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专题20 生物技术实践
微生物的培养和应用
命题
剖析 考向
扫描 1 以选择题的形式考查培养基的成分、制备方法,考查学生理解和应用知识的能力 2 以简答题的形式考查微生物的分离、纯化和培养过程,侧重对实验操作、设计和分析的考查,考查学生实验的操作和综合分析能力 命题
动向 命题将会结合社会热点、科研发现等考查微生物的培养及实践应用,题型主要以非选择题为主
1.(2011年重庆理综卷)下列有关细菌培养的叙述,正确的是( )
A.在琼脂固体培养基上长出的单个菌落含有多种细菌
B.在培养基中加入青霉素可抑制真菌而促进细菌生长
C.向液体培养基中通入氧气能促进破伤风杆菌的生长
D.在半固体培养基中接种细菌培养后可以观察其运动
解析:本题考查培养基的用途和微生物的代谢知识。琼脂固体培养基上长出的单个菌落是由一个或少数同种细菌繁殖而成的同种个体的总和,A项错误;培养基中加入青霉素可选择酵母菌、霉菌等真菌而抑制细菌的生长,因为青霉素可抑制细菌细胞壁的合成,B项错误;破伤风杆菌的代谢类型为厌氧型,通入氧气可使培养基中的破伤风杆菌代谢活动受到抑制,C项错误;半固体培养基可用于观察细菌的运动,D项正确。
答案:D。
2.(2012年浙江自选模块,17,10分)幽门螺杆菌(Hp)感染是急慢性胃炎和消化性溃疡的主要致病因素。在患者体内采集样本并制成菌液后,进行分离培养。实验基本步骤如下:
配制培养基→灭菌、倒平板→X→培养→观察
请回答:
(1)在配制培养基时,要加入尿素和酚红指示剂,这是因为Hp含有 ,它能以尿素作为氮源;若有Hp,则菌落周围会出现 色环带。?
(2)下列对尿素溶液进行灭菌的最适方法是 灭菌。?
A.高压蒸汽 B.紫外灯照射
C.70%酒精浸泡 D.过滤
(3)步骤X表示 。在无菌条件下操作时,先将菌液稀释,然后将菌液 到培养基平面上,菌液稀释的目的是为了获得 菌落。?
(4)在培养时,需将培养皿倒置并放在 中。若不倒置培养,将导致 。?
(5)临床上用14C呼气试验检测人体是否感染Hp,其基本原理是Hp能将14C标记的 分解为NH3和14CO2。?
解析:本题考查的是微生物的培养及分离等知识。(1)幽门螺杆菌(Hp)中含有脲酶,该酶能催化尿素的分解,若有Hp,则培养基中尿素会被分解pH升高,酚红指示剂将变红。(2)由于尿素不耐高热, 在高温湿热灭菌中可能会降解,故一般制作尿素培养基时尿素溶液均用滤菌器来灭菌,称为过滤灭菌法。(3)培养细菌的过程为配制培养基,灭菌、倒平板,接种细菌,培养,最后观察现象。无菌条件下,首先将待测样品制成均匀的系列稀释液,尽量使样品中的微生物细胞分散开,使成单个细胞存在,再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中,使其均匀分布于平板中的培养基内。经培养后,由单个细胞生长繁殖形成菌落,统计菌落数目,即可计算出样品中的含菌数。 (5)Hp中含有脲酶,该酶能催化尿素和水反应产生氨和二氧化碳。
答案:(1)脲酶 红
(2)D
(3)接种 涂布 单
(4)恒温培养箱 无法形成单菌落
(5)尿素
3.(2011年新课标全国理综卷)有些细菌可分解原油,从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答问题:
(1)在筛选过程中,应将土壤样品稀释液接种于以 为唯一碳源的固体培养基上,从功能上讲,该培养基属于 培养基。?
(2)纯化菌种时,为了得到单菌落,常采用的接种方法有两种,即 和 。?
(3)为了筛选出高效菌株,可比较单菌落周围分解圈的大小,分解圈大说明该菌株的降解能力 。?
(4)通常情况下,在微生物培养过程中,实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、 和 。?
无菌技术要求实验操作应在酒精灯 附近进行,以避免周围环境中微生物的污染。?
解析:(1)筛选目的菌株应使用选择培养基,可以在这类培养基中加入某种营养物质,促进所需要的微生物生长,这就是微生物学家常用的“投其所好”的策略。(2)平板划线法和稀释涂布平板法都可以将聚集在一起的细菌分散或稀释成单个细胞,进而得到单菌落。(3)目的菌株可降解原油,从而在培养基上形成以目的菌株为中心的分解圈,分解圈越大表明菌株的降解能力越强。(4)常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌,酒精灯火焰附近是一个无菌区,故实验操作在此处进行可防周围环境中微生物的污染。
答案:(1)原油 选择
(2)平板划线法 稀释涂布平板法
(3)强 (4)干热灭菌 高压蒸汽灭菌 火焰
4.(2011年山东理综卷)研究发现柚皮精油和乳酸菌素(小分子蛋白质)均有抑菌作用,
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