自身抗体检测与临床应用进展-佛山市中医院.ppt

自身抗体是自身免疫性疾病的重要标 志。 自身免疫性疾病每种都伴有特征性的 自身抗体谱。自身免疫性疾病患者血 液中存在高效价自身抗体是它的特点 之一；也是临床确诊自身免疫性疾病 的重要依据。 39 抗核抗体的检测与应用 42 1.概念、ANA的性质 ANA的分类及命名 抗核抗体(antinuclear antibody,ANA)： 是一组将自身真核细胞的各种细胞核 成分作为靶抗原的自身抗体的总称。 43 ANA的性质 主要是IgG，也有其它类型。ANA无器官 特异性和种属特异性，可以与不同来源的 细胞核反应。迄今被人类所认识的抗体已 有二十余种抗核内不同成分的抗核抗体， ANA主要存在于血清中，也可存在于胸 水、关节滑膜液和尿液中。ANA阳性的 疾病很多，最多见于SLE，也可见于 MCDT、SS、PM、DM、PSS、AIH、桥 本甲状腺炎、重症肌无力及正常老年人 (低滴度)等。 44 命名 按细胞内分子理化特性与抗原分布部位分 为：抗DNA抗体、抗组蛋白抗体、抗非组蛋 白抗体和抗核仁抗体四大类抗体；而临床 检测中ANA的命名通常按以下三种方式进 行： ①根据抗原的化学名称命名，如抗ds- DNA、抗RNP、抗DNP抗体。 ②以第一位检出该抗体的患者命名，如抗 Sm、抗Ro、抗La抗体。 ③以相关疾病命名，如抗SSA、抗SSB抗 体。 45 2．检测方法 ANA抗体检测常用间接免疫荧光法 (indirect immunofluorecence, IIF)和 ELISA法，最常用IIF。 46 三、常见的ANA荧光图形及临床意义 52 在荧光显微镜下观察细胞核有荧光着色 为阳性反应。如将患者血清进行稀 释，可以作半定量试验，对疾病的诊 断有较大的参考价值。在荧光显微镜 下观察结果，可以出现不同的荧光核 型，核型的确定对临床诊断有进一步 的参考价值。 48 ①均质性（homogeneous, H） 细胞核均匀着染荧光， 有些核仁部位不着色，分 裂期细胞染色体可被染色 出现荧光。相关的抗体主 要有抗DNP抗体、抗组蛋 白抗体、抗ds-DNA抗体 等，主要见于SLE、还可 见于RA、AIH、PSS、传染 性单核细胞增多症或药物 诱发的狼疮等。 55 ②斑点型(speckled,S) 细胞核内出现颗 粒状荧光，分裂 期细胞染色体无 荧光显色。相关 抗体主要是抗ENA 抗体，主要见于 SLE 、 PSS、SS等。 56 ③核膜型(membranous,M) 荧光着色主要显示 在细胞核的周边形成 荧光环，或在均一的 荧光背景上核周边荧 光增强；分裂期细胞 染色体区出现荧光着 色。相关抗体主要是 抗ds-DNA抗体。主要 见SLE。 57 ④核仁型(nucheolar,N) 荧光着色主要在核 仁区，分裂期细胞 染色体无荧光着 色，相关抗体主要 是RNA抗体，如抗 RNA聚合酶-1、抗 U3-RNP、抗PM-Scl 抗体。主要见于 PSS、雷诺现象、 SLE。 58 ⑤着丝点型(centromere) 荧光染色为分裂象的 细胞核，核膜消失， 染色体向两端整齐排 列，着丝点部位着染 荧光，荧光斑点不会 超过染色体数。相关 抗体是抗着丝点抗 体，主要见于PSS、 CREST综合征。 59 ANA 核型与相关疾病 ANA 核型 抗 体 相 关 疾 病 核膜型 抗 DNA 抗体 主要见于 SLE 均质型 抗 DNP 抗体 SLE、RA、慢性活动性肝炎、PSS 等 斑点型 抗 ENA 抗体 SLE、PSS、SS、PM/DM、MCTD 核仁型 抗 RNA 抗体 PSS、雷诺现象、SLE 着丝点型 抗着丝点抗体 PSS、CREST 综合征 53 四、临床应用进展 140 自身抗体临床应用进展 检测项目：靶抗原特异化 检测质量：标准化、规范化 检测方法：多元化 应用临床 ：迅速 141 自身抗体临床应用概况 2000年代:自动化、高通量 90年代:商业化 80年代:HEP-2;ANCA 70年代:IP,IB 60年代: anti-ENA,DID ;AMA,ASMA ATM(1956)、ANA(1957) IIF 1948:LEC 40年代：RF（1940） 迄今已报道自身抗体有2000余种，仅SLE中存在的自身抗体 达百种以上 Yaniv S et al1.Semin ArthritiRheum,2004,34:501-537 . 142 自身抗体检测的临床推广应用 90年代以来,由于分子生物学技术、基因重组 技术及生物信息学应用于自身抗体靶抗原 的研究 靶抗原:纯化技术、重组抗原、合成肽抗原 更多新的、针对特异性靶抗原自身抗体被 发现 大量新的、疾病特异性自身抗体被应用于 临床 143 自身抗体检测与临床应