973项目参考标书.doc

项目名称： 靶向基因治疗的应用基础研究 魏于全 四川大学 2010年1月-2014年8月 教育部 四川省科技厅 靶向、高效靶向定点整合和原位修复、解决基因治疗的问题——。用于我国基因治疗基础研究和临床实践的发展，巩固我国基因治疗研究在国际上的地位，也为基因治疗药物产业的发展提供关键技术支撑。 非病毒载体的靶向性研究 制备各种新型可降解、安全性好的脂质体材料或多聚物载体材料，将各种靶向的配体或抗体连接于材料的表面，赋予其主动靶向性；用这些靶向材料负载目的基因，研究其体外包裹效果和体内靶向效率，研究其药代动力学性质及安全性、有效性。 3. 定点整合原位修复介导的整合位点特异性和效率，阐明研究介导的基因原位修复的 4．选择表达利用基因组学和蛋白质组学已有成果，筛选可受理化因素调控的转录因子，研究中有功能、可调控的结构域遗传病艾滋病、肿瘤等严重威胁人类健康的重大疾病治疗。二、预期目标 总体目标： 在“973”计划项目的资助下，通过努力在靶向基因治疗的基础理论和几大关键技术方面取得突破和创新，包括增强导入系统、定点整合原位修复、应用前景的基因治疗候选新药整合酶的结构和功能的关系，由基础研究突破，进而推动了我国基因治疗药物的发展，应用前景的基因治疗候选新药项 三、研究方案 总体思路： 本项目采用一种新的理念——即系统工程的概念来解决基因治疗中存在的关键问题。以基因治疗的靶向性为重点，围绕五个关键科学问题，从基因的输送、定点整合或原位修复、表达调控等几个层面入手，一环紧扣一环。各课题似“部件”或“元件”，相辅相成，有机组合成一个整体，最终创建出比较理想的基因治疗系统，进行遗传病、艾滋病、肿瘤和心血管病等重大疾病的基因治疗。本项目中的每一个课题都是在具有独立知识产权的、原创性工作的基础上的进一步拓展，每一个课题的突破都将带来基因治疗研究的进步，不仅能解决或阐明目前基因治疗中迫切需要解决的理论问题及关键技术，还能为临床应用提供技术支撑和潜在的产品。 技术路线： 本项目技术途径涉及到多学科多技术的交叉应用，主要通过利用现代基因工程和分子生物学技术、新型材料技术，结合细胞生物学技术、实验动物技术来实现。包括运用基因工程和分子生物技术实现对病毒载体的改造赋予其细胞吸附和转运进入细胞的靶向性或特异复制靶向性；运用材料学技术合成新型的靶向脂质体、PEI等新型材料，并与靶向配体偶联，赋予非病毒载体靶向性；改造病毒载体和质粒等非病毒载体，用靶向调控元件替换其非靶向元件，结合双基因甚至多基因表达等，实现基因在靶向器官或组织细胞中的特异性表达或者定点整合、原位修复。再用常规的检测技术、细胞培养技术、实验动物技术观察靶向导入系统对目的基因的靶向输送情况，目的基因的靶向表达情况，体外对肿瘤细胞、致病病毒复制情况等的影响，以及体内对各种重大疾病模型动物的治疗效果和毒副作用等，考察我们的研究成果是否取得突破以及潜在的临床应用价值。 可行性分析： 如上所述，本项目以增强基因治疗的靶向性为核心，解决基因治疗中的安全性和有效性问题，实现一批关键技术的突破，探讨这些新技术、新方法在遗传病、艾滋病、肿瘤和心血管疾病等的潜在应用。目标明确，课题设置合理，技术路线先进。项目的八家承担单位都是国内从事基因治疗研究的国家重点实验室，拥有项目所需要的各种技术平台和价值上亿元的先进仪器设备。项目的研究队伍聚集了国内长期从事基因治疗研究的优秀人才，有良好的合作基础。 本项目是上一期项目的延续实施和进一步深入。通过上一期项目的实施，已发表SCI论文00多篇，包括在国际权威的Nature系列杂志PNAS、、、HepatologyEMBO J等影响因子9以上的文章1篇，影响因子5分以上的文章0余篇获准专利授权20余项。靶向病毒治疗 本项目以基因治疗的靶向性为核心出发点，根据需要解决的6个关键科学问题，设置了6个课题，即： 新型靶向病毒载体研究 新型靶向非病毒载体研究 定点整合、原位修复技术及机理研究 靶向选择性基因表达调控研究 新型靶向基因沉默技术研究 重要疾病的靶向基因治疗研究 前五个课题重点解决靶向基因治疗的关键问题，课题六是前五个课题取得的创新成果和关键技术突破应用到重要疾病的基因治疗研究。各课题间密切相关，环环相扣，合起来形成基因治疗的有机整体。每个课题都设置各自的预期目标，保证了项目总体预期目标的完成。 课题1、新型靶向病毒载体研究 预期目标： 提供2个可供基因治疗临床应用的向性、低免疫原性腺病毒载体获得5个以上具有不同亲嗜体和组织表达特异性的AAV载体，其中1个以上可应用于临床基因治疗发表论文篇 申请专利 项 溶瘤HSV为研究材料，从细胞转导、转录和翻译等多个层面上进行溶瘤HSV的靶向性操作，发展新型三重靶向溶瘤HSV (triple t