光合细菌转化槲寄生制剂乙醇提取浓度的研究.doc

光合细菌转化槲寄生制剂乙醇提取浓度的研究 【摘 要】目的 确定光合细菌（PSB）转化槲寄生制剂中槲寄生乙醇提取的最佳浓度。方法 以荷Lewis肺癌小鼠为模型，以抑瘤率、免疫指标、抗氧化指标为标准进行筛选。结果PSB转化槲寄生制剂的各项指标均优于单纯的槲寄生制剂，其中以PSB转化槲寄生制剂Ⅱ的各项指标为最佳。 结论 槲寄生 75％乙醇提取物所制光合细菌转化槲寄生制剂为最佳。 【关键词】槲寄生；工艺学；光合细菌；抗肿瘤 槲寄生为桑寄生科槲寄生属植物 ， 文献 ［1，2］ 报 道 ， 槲寄生粗提物 、 槲寄生总生物碱具有抗肿瘤活 性 ， 但因其中含有对人体有害的毒肽和小分子蛋白 质 ， 限制了其应用 。 光合细菌 （PSB） 为一种有益菌 ， 可以转化中药中的一部分成分 。 本文以荷 Lewis 肺 癌小鼠为模型 ， 以抑瘤率 、 免疫指标 、 抗氧化指标为 标准对 PSB 转化槲寄生制剂中槲寄生乙醇提取浓 度进行了筛选 ， 报告如下 。 1 材料与方法 1．1 材料 1．1．1 药材 ： 槲寄生饮片 ， 购自定州医药公司东亭批 发部 ， 经山西医科大学高建平博士鉴定为桑寄生科 植物槲寄生 ［Viscum coloratum（Kom．）Nakai］ 的干燥 茎叶 。 1．1．2 试剂与药品 ： 环磷酰胺制剂 （CP）： 上海华联 制药有限公司出品 （ 批号 0402061）， 临用前用生理 盐水稀释到 10 mg/ml。 PSB 制剂 ：PSB 系紫色非硫菌 群 红 细 菌 属 的 球 形 红 细 菌 （Rhodobacter sphaeroides）， 由山西大学光合细菌研究室分离鉴定 保藏 ， 采用 Ormerod 培养基［3］ ， 光照厌氧培养 5 d， 浓 缩得 PSB 制剂 ， 菌液含菌数 1．6×10 9 个 /ml； 槲寄生制 剂Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ：分别为 50％、75％、95％的槲寄生乙醇 提取物 ， 制剂浓度以槲寄生原药材计为 0．5 g/ml； PSB 转化槲寄生制剂Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ：分别由 50％、75％、 95％ 的乙醇槲寄生提取物 ， 导入光合细菌后培养 5 d 得 PSB 转化槲寄生制剂Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ。 制剂浓度以槲寄 生原药材计为 0．5 g/ml， 菌液含菌数 1．6×10 9 个 /ml。 1．1．3 动物与瘤株 ： 动物 ：C57/BL 小鼠 100 只 ， 雌雄 各半 ， 体质量 （18.0±1．0）g， 由山西医科大学动物中心 提供 。 瘤株 ：Lewis 肺癌 ， 中国预防医学研究院提供 ， 山西大学光合细菌研究室传代保种 。 1．2 方法 1．2．1 瘤细胞接种 ： 取新鲜无坏死的 Lewis 肺癌瘤 组织 ， 无菌条件下匀浆 ， 制成单细胞悬液 ， 于 C57/BL 小鼠每鼠右侧前腋窝皮下接种 0．2 ml。 1．2．2 分组与给药 ： 接种后 24 h 将动物按雌雄对半 随机分成 10 组 ， 每组 10 只 。 荷瘤对照组 ： 生理盐水 灌胃 ， 每只 0．4 ml/d， 连续 15 d； 培养基组 ：Ormerod 培养基灌胃 ， 每只 0．4 ml/d， 连续 15 d； 环磷酰胺组 ： Optimal level of ethanol for extraction of Mistletoe preparations transformed by photosynthetic bacteria QI Xiao -mei * , ZHENG Qing -hong, YANG Guan -e, ZHANG Zhao -ming. * School of Pharmaceutical Sciences, Shanxi Medical University, Taiyuan 030001, China 【Abstract】 Objective To determine the optimal level of ethanol for extraction of mistletoe preparations trans- formed by photosynthetic bacteria (PSB). Methods The screening of ethanol level was performed using mice model of Lewis-lung tumor and based on the tumor inhibition rate, immune parameters and antioxidation parameters. Results All parameters for PSB transformed mistletoe preparations were be