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血细胞分析仪 魏彦刚 教学目标 1、掌握血细胞分析仪的库尔特原理 2、掌握白细胞、红细胞、血小板直方图的临床意义。 3、了解血细胞分析仪的质量控制 教学重点、难点 教学重点： 1、血细胞分析仪电阻抗原理 2、细胞直方图的分析 教学难点： 细胞直方图的分析 授课内容 概述 血细胞分析仪检测原理 血细胞分析仪类型 血细胞分析仪检测项目 血细胞直方图 概 述 血液分析仪发明者库尔特先生 COULTER ：全自动细胞分析仪 COULTER ：细胞分析仪 库尔特与李俊的差别:社会价值观的差别 血细胞分析发展史 1. 1953年美国Coulter公司研制成功第一台电阻抗是血细胞分析仪； 2. 六十年代已普遍应用到临床，当时可检测RBC、Hb、WBC 、 MCV 、 MCH 、 MCHC等项目； 3．七十年代，增加了PLT； 4．七十年代末至八十年代开发了DC及RDW及MPV等新项目； 5．九十年代以来，RET、NRBC、淋巴细胞亚群分析等指标。 现代分析仪进展 1．自动化程度越来越高； 2．提供参数越来越多； 3．精密度越来越高； 4．速度越来越快； 5．越来越注重环保； 6．质控功能得到加强； 7．智能化程度越来越高。 一 血液分析仪检测原理 血液分析仪检测原理大致分为两类： ①电阻抗法（库尔特原理） ②光散射法 （其中电阻抗法是血液分析仪的设计基础） 血液分析仪主要能完成两大功能： ①细胞计数功能 ②细胞分类功能 （一） 电阻抗法原理（库尔特原理） 1 库尔特原理 库尔特原理是利用电阻抗法测量 细胞的数量和体积。其内容为：血细 胞是电的不良导体，当一个细胞通过 计数小孔时，会导致小孔两端电阻的 变化，将其转化成脉冲，感应器通过 检测脉冲的数量及大小，从而计算出 通过小孔的细胞数量及体积。 2 库尔特原理图 3 电阻抗法仪器的主要组成 电阻抗法仪器的主要组成包括： 信号发生器（脉冲检测器） 放大器（微伏放大为伏级的脉冲信号） 阈值调节（计数不同细胞有不同阈值） 甄别器（除去假脉冲信号） 整形器（波形调整为标准一致的平顶波） 计数系统（不同脉冲区分出不同细胞并计数） WBC直方图 （二）白细胞系检测原理 1. 电阻抗法 标本 单个白细胞 按体积大小分类 　　仪器将体积为35～450fL的血细胞，分为256个通道（channel）。每个通道：1.64fl。根据细胞大小，分别置于不同的通道中，显示血细胞体积分布直方图(Histogram)。 ? 白细胞检测原理 根据电阻抗的原理，不同体积白细胞(35-450)fL产生脉冲大小的明显差异而区分相应的三群细胞： 经溶血素处理脱水后，血细胞体积大小发生 了变化！！！以细胞的有形成分作为细胞的大小 第一群（35～90fl）小细胞区：淋巴细胞 （体积最小）。 第二群（90～160fl）单个核细胞区，（中 间细胞）：单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱 性粒细胞、原始、幼稚细胞、异常细胞等。 第三群（160fl以上）大细胞区：嗜中性粒细 胞（体积最大）。 （二）光散射法血液分析仪检测原理 光散射法组合应用电学、光学、细胞化学 多项技术检测血液细胞，可得出较准确的 细胞计数和分类计数的结果。 这些测试原理的改进主要体现在对白细胞 分类部分的改进，即电阻抗法的白细胞三分 群发展为多项技术对白细胞五分类。 电阻抗法检测红细胞要注意白细胞增高干扰： 稀释血液中含有白细胞，正常时，血液红细胞与白细胞的比例约为500：1～1000：l，因此，白细胞因素可忽略不计。 当病理情况下，如白血病时，白细胞数明显 增高，同时又伴有贫血时，使所得红细胞参 数可产生明显误差。 2. 血红蛋白测定原理 有关溶血剂 ICSH推荐的HICN法：最大吸收峰在 540nm。血红蛋白衍生物是HICN， 试剂反应时间长，5分钟，不适合 全自动仪器。另外，氰化血红蛋白 （CN-HB）：试剂成分氰化钾（剧毒）。 2 非氰化溶血剂（如SDS-HB）： SDS-HB与HICH-HB吸收光谱相似。 (四)血小板检测原理 根据电阻抗法，血小板随红细胞在一 个系统中进行检测，在红细胞／血小板计 数池中计数2fl～30fl的颗粒。 血细胞分析仪工作流程 二、血细胞分析仪类型 （一）单纯电阻抗法三分群血液分析仪特点 (1)检测参数： 约20项左右。 (2)白细胞分类：只能对白细胞进