植物化学保护实验指导（二）.docVIP

实验七 杀虫剂胃毒作用毒力测定 基本原理：昆虫在取食正常食物的同时将药剂摄入消化道，经肠壁细胞吸收进入血液，随血液循环到达作用部位而使昆虫中毒。它利用昆虫的贪食性，因此要尽量避免药剂与昆虫体壁接触而产生其它毒杀作用。测定方法有（1）液滴饲喂法；（2）口腔注射法；（3）叶片夹毒法。 一、叶片夹毒法 基本原理：在两叶片中间均匀地夹入一定量的杀虫剂，饲喂目标昆虫，药剂随叶片被昆虫取食，然后由被吞食的叶片面积，计算出吞食的药量。优点是可以减少目标昆虫与杀虫剂的接触，避免发生触杀作用，操作方便，结果比较精确。叶片夹毒法只适用于植食性的，取食量大的咀嚼口器目标昆虫，如粘虫、蝗虫．玉米螟等。 l、实验材料： 药剂：90%敌百虫 溶剂：丙酮 试虫：菜青虫或斜纹夜娥幼虫：30～50头 用具：培养皿30～50个，木塞钻（口径2cm），微量注射器10微升1支，浆糊或明胶 生物材料：甘蓝叶、蓖麻叶等。 2、实验方法： 用木塞钻制成直径2cm的圆心叶片60片，把圆叶片放在湿润的培养皿中待用。 夹毒叶的制备：用丙酮将敌百虫稀释成有效成分为0.1%的药液，用微量注射器吸敌百虫丙酮液10微升，均匀滴在叶片上，计算出每张圆叶片药量（mg/厘米2）。用浆糊（或明胶）涂在无药的圆叶片上，两相对合，即成夹毒叶片，同时制备不夹毒叶片2～4片作对照。每培养皿中放一片，另放一团湿棉花或湿水草纸一小块保湿，然后编号。 采回的试虫先饥饿数小时，每头虫称重，每培养皿放一头虫，饲喂夹毒叶片。 3、结果观察及计算： 观察试虫取食情况，控制食叶量一部份虫食叶片1/3，一部分虫食叶片1/2，一部分食叶片3/4或全部叶片。然后取出剩余的夹毒叶片，饲喂新鲜叶片，经3-24小时后，检查死亡率。 食量的计算：将剩余的叶片放在直径2cm的方格纸上，计数被吃去的方格数（1毫米2/1格），然后按每张圆叶片上的总药量，计算每一方格的剂量，即可求出取食药量。从而求得每头虫单位体重所取食的剂量（mg或微g/g体重）。 致死中量的计算：按每头虫食剂量的大小顺序排列。将供试昆虫分为三组（1）生存组；（2）中间组（有生存的，也有死亡的）；（3）死亡组；在计算LD50时只用中间组，所以设计浓度时，生存组和死亡组反应试虫数目越少越好。中间组又分生存部分和死亡部分。 A= B= 致死中量（LD50）= （单位：mg或微g/g体重） 药剂对昆虫的剂量—反应记录表 实验报告：写出供试药剂对供试昆虫剂量反应的实验报告。 实验八 杀虫剂内吸作用毒力测定 [基本原理]：将药剂接触到植物的某一部分（如根、茎、叶、种子），药剂可渗入植物体内，并随体液传导到全株或植株的某一部分，在一定时间内，让昆由取食没有直接用药的植物组织，观察其致毒反应。本实验采用包扎法和药液培养法，目的是通过实验了解药剂的内吸性能并初步掌握内吸杀虫剂的测定原理及方法。 [实验材料]： 供试昆虫：花生蚜虫： 供试植物：花生苗 供试药剂：50％乐果EC，25％螟蛉畏EC，50％杀螟松EC 用具：烧坏（250ml），试管（2×180），移液管，试管架、药棉、塑料布、剪刀、纸套等。 [实验方法]： 药剂配制：将三种供试药剂配成有效含量为0.5％的乳液各50ml。 内吸测定方法： 1、涂抹包扎法： 挑选生长发育一致，叶片带蚜量较一致（20-25头）的花生苗12株，每株在颈部包扎一圈脱脂棉，用移液管吸取上述药液0.2ml滴于脱脂棉上。外部用塑料布缠绕后，用线结扎，防止药剂蒸汽挥发，每一药剂重复三次，每处理一株，对照用清水、重复三次，将已施药的花生苗用纸袋套住，插在盛有清水的试管中，排列在试管架上，各处理间不要接触，24小时后解开纸袋，统计蚜虫平均死亡率，比较各药剂的内吸毒效。 2、药液培养法： 先将供试药配成10ppm水溶液，分别注入试管内，每管20ml，对照用清水，重复三次，挑取生长发育一致，叶片带蚜量较一致（20～25头）的花生苗12株，插入液面10cm处，精确计算苗上蚜虫的数目后，用纸套住，24小时后统计平均死亡率。 [实验报告]： 将实验结果整理成表，并比较几种药剂的内吸作用，判断哪种药剂不是内吸剂。 实验九 杀虫剂熏蒸作用毒力测定 [基本原理]：在适当气温下，利用有毒的气体、液体或固体挥发产生的蒸气毒杀害虫（或病菌），称为熏蒸。熏蒸时，毒剂主要以气态从昆虫的气门进入气管，再分布到全身的气管，然后到达神经作用部位．因此测定熏蒸毒力的装置都必须基于同一原则，即试虫在一密闭容器中不能和固态或液态的毒剂直接接触。毒剂只能以气态和试虫接触。 常见熏蒸作用的测定方法有二重皿法、干燥器法、广口瓶法、药纸熏蒸法和三角瓶法