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实验动物学第二章实验动物质量的标准化
本章掌握及熟悉的内容 掌握: 实验动物的遗传学分类和微生物学分类的方法及级别。 各遗传学类别实验动物(如近交系动物、保种F1代动物、封闭群动物、突变系动物、同源突变近交系动物、同源导入近交系动物、分离近交系动物、重组近交系动物等)的概念。 各微生物学级别实验动物的概念、区别 。 熟悉: 各遗传学类别实验动物的区别、特性及应用; 品种和品系的概念; 各微生物学级别实验动物的来源、特性及应用。 二、各类别实验动物的概念、特性及应用 三、实验动物遗传监测 实验动物病毒学检测方法 目前我国对实验动物病毒学检测通常使用血清学方法,包括: 1)酶联免疫吸附试验( ELISA ) 2)免疫荧光试验( IFA) 3)免疫酶染色试验( IEA ) 4)血球凝集(HA)和血球凝集抑制(HI)试验 实验动物细菌学检测方法 通常采用细菌分离和培养方法。根据培养基上菌落特征,将分离到的可疑菌落作生化鉴定。 1)检测人员的实际工作经验,直接影响到其对检测结果的判断准确性。 2)对部分细菌,如沙门氏菌,支原体等已开展血清学方法检测。 3)泰泽氏病原体不能在人工培养基上生长,目前还以病变组织压片镜检进行检测,并结合病理学检查结果作出判断。 实验动物寄生虫检测方法 通常在光学显微镜下查找寄生虫的虫体、虫卵或孢子。对人兽共患的弓形虫,则采用各种血清学的方法进行检测。 隔离系统 主要特征: 一般特征:增重慢、成熟晚、产仔少、寿命长。 解剖生理特征:主要表现在消化系统(肠壁薄、微绒毛细)。 免疫学特征:淋巴结与脾脏发育不良。 应用: 微生物学寄生虫学研究;免疫学研究;肿瘤学研究;老年学研究;营养学研究;放射医学研究;心血管疾病研究;毒理和药理学研究等。 无菌动物的特性及应用 5、悉生动物(已知菌动物) gnotobiotic animal (GNA) 在隔离系统中饲育的,经检测其体内外仅有经人工有计划接种的已知的微生物或寄生虫的动物。 根据所接种的已知菌种类,分为单菌、双菌、三菌和多菌动物。 无特定病原体动物和悉生动物的区别 无特定病原体动物体内外排除了哪些微生物和寄生虫是知道的。 悉生动物体内外携带那些微生物和寄生虫是知道的。 我国实验动物等级的设定 小鼠、大鼠:清洁级 、SPF级、无菌级 豚鼠、地鼠、兔:普通级、清洁级 、 SPF级、无菌级 犬、猴:普通级、 SPF级 无菌动物、无特定病原体动物和普通级动物优缺点比较 项目 无菌动物 SPF动物 普通动物 传染病 无 无 有或可能有 寄生虫 无 无 有或可能有 试验结果 明确 明确 有疑问 应用动物数 少量 少量 多或大量 统计价值 很好 可能好 不准确 长期实验 可能好 可能好 困难 死亡率 很少 少 高 长期实验存活率 约100% 约90% 约40% 实验的准确设计 可能 可能 不可能 实验结果的讨论价值 高 中 低 各种等级动物的相互关系 三、实验动物微生物与寄生虫监测 为了防止实验动物群中微生物和寄生虫的 污染,确保实验动 物微生物学质量,必须建立 一套监测手段,定期对动物群或饲养设施的环境进行检测。 必须从“引种 运输 饲养管理”认真操作、严格管理 1、检测内容及意义 1、外观检查 精神状态、运动情况、体表有无异常、生产能力和哺乳情况、排粪是否正常、采食与饮水等。 2、定期对各级实验动物群进行微生物学、寄生虫学检测,以确定各级实验动物是否符合原定级别 ;另一方面避免科学工作者误用不合适的动物,避免人兽共患病病原体感染饲养人员或实验工作人员,保障这些人员的健康 。 3、对实验动物饲养设施的监测,为确证这些设施能否控制微生物污染提供依据。 4、对引进的实验动物进行检疫,避免病原体入侵原有的动物群。 5、对患病动物进行病因学诊断并积累对动物疾病的认识和收集菌株或毒株,为诊断试剂和疫苗的制备,提供菌株或毒株。 中华人民共和国国家标准 ?实验动物 微生物学等级及监测 GB 14922.2-2011 Laboratory animal─Microbiological standards and monitoring ? 表1 小鼠、大鼠病原菌检测项目 表2 豚鼠、地鼠、兔病原菌检测项目 表4 小鼠、大鼠病毒检测项目 表5 豚鼠、地鼠、兔病毒检测项目 中华人民共和国国家标准
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