光合细菌的培养操作教程.doc

光合细菌的培养操作教程 1、配制光合细菌菌液： （1）配制比例： 光合细菌培养基、清水、菌种的配制比例为：0.5:80:20。 示例1： 0.5公斤（500克）培养基 + 80升水 + 20升菌种（接种），配成100升的光合细菌菌液。 示例2（少量培养）： 0.05公斤（50克）培养基 + 8升水 + 2升菌种（接种），配成10升的光合细菌菌液。 （2）配制方法： 下面以配制100升光合细菌菌液为例来说明配制方法： ① 溶化培养基：取培养基0.5公斤（500克），用少量水溶化（可以用50℃左右的热水，溶化培养基的速度会快些），搅拌均匀，然后倒入一个容量在100升以上的容器中； ② 配制培养液：往容器中加水到80升，80升培养液配制完成； ③ 接种：再加入20升菌种，并搅匀， 100升菌液配制完成； ④ 装瓶（袋）：将配制好的菌液装入干净的透明容器（瓶、壶、塑料袋等），容器中留5%的空气在里面，密封待用。 菌液配制说明及注意事项： a. 以上各成分的数量是以配制100升菌液为例来说明配制方法的，如配制其他数量的光合细菌菌液，各成分数量按比例增减即可; b. 培养用水源的选择： 一般含杂菌较低的清洁淡水、海水或加粗食盐的淡水都可以，如井水、河水、自来水、蒸馏水和纯净水等，甚至干净的池塘水也行。 从经济、实用的角度考虑，地下水（如井水）含杂菌低，是最理想的培养水源； 清洁的地表水也可使用,如河水、池塘水等； 含氯量较高的自来水应敞口放置两天或调PH值至偏碱后使用； 蒸馏水及纯净水固然很好，但成本太高，可用于提纯菌种； c. 培养用容器的选择： 必须为透明容器并清洗干净，透明的容器可让光合细菌最大限度的吸收到充分的光线，少量培养如饮料瓶、食用油壶等，规模培养如透明塑料桶、透明塑料袋等。 d. 菌种的接种量： 一般接种量为20-50%，即培养液与菌种的比例为4:1（4升培养液加1升菌种）到1:1（1升培养液加1升菌种），接种量最低不能低于20%。 接种量越高，光合细菌菌种越容易形成优势菌群而抑制其他杂菌生长，培养速度快，且培养成熟的浓度更高。但产出效率也越低，光合细菌易老化。 接种量越低，培养产出效率越高，但如果低于20%的接种量，光合细菌不容易形成优势菌群，培养初期易染杂菌，培养的成功率低。 我们推荐的接种量为20%，如果用太阳光培养，推荐的接种量为25-40%。 e. 容器不要装满培养液，留5%左右的空气在里面；实践证明, 光合细菌在微厌氧的条件下生长最好，也就是说，要留有一定的空气给它，又要适度的密封，光合细菌长得最好，还便于摇动均匀, 留一点空气在容器内，反而比不留空气长得快。 f. 如果有条件，您手上有PH试纸的话，可以测一下配好的菌液的PH值，一般菌液PH值在6.5-7.5之间； 2、光照培养： 通过以上操作，我们就有了配制好了的光合细菌菌液，现在，我们就要对菌液施以光照，这样，光合细菌有了培养基的营养物质，又获得了光照的能量，满足了光合细菌生长所需要的条件，光合细菌能够得到快速的生长和繁殖。 通过光照，菌液中的光合细菌开始生长，生长过程中，红色会越来越深，菌液越来越浑；几天后，菌液长成深红色并呈浑浊状态即为成熟，此时PH值为8.0-9.0。 根据您培养的数量，培养方法分为少量培养和规模培养；根据光照光源的不同，可分为灯泡培养和太阳光培养。 （1）少量培养： 如果您初次接触光合细菌，手上用于培养的菌种数量少，或者平时光合细菌用量较少，您可以采用少量培养的方法。 少量培养多使用白炽灯泡作光源，用白炽灯泡培养稳定性高，培养出来的光合细菌质量好，菌液浓度高，颜色鲜艳，可用作规模培养用的菌种。 少量培养方法非常简单，在气温高于30℃时（如夏季或春秋季里较热的时节），只需将菌液瓶围成一个圈，中间吊一个40-100W的白炽灯泡(钨丝灯，可发热的)，灯泡与瓶子距离在10-20公分，准备一个温度计监测培养温度，控制培养温度在30-38℃之间； 在气温低于30℃时（如冬季或春秋季里较冷的时节），我们可以使用纸箱保温培养,或用塑料布将全部菌液和灯泡遮盖起来以保温。 使用纸箱培养，用白炽灯泡作光源对菌液进行光照，同时灯泡本身发热，纸箱起保温作用，可提升纸箱内温度。 制作培养用纸箱：准备一个纸箱（如电脑纸箱、电视机纸箱等），纸箱顶部开一小半口(方便取放菌液瓶子)，纸箱中间悬挂一个40-100瓦的白炽灯(钨丝灯，可发热的)，在纸箱侧边钻一个小洞，从小洞中插入一根温度计(方便掌握箱内温度)，如右图： 箱内控制培养温度在30-38℃之间，温度太高可以在纸箱上戮孔散热或敞开培养，温度太低可以盖住纸箱上口，或在纸箱外用保温材料（如旧衣服、旧棉被等）加以包裹以提升箱内温度。 少量培养说明及注意事项： ① 灯泡与瓶子距离在10-20公分，太远光照强