免疫学SOP写作参考手册.doc

目 录 标本采集与管理 1 1 血液标本 1 2 尿液标本 2 特种蛋白测定 5 1 ARRAY分析系统 5 2 BNP蛋白分析系统 8 3 免疫分析的质量控制 10 4 特种蛋白检测的注意事项 13 4 特种蛋白的临床意义 14 5 特种蛋白检测后事务处理 23 自动化电泳技术 24 1 血清蛋白电泳 24 2 血清免疫固定电泳 28 3 尿蛋白电泳技术 33 4 自动化电泳技术的质量控制 37 5 蛋白电泳检测后事务处理 40 T淋巴细胞Ag-NORs检测 42 1 Ag-NORs测定的基本原理 42 2 测定方法 42 3 T淋巴细胞Ag-NORs检测的临床意义 43 4 注意事项与影响因素 44 5 Ag-NORs检测结果及报告时间 45 淋巴细胞亚群分析 46 1 检测原理(流式细胞术) 46 2 淋巴细胞亚群分析试剂 46 3 淋巴细胞亚群分析操作步骤 46 4 淋巴细胞亚群检测注意事项 48 4 淋巴细胞亚群分析临床意义 49 5 淋巴细胞亚群检测时间及报告 50 标本采集与管理 1 血液标本 1.1 采血标本的选择 1.1.1 生物钟周期的影响 人体内有许多系列化指标在一日内会出现周期性变化，因此采用适当时段的血标本对特种蛋白的检测是至关重要的。 1.1.2 饮食、饥饿 饮食对生化指标的影响取决于饮食中的成分及进食与采血时间的间隔，如果禁食时间太长又可引起部分特种蛋白指标偏低如补体C3、前白蛋白及转铁蛋白等。 1.1.3 运动 运动后由于出汗和呼吸加快，体液的量及分布发生改变，使部分生化指标偏高。 1.1.4 某些诊断手段的影响 有些诊断和治疗手段也可对检验结果产生影响，主要包括：外科手术，输液或输血，穿刺或活检等。患者在外科手术后可使C反应蛋白升高及白蛋白下降。 1.2.5 体位 人的体位改变可引起血液中许多指标发生变化。例如，从仰卧到直立时，由于血浆容积的重新分布，大多数生化物质从仰卧到直立增高5～15%如免疫球蛋白。 1.2 标本处理 1.2.1 血清和血浆 由于一些技术性和生理方面的原因，血清和血浆中某些生化指标会有所不同。一般来说，作特种蛋白分析的血液标本多数都采用血清标本如作蛋白电泳分析时血浆中常因纤维蛋白原出现在γ-球蛋白区带而干扰实验结果。 1.2.2 标本的保存 标本采集后应立即送检，不能送检的标本应在合适的环境下保存。一般血液标本应首先分离血清，分离的血清常存放在4℃环境中。血液标本放置时间过长，C-反应蛋白测定结果偏低。一般情况下，血液标本从采集到送检不能超过1小时，实验室则应对送检的标本及时检验，免疫学检验标本应在冰箱保存2天。 1.3 实验室验收血液标本的标准 1 实验申请单(化验报告单)应清楚填写下列内容：病人姓名、性别、年龄、科别、床号、病案号、住院号、申请序号、标本类型、临床诊断或主要症状、采集标本时间、实验室接收时间及申请检查的实验项目。 2 血液标本容器标签填写内容应与实验申请单的内容完全一致。 3 不同检测技术需要不同的血液标本种类，血液标本量不能少于最低检测量。 4 血液标本特殊检测应在规定的时间内送检。 1.4 实验室拒收血液标本的标准 1 实验申请单(化验报告单)填写的内容需与标本标签填写内容完全一致，否则拒收。 2 实验申请单(化验报告单)与标本标签应填写清晰，易于辨认和识别，否则拒收。 3 重度脂血、溶血的血标本，标本含量不足2.5ml者，拒收。 4 实验申请单(化验报告单)和标本容器受标本玷污者，拒收。 5 T淋巴细胞Ag-NORs检测标本应采用肝素抗凝，标本凝固、标本量不足1.0ml或溶血者，拒收。淋巴细胞亚群检测标本应采用EDTA抗凝，送检时间每周三上午8:00～9:00，标本凝固、溶血和标本采集超过2小时者，拒收。 2 尿液标本 2.1 收集尿液容器 收集尿液标本的容器多种多样，留取标本最基本的要求是使用清洁、干燥、方便的容器。无论采用何种容器，都必须满足下列要求： 1 送检尿标本容器上应用标签，并注明病人的姓名、科别、床号、收集标本的时间及检测项目。 2 容器只限一次性使用、清洁，不含有干扰实验的物质，如做细菌培养应使用无菌瓶。 3 所用容器至少可容纳50ml尿液，开口应大于4cm，底部要宽，以防止尿液溅出。 4 容器应方便运输，便于保存。 5 对于儿科患者，特别是新生儿，可使用小型、特殊的容器。 2.2 尿液标本的种类 2.2.1 首次晨尿标本、随机尿标本 收集早晨起床后的第一次和随机留取任何一个时间的尿液标本，不受条件的限制，此类标本容易获得，适合尿液常规检查和β2-微球蛋白检测。 2.2.2 12小时尿标本 即患者正常进食，晚上8点排空膀胱的尿液，再收集以后12小时内所有尿液标本，用于微量白蛋白排泄率测定。 2.3.3 24小时尿标本 病