植物组织培养学期末复习要点分析报告.doc

?植物组织培养学期末复习要点 绪论? 植物组织培养（Tissue?culture）：是指用无菌方法使植物体的离体器官、组织和细胞在人为提供的条件下生长和发育的所有培养技术的总称，也称之为离体培养或试管培养。? 器官：根、茎、叶、花、果实、种子；组织：花药、胚珠、胚、胚乳、形成层等。?或指将植物的离体器官、组织、细胞以及去除细胞壁的原生质体，放在离体无菌人工控制的环境条件下培养，对其进行克隆，使其生长、分化并成长为完整植株的过程。? 组织（tissue)、器官（organ)或细胞培养：指利用生物体各部分组织、器官或细胞进行离体培养，使之形成愈伤组织或完整有机体的技术。? 愈伤组织（callus）：在人工培养基上由外植体上形成的一团无序生长状态的薄壁细胞。?原生质体培养指将微生物或植物细胞游离成原生质体，在适宜培养条件下，依据细胞全能性使其再生细胞壁，并进行细胞分裂分化，形成完整个体的技术。’ 2）、器官发生途径：由愈伤组织或外植体诱导形成不定根或不定芽，再获得再生植株的方法。? 外植体→脱分化，高生长素(1,2-D)?→愈伤组织→再分化低(生长素/细胞分裂素)?→芽→高(生长素/细胞分裂素)→根→再生植株。? 外植体（explant)：由活体（in?vivo)植物体上切取下来的，用于组织培养的各种接种材料。包括各种器官、组织、细胞或原生质体等。? 按培养材料分为（Gamborg等)：①愈伤组织培养：最为常见的组织培养；②器官培养：胚、胚乳、珠心、子房、根、茎、叶、花和幼果的部分组织的培养；③细胞培养：悬浮细胞培养、单细胞培养；④茎尖分生组织培养；⑤原生质体培养。? 根据培养器官的不同：叶培养、根培养、花药培养、胚珠培养等。? 根据培养方式：固体培养、液体培养。①固体培养：将培养物放在含有琼脂等固化剂的培养基表面进行培养。特点：是最常用的方法。该方法简单，易行，但养分分布不均，生长速度不均衡，并常有褐化中毒现象发生。②液体培养：将培养物放在未加固化剂的培养基内培养，一般需进行震荡，又称液体震荡培养。特点：于液体中氧气含量较少，常用振荡培养的方法以确保氧气的供给；往复式摇床或旋转式摇床进行培养，速度一般为50-200r／min，这种定期浸没的方法，既能使培养基均一，又能保证氧气的供给。?? 根据培养物量的多少：大量培养、微量培养。根据培养过程中是否需光：光培养、暗培养。根据培养方法的不同：平板培养、微室培养、悬浮培养等。? 按培养过程分为：初代培养和继代培养。①初代培养：指外植体的最初培养。②继代培养：将初代培养得到的培养体移植于新鲜培养基中这种反复多次移植的培养，称为继代培养。 1904年，Hannig?（胚胎学家）最先成功地培养了萝卜和辣根菜的胚。Haberlandt的观点：高等植物的组织和器官可以分割成单个细胞。贡献：提出细胞全能性，首次进行离体细胞培养。1934年，美国植物生理学家White?用番茄根尖建立起第一个活跃生长的无性繁殖系，从而使非胚器官的培养首先获得成功。? 应用领域：快速繁殖、种苗脱毒、远缘杂交、突变育种、单倍体育种、种质保存、基因工程?、植物性药物和生物制品的生产。? 1、植物的快速繁殖：运用组织培养的途径，一个单株一年可以繁殖几万到几百万个植株，而且均来自一单一的个体，遗传性状一致。? 2、脱除病毒：改善作物的生长状态；生产无病毒苗木；提高产品质量与产量。?由于病毒的感染严重影响作物的产量和品质，而利用组织培养技术可以有效地除去植物体内的病毒，得到大量的无病毒种苗。主要的方法是培养植物茎尖分生组织，也可以采用热处理或加入化学试剂的方法达到脱毒的效果。如马铃薯、草莓、香蕉、葡萄等等。? 3、培育新品种：生产符合人们需要的特性的新品种。远缘杂交：利用组织培养可以使难度很大的远缘杂交取得成功，从而育成一些罕见的新物种。? 4、植物种质资源的保存；5、人工种子的研究；?6、次生代谢产物的生产。：鸭脚树种子愈伤组织中提取利血平用于降血压；人参根愈伤组织中提取强心配糖体治疗心脏病；红豆杉细胞中提取紫杉醇用于抗癌药物。? 7、基因工程：基因工程主要研究DNA的转导，而基因转导后必须通过组织培养途径才能实现植株再生。? 组织培养技术在农业生产上的应用主要体现于以下几个方面：快速繁殖优良苗木；获得脱毒苗；育种上应用；工厂化育苗。 ? ???? 植物组织培养实验室及操作技术? ?组织培养实验室布局的总体要求：便于隔离、便于操作、便于灭菌、便于观察。()??实验室组成包括基本实验室?(准备室、缓冲室、无菌操作室、培养室)和辅助实验室(细胞生物学实验室、温室、生化分析实验室)。? 基本设备：冰箱、电炉、酸度计、纯水器、天平、培养基分装器、搅拌器等。??灭菌设备：蒸汽压力灭菌锅、干热消毒柜、过滤灭菌装置、喷雾消毒器、紫外灯