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两种方法检测人类免疫缺陷病毒抗体结果比较
两种方法检测人类免疫缺陷病毒抗体结果比较
朱武军(贵州省贵阳市第六人民医院检验科 550005)
【摘要】 目的 比较化学发光法与酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测人类免疫缺陷病毒抗体(抗一HIV)的一
致性。方法 收集45份室间质评样本,分别用两种方法进行检测。结果 化学发光法检测样本的吸光度/临界值
比值明显高于ELISA法,两种方法对抗HIV检出率差异有统计学意义(Y2—25.002,Po.01)。结论 化学发光
法检测抗一HIV较ELISA法敏感性高、假阳性少,可以推广应用。
【关键词】 化学发光法; 酶联免疫吸附试验; 人类免疫缺陷病毒; 对比研究
中图分类号:R446.61;R512.91 文献标志码:B 文章编号:1672—9455(2009)06—0455—02
艾滋病即获得性免疫缺陷综合征,是由人类免疫缺陷病毒
(HIV)引起的严重疾病,迄今仍无法有效治疗,除了行为干预
等社会学手段外,阻断输血传播,及时发现HIV感染者并采取
针对性措施,是目前疫情控制的重要技术手段。由于HIV进
入人体后需要经过一段时间才会产生HIV抗体(抗一HIV),这
一时间医学上称为“窗口期”。艾滋病研究的重点领域之一就
是尽可能缩短“窗口期”,而达到这一目的最重要的手段就是高
质量的艾滋病诊断试剂盒和敏感性高的检测方法。化学发光
标记方法是近年来发展起来的一种新的非放射性免疫分析技
术。为比较化学发光法与酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测
抗一HIV的一致性,本文对同一份标本采取两种方法进行检测,
现将结果报道如下。
1材料与方法
1.1 标本来源 所有标本均来自贵州省临床检验中心2006
~2008年全省室间质评样本,一20℃以下保存。
1.2仪器化学发光仪KPS-KM(北京科美东雅生物技术有
限公司生产);酶标仪Muhiskan MK3(芬兰);洗板机(芬兰雷
勃Wwllwash Plus)。
1.3试剂 ELISA法检测试剂由北京万泰生物药业股份有
限公司提供,批号120080101;化学发光法试剂为北京科美东
雅生物技术有限公司生产,批
1.4方法 随机抽取室间质评10份阳性标本分别以1:5稀
释作为待测标本,与另外35份标本,共计45份标本分别用两
种方法进行检测,均严格按照各自的试剂盒说明书操作。
1.5统计学方法 用SPSSl2.0统计软件进行数据处理,数
据资料比较采用Y2检验。
2 结 果
在45份标本中,化学发光法和ELISA法均为阳性29份,
其样本吸光度/临界值(OD/CO)范围分别为2.379~179.100
和1.633~28.375;两种方法均为阴性的标本12例,其OD/CO
值范围分别为0.077~0.525和0.053~0.617;在化学发光法
为阳性而ELISA法为阴性的3例标本中,ELISA法的样本
OD/CO值范围为0.607~0.849,而化学发光法的OD/CO值
范围为1.230~1.787。结果见表1。
表1 两种方法对45份样本抗一HIV检测结果(”)
由表1可以看出,化学发光法的敏感性高于ELISA法,两
种方法抗HIV检出率差异有统计学意义(Y2—25.002,P
0.01)。
3讨 论
艾滋病是由HIV感染所引起的一种获得性免疫缺陷性疾
病,可通过性传播、血液传播和母婴传播途径感染人类,检出
抗一HIV是艾滋病诊断的重要条件,而诊断HIV感染是艾滋病
预防控制工作的重要组成部分。因此,建立敏感、实用的检测
方法,对于监测、诊断或血液筛查以及控制艾滋病的流行显得
尤为重要。目前艾滋病诊断技术主要包括病毒检测和病毒特
异性抗体检测等。由于HIV病毒分离、病毒载量测定、病毒核
酸测定以及病毒抗原检测等方法难度大、费用高,因而抗体检
测是常规检测方法,包括ELISA、聚丙烯酰胺凝胶电泳、间接
免疫荧光试验和斑点印迹在内的检测技术用于筛选实验,免疫
印迹试验用于确认实验。由此可见,提高敏感性、特异性,缩短
窗El期和方法简便、快速,是HIV检测试剂未来发展的主要
趋势。
白1985年第1代抗HIV检测试剂问世至今,HIV血清
学检测试剂已经发展到第4代。但使用第4代试剂对艾滋病
病毒抗体进行检测,仍然有2~3周的窗口期。此外,由于把抗
宣石曲瓞一荟士浊包的击田休全
原和抗体同时包被在反应板上存在着相互干扰的可能,影响了
免疫反应的特异性。另外,从方法学上来讲,这种基于ELISA
的分析方法,灵敏度终归是有限的[1]。本实验结果表明,化学
发光法检测样本的OD/CO比值明显高于ELISA法,对于抗
体效价较低的弱阳
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