量 无菌控制下接种，5% 无菌检测 取样，T.G、G.P、G.A培养基培养应无菌 调PH值 PH值 2日后，无菌，7.5%碳酸氢钠调PH为7.2 观 察 细胞病变情况 出现混浊，可能污染，弃去。细胞病变达70%~80%时收获 收 获 无菌 无菌控制下操作，不污染 灭 活 灭活剂 0.2%的甲醛 灭活温度 调整灭活罐的温度为37℃ 灭活时间 灭活充分，维持24小时 乳 化 水相、油相比例 保证抗原含量并不分层，水相：油相为9:1 乳化时间 30分钟 乳化温度 0～10℃ 活性物质制备工艺过程 4.8.1 PK-15细胞系标准： 细胞形态：用含10%的小牛血清的MEM培养液培养细胞，置37℃、含5%CO2培养箱中培养， 2～3小时可貼壁，培养48小时应在1/2以上的瓶面出现细胞岛，并有部分相连、镜检时细胞形态是椭圆形或梭状上皮细胞，明朗、轮廓清晰、胞浆内可见小颗粒，72～96小时形成单层。 细胞纯净性：应无菌、无霉菌、无支原体、无外源病毒污染。 细胞致瘤性检验：不致瘤。 细胞核学检查：不同代次的细胞与基础细胞库的细胞相比，所有细胞的染色体模式数不得高出15%，核型必须相同。 制苗的细胞代次：第20～40代之间。 细胞保存：液氮保存，保存期为36个月。 4.8.2生产用毒种要求 病毒含量：每毫升病毒含量应不低于105.5TCID50 纯净性：病毒应无 题目?: 猪圆环病毒2型灭活疫苗（LG株）工艺规程 编号: SC-TS-02-218