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受体的放射配基结合分析 radioligand binding assay,RBA 受体（Receptor) 受体的概念最初是在经典药理学研究中提出的 (Langley, 1878), 并且首先是在药理学范畴内进行了大量研究，提出了许多迄今仍十分有用的基本概念，如配基占领学说、激动剂和拮抗剂、配基结合反应的质量作用定律 等。 受体的概念 迄今为止，所有已发现的受体都是有特定氨基酸序列和特定构型的蛋白质。 每一种受体在细胞上都有特定的宏观分布(器官和组织特异性)和微观分布(细胞膜或细胞核)。 受体接受细胞外的特定信号 (神经递质、激素、某些药物和毒物等，称为配基，ligand)，通过受体后特定的信号传递系统，引起细胞特定的生物效应，因此是高等动物适应环境、协调整体各种细胞功能的关键性分子。 受体及其信号传递系统参与了体内多种生理、病理过程，例如肿瘤的生成、免疫应答、补体激活等。 受体的分类 根据在细胞中的定位，过去把所有的受体分为膜受体、浆受体、核受体。 近年来有证据表明，过去认为位于细胞浆的甾体激素受体，在完整细胞内实际上是位于细胞核上，只是当没有激素与之结合时，它们和染色体的亲和力比较低，容易从染色体上脱落下来。 现在倾向于认为只有膜受体和核受体两大类。 1、膜受体： 膜受体的分子一般由几条到几十条氨基酸链组成胞膜外、胞膜内及跨膜区三部分。 配基从细胞的外侧与受体的胞外部分或跨膜部分上特定的结合位点结合，使受体分子发生构型变化，通过膜内部分将信息传给相应的信息传递机制，引起细胞功能变化。 根据膜受体的跨膜结构又可以分为： 单链跨膜受体：包括酪氨酸激酶型受体如各种生长因子受体；非激酶型受体如细胞因子受体。 G蛋白偶联受体：受体的氨基酸链7次跨越细胞膜，在人体内分布很广泛。 离子通道型受体：受体的几个组成亚单位竖插入膜，中央形成空隙即为离子通道，如N－胆碱能受体、甘氨酸受体等。 2、核受体： 为一条氨基酸链，可分为四个功能区： A/B区在不同受体中差异最大，主要功能是选择和激活基因转录。 C区为与染色体DNA结合的区域，上面有一定的氨基酸序列，能和靶基因上一定的核苷酸序列 (称作反应原件, response element) 相结合。 D区的主要作用是受体在核内的定位。 E区为配基结合的区，并有转录激活作用。 主要包括各种激素的受体： 糖皮质激素受体： 雌激素受体： 甲状腺激素受体： 受体的亚型 在药理实验等研究中发现，许多受体存在着两种或两种以上的亚型。 受体的亚型在分子结构上既有相似之处，又存在一定的差别，对一定的配基具有不同的亲和力，在生物学上具有不同的效应。 例如表皮生长因子受体家族就包括表皮生长因子、HER2、HER3、HER4等四个成员。 受体的信号转导途径 受体的主要作用是将细胞外配基携带的信号传递到细胞核内，使特定的效应器产生生物效应。 信号从细胞外传递到细胞内的过程称为信号转导（Signal transduction)，参加信号转导的一系列分子称为信号转导通路（Pathway)。 当表皮生长因子受体(EGFR）与配基EGF结合后，在细胞膜上发生二聚化，两个受体分子之间发生转磷酸化作用，受体分子胞内段的酪氨酸激酶被激活而使受体分子上的酪氨酸残基发生磷酸化。 磷酸化的酪氨酸残基为细胞内的一系列信号分子提供了结合位点，如磷脂酶C、磷脂酰肌醇－3－激酶、Grb2、shc等。 信号分子激活后将信号按各自的传递途径将信号传递到细胞核内，作用于细胞核内的效应器，产生生物效应。 受体与配基结合的特点 1、可饱和性（saturability)： 每种受体在一个细胞上的量有一定限度，所以如果不断增加细胞周围配基的浓度，结合到细胞上的配基将渐趋饱和。 2、特异性（specificity)和亲和力(affinity)： 一种受体只和一定结构的配基发生特异性的结合反应。 这种特异结合的特点是：具有立体异构专一性 ，亲和力高而结合容量少。 组织中其它化合物特别是其它蛋白质往往也能和配基发生结合反应，但亲和力低而结合容量大，不易被饱和，称为非特异结合 (non-specific binding, NSB)。 3、可逆性(reversibility)： 如果在放射配基与受体结合后将受体周围多余的放射配基移去(例如淋洗或透析)，则放射配基与受体的复合物会逐步解离，亦即这种结合是可逆反应。 如果向反应系统中加入大量非标记配基，使其浓度远高于放射配基，则将取代大部分原已结合的放射配基，使放射性复合物减少, 也说明