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质控图的制作 陈杰 联系：3193531 Emile: ddcdc@yeah.net 质控血清 1．内部对照质控血清 2．外部对照质控血清 外部对照质控血清是各级实验室为了监控每次检测的重复性和稳定性以及检验试剂盒批间差异而设置的一套阴性和阳性对照血清。设立外部对照还可以提示标本处于临界值状态时的检验操作情况。 （1)外部对照质控血清的组成 理想的外部对照应该包括阳性对照、弱阳性对照、临界值对照和阴性对照。 在每次实验时应设置一个单一浓度水平的质控品即弱阳性对照。这个弱阳性对照的值以设定在该试剂盒Cut-off值的2－3倍为宜。 （2）外部对照质控血清的来源和选择 1）通过向有关机构购买获得 2）通过实验室制备获得 ( 比较经济的方法 ) ① 混合试剂盒内部对照血清，等量分装。 ② 混合HIV抗体阳性或阴性人血清，3000转/分钟离心15分钟，用0.2?m 生物滤膜过滤除菌后再进行56 ℃30分钟加热灭活处理。弱阳性对照可以通过使用HIV抗体阴性的正常人血清梯度稀释HIV抗体强阳性血清并经标定后得到。弱阳性对照的OD值以2－3倍于Cut-off为宜。 （3）外部对照质控血清的保存 1）外部对照血清或血浆的一次制备量应该足够本实验室一年使用 2）外部对照血清应该均一、无菌 3）外部对照血清标定后应该等量分装，每个分装的量应足够一周使用 4）外部对照应该分类作好标记，使用不同颜色的标签 5）外部对照血清应该存放在－70 ℃，如无条件则存放在非自动除霜的－20 ℃冰箱 6）外部对照血清一旦融解以后应该存放在 2－8 ℃，一周后必须弃去，不能重新冻存。 （4）外部对照质控血清的使用 原则上每一次实验必须使用外部对照质控血清，建立质控图，以便监控实验操作的一致性和结果的准确性。同时可以了解各批试剂盒之间的误差(批间差异)。 质控图(1) X-2S 建立质控图参数 对HIV抗体检测(ELISA)外部对照质控血清的评价采用多次测定的OD值的均值上下各两个标准差的范围，即外部对照OD值的95％可信限为 x ? 3s。各个外部对照的标定即确定外部对照的均值和可信限， 可用下列几个统计学参数来确定可信限: ① 算术平均值( x )代表一组OD值数的平均值。 ② 标准差(s) ③ 变异系数(cv)， 范例：参考郑怀竞主编《免疫学检验室间质评与室内质控》，1997年出版。? x 计算公式为： Σx x = ── N s 计算公式为： ─────── ∑( xn - x )2 s = ─────── N cv 计算公式为： s cv = ── x 100 % x 通过上表，计算S/CO值的均值（x），标准差（s）和变异系数（cv） x =1.72 s =0.29 cv =16.9% ? 根据以上数据绘制室内质控框架图, 开始质量控制 质控图(Levey-Jennings控制图) 质控图的判定和分析 ???如果检验进入质控状态时，质控对照值超出 ? 3s，则本次实验结果不能被接受( 失控 )。 ?????位移：如果几个连续质控对照值 (3-5次) 都落在均值(中心线)的一边则称之为位移，通常表示存在大的变化 ( 失控 )。 引起位移的原因有使用新批号的试剂盒、使用新试剂、实验员的更换、孵育温度的改变、仪器 ( 移液器 ) 故障等。 ????? 质控图的判定和分析 趋势：当几个连续质控对照值(5-7个)几乎按一个方向分布时称之为趋势(失控)，通常由参数的缓慢改变引起，如试剂失效和移液器逐渐不准确等。 发生漂移和趋势的最常见的原因是试剂(如酶标记物)或对照的失效。 质量控制图建立和分析的注意要点 a．可以先进行最佳条件下的变异测定，即在最佳条件下(人、仪器、试剂、实验室等因素)对同一批质控血清连续进行测定20次以上，获得一组数据，求 x 和s值。然后求出常规条件下的 x 和 s。如果常规条件下的