血浆蛋白和尿微量蛋白检测及其临床意义.ppt

血浆蛋白的组成十分复杂，目前还不知道血浆蛋白的确切种类和数量。保守地估计组成性血浆蛋白约有500种，它们多为糖蛋白, 血浆蛋白是血浆固体成份中含量最多、组成复杂、功能广泛的一类化合物。占血浆固体成份90%左右,目前已经研究的血浆蛋白质有300多种,分离出的纯品约100来种，除免疫球蛋白外，主要由肝细胞合成。血浆蛋白执行着人体的许多生物功能，在人类健康与疾病中有着重要的意义，人类很多疾病可引起血浆和体液中的蛋白质性质和含量的改变，因此，测定和分析血浆和体液中的蛋白质变化在临床上有重要价值。 尿微量蛋白是指用常规定性或定量方法难以检出的一些蛋白质。尿微量蛋白的检测对早期原发肾脏病及其他相关疾病引发的早期肾脏病变的诊断和治疗 有着非常重要的价值，尿微量蛋白的检测为临床上监测肾脏及某些其他器官功能状态，提供了可靠指标。目前已检出的尿微量蛋白种类、数量较多，其各自的理化特性、合成部位、生理功能都不尽相同。我们科目前已开展检测的有：尿白蛋白（AIb）、尿转铁蛋白（TRF）、尿IgG、 尿轻链（κ、λ）、尿β2微球蛋白（β2M）、尿α1微球蛋白（α1 M）、尿NAG等。 一 、血浆蛋白和尿微量蛋白测定方法的进 展 二 、各种血浆蛋白和尿微量蛋白检测的临 床应用 一 、血浆蛋白和尿微量蛋白测定方法的进展 （一） 比色法、比浊法 （二） 电泳分离法 （三 ）免疫测定法 （一） 比色法、比浊法 早期人们用比色法、比浊法测定人体血浆和体液中的蛋白质，如用双缩脉法、溴甲酚绿法测定血浆中的总蛋白、白蛋白等，用磺基水杨酸测定尿液中的蛋白质，这二种方法的优点是操作简单，重复性好，试剂稳定，成本低。但灵敏度和特异性较低，适用于测定人体中的常量蛋白。而对于人体中含量少的微量蛋白和一些特殊蛋白用上述方法就无法进行检测。 （二） 电泳分离法 电泳法分离法，最初以滤纸作为支持物，后来发展为醋酸纤维膜、琼脂糖凝胶、聚丙烯胺凝胶作为支持物，对血清和体液中的蛋白质进电泳分离，早期的滤纸和醋酸纤维膜作支持物可将血清蛋白分为白蛋白，α1球蛋白、α2球蛋白、β球蛋白和γ-球蛋白等。现在用聚丙烯胺作为支持物的电泳方法，可分离 100 种以上的血清蛋白质，可对尿液中的蛋白质进行分离。电泳法优点是可较好地分离血清和体液中蛋白，其缺点是操作繁琐 ，试验时间长。 （三 ）免疫测定法 1 免疫扩散法 其存在较多缺点，如操作繁琐，试验需要时间较长（18-48小时），定量精确度差等。 2 免疫电泳法 虽有较高的分辩力，但蛋白质在图谱上定位困难，且不能定量，临床应用范围不广，仅用于异常蛋白成分检测。 3 免疫浊度法 免疫浊度测定 Ag + Ab 免疫浊度法是利用抗原、抗体在缓冲液中反应，形成抗原-抗体免疫复合物颗粒，此复合物颗粒分子量较大，在缓冲液形成沉淀析出，使反应液产生浊度，在抗体过量的前提下，通过光束时，悬浮的免疫复合物颗粒所产生的透射、散射光速率变化强弱与抗原浓度成正比。速率峰值经微电脑处理转换成抗原浓度。特点是敏感、精确、快速、和简便 。 免疫浊度法根据检测器的位置及接收光信号的性质分为： 透射比浊法 散射比浊法 透射比浊法和散射比浊法检测示意图 Rate Nephelometry Fixed Time Kinetic 二 各种血浆蛋白和尿微量蛋白检测的 临床应用 我科的西门子特定蛋白仪可检测项目 ADnase B Albumin ?1-Antitrypsin ?1-acid-glycoprotein ?2-macroglobulin Apo A-I Apo A-II Apo B Apo E ASL AT-III ?2-microglobulin 测试项目 Albumin ?1-microglobulin ?2-macroglobulin ?2-microglobulin IgG Ig-light chain, kappa Ig-light chain, lambda Total protein Transferrin 涵盖最广泛的临床检测指标 免疫功能: IgA、IgG、IgM、C3、C4、Kap、Lam、IgG subclasses 1-4、IgE、C1抑制物 肾脏功能: 白蛋白、转铁蛋白、IgG 、 a1-微球蛋白、 B2-微球蛋白、a2-巨球蛋白、 Kap-轻链、Lam-轻链、Cystatin C 感染性疾病 :