世纪本草阿胶地黄口服液改善大鼠营养性贫血的效果评价.doc

世纪本草阿胶地黄口服液 改善大鼠营养性贫血的效果评价 韩鹏， 赵亮， 李彬， 覃思宇， 李超培 ( 广西壮族自治区疾病预防控制中心， 南宁 530028 ) [摘要] 目的：以缺铁大鼠为模型研究了世纪本草阿胶地黄口服液改善营养性贫血的效果。方法：选择体重60～80g I I级雌性断乳 Wistar大鼠，给予低铁基础饲料耗空6周后，经尾静脉取血，测定血红蛋白含量，按尾血血红蛋白含量和体重，把动物随机分为低铁对照组和3个实验组。根据该样品的人体日推荐用量，实验组设2.5、5.0、10.0m l／k g BW(分别相当于人体推荐用量的5、10、20倍) 低、中、高3个剂量组； 低铁对照组给予相应溶剂。实验期为45 d，测定动物营养性贫血相关指标。结果：世纪本草阿胶地黄口服液改善大鼠生长， 各剂量实验组的终体重和净增重高于低铁对照组；服用世纪本草阿胶地黄口服液显著升高贫血大鼠的血红蛋白水平；而红细胞内游离原卟啉水平显著降低。结论：世纪本草阿胶地黄口服液有改善营养性贫血的作用。 [关键词] 阿胶地黄口服液；营养性贫血；乳酸亚铁；大鼠 [中图分类号] R96 [文献标识码] A [文章编号] 1004—8685 (2009 ) 08—1765—03 世纪本草阿胶地黄口服液是以乳酸亚铁为功效成分，配合阿胶、 当归、大枣、熟地、白芍等传统中药加工而成，主要用于改善营养性贫血。本实验主要研究该口服液对营养性贫血模型大鼠血液细胞学和生化学指标的影响，为评价其改善营养性贫血作用提供依据。 1材料与方法 1.1 受试样品 由北京京珠草本生物科技有限责任公司提供的世纪本草阿胶地黄口服液为棕褐色液体， 规格：10ml/支， 用批号样品进行试验。人口服推荐用量为每人( 成人) 每日3次，每次1支， 成人体重按60 k g计算， 折合剂量为0.5 m l/ k g BW。 1.2实验动物 选用广西医科大学医学实验动物中心繁殖的清洁级(Ⅱ级)Wistar种雄性大白鼠80只，体重60～80g，实验动物质量合格证号NO. 001069。实验动物使用许可证号：SYX桂2007—0003。实验动物室温度：22～25 o C，相对湿度：55％～7 0％。 1.3剂量选择与受试物给予方式 据样品的人体日推荐用量，设2.5、5.0、10. 0 m l/k gB W(分别相当于人体推荐用量的5、10、20倍) 3个剂量组，另设一个对照组(低铁组)，给予相应溶剂。每组12只动物。分别量取样品25、50、100ml， 各加去离子水至100m l，混匀、配成25％、50％、100％浓度的溶液， 以经口方式给予受试溶液，灌胃量为1.0 ml/100g BW，对照组予以等体积的去离子水。每天灌胃一次，连续灌45d。 1.4 主要仪器与试剂 1.4.1仪器RF一520荧光分光光度计、721型分光光度计、离心机、旋涡混匀器等。 1.4 .2 试剂 碳酸氢钠、 铁氰化钾、 氰化钾、 肝素抗凝剂、 原卟啉、乙酸乙酯等。 1.5 实验方法 1.5.1建立营养性贫血大鼠模型选用健康断乳大鼠在SPF级动物实验室实验环境下适应5d后，饲予去离子水和低铁饲料[配方(g％)： 葡萄糖49.38，EDTA处理酪蛋白脱脐黄玉米粉15.00，明胶5.00，玉米油5.00，磷酸二氢钠2.00，碳酸钙2.00，氯化钾0.50，混合微量元素0.27，氯化胆碱0.15，混合维生素0.10，DL一蛋氨酸 0.10 ]，采用不锈钢笼及食罐，实验过程中避免铁的污染，第3周开始，每周选取部分大鼠采尾血测血红蛋白( Hb) 含量， 直至大多数大鼠的血红蛋白含量低于100g/L时，测定全部大鼠的体重及血红蛋白含量。 1.5.2 恢复实验 从血红蛋白含量 100g/L的大鼠中选取含量最低的48只作为实验动物，根据贫血大鼠血红蛋白水平和体重，将其随机分为低铁对照组和三个实验组，每组12只动物，各组均继续饲以低铁饲料及去离子水，阴性对照组以蒸馏水灌胃，实验组则分别以不同剂量的受试样品灌胃，连续灌胃45d。 1.5.3 血红蛋白测定(氰化高铁法) 连续灌胃45d后，测量体重， 股动脉取血10μl，放于2.5m l 氰化高铁血红蛋白试剂应用液中，立即混匀，放置15min，于540mm波长下用1.0cm光径比色杯比色， 以试剂空白凋零将所得样品管的光密度值代入公式，按下式计算血红蛋白浓度(g/ L) 。 1.5.4红细胞 内游离原卟啉( FEP)测定 将全血滴在专用滤纸上，待干燥后存人4o C冰箱备用(时间不超过2个月)。测定时，用打孔器将带有血滴的滤纸打入玻璃试管中,加入2％硅藻土溶液,放入4o C冰箱过夜洗脱