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专题微生物的培养与应用【目标导航1.了解有关培养基的基础知识,掌握无菌操作技术的有关内容。2.了解消毒和灭菌常用的方法及二者的区别。3.学会以大肠杆菌为材料进行微生物培养与分离纯化的方法。一、培养基与无菌技术
1.培养基
(1)概念:人们按照微生物对________________的不同需求,配制出供其________________的________________。
(2)成分:一般含有______、________、________、________,此外还要满足微生物对__________________(即生长因子)、________以及氧气的需求。
拓展深化
营养物质 定义 作用 主要来源 碳源 能提供所需______的物质 构成生物体的________和一些________,有些是异养生物的________ 无机化合物:CO2、NaHCO3等;有机化合物:糖类、脂肪酸、花生粉饼、石油等 氮源 能提供所需______的物质 合成蛋白质、核酸以及含氮的代谢产物 无机化合物:N2、NH3、铵盐、硝酸盐等;有机化合物:尿素、牛肉膏、蛋白胨等 特殊营养物质(生长因子) 生长必不可少的__________ 酶和核酸的组成成分 维生素、氨基酸、碱基等 水 在生物体内含量很高,在低等生物体内含量更高 不仅是优良的溶剂,而且可维持生物大分子结构的稳定 无机盐 为微生物提供除碳、氮以外的各种重要元素 细胞内的组成成分,生理调节物质,某些化能自养菌的能源,酶的激活剂 (3)培养基的种类
划分标准 培养基种类 特点 用途 物理性质 ______培养基 加凝固剂,如琼脂 ________ 半固体培养基 观察微生物的运动、分类、鉴定 ______培养基 微生物____、____、活菌计数、保藏菌种 化学
成分 ______培养基 含化学成分不明确的天然物质 工业生产 ______培养基 培养基成分明确(用化学成分已知的化学物质配成) 分类、鉴定 用
途 ______培养基 培养基中加入某种化学物质,以____不需要的微生物的生长,____所需要的微生物的生长 培养、____出特定微生物(如培养酵母菌和霉菌,可在培养基中加入青霉素或链霉素;培养固氮菌可用无氮培养基,如阿须贝培养基) ______培养基 根据微生物的代谢特点,在培养基中加入某种指示剂或化学药品 ____不同种类的微生物,如可用伊红—美蓝培养基鉴别饮用水或乳制品中是否有大肠杆菌(若有,菌落呈深紫色,并带有金属光泽) 病毒目前不能利用人工培养基来培养,需接种在动、植物组织细胞中才能繁殖。常用于培养病毒的是活鸡胚。
2.无菌技术
(1)概念:防止一切外来杂菌的侵入,并保持灭菌物品及无菌区域不再被污染的方法,称为无菌技术。
注意在微生物的实验室培养中,无菌技术的核心是________________,________________。
(2)无菌技术的具体内容
①对实验操作的________、操作者的________________进行清洁和消毒。
②将用于微生物培养的__________、接种用具和培养基等进行________。
③为避免周围环境中微生物的污染,实验操作应在________________进行。
④实验操作时应避免已________处理的材料用具与周围的物品相接触。
(3)消毒和灭菌的概念
①消毒:消毒是指使用________的物理或化学方法杀死物体表面或内部的________________(不包括芽孢和孢子)。
②灭菌:灭菌是指使用__________的理化因素杀死物体内外________________,包括____________。
③消毒与灭菌的区别:两者最大的区别是________________________。
拓展深化某些细菌在其生长发育后期,可在细胞内形成一个圆形的抗逆性休眠体,称为芽孢。每个细菌细胞仅形成一个芽孢,故它无繁殖功能。芽孢有极强的抗热、抗辐射、抗化学药物和抗静水压的能力。芽孢的休眠能力十分惊人,可保持几年到几十年的生活力。
孢子是微生物产生的一种有繁殖或休眠作用的细胞。一般是单细胞,个体微小,通常是适应于从不利环境条件中存活下来,并在条件改变时产生新的营养体,能直接发育成新个体。
(4)消毒与灭菌的常用方法
方法 条件 作用对象 消毒 ____
____ 100℃,煮沸5~6 min 杀死微生物的营养细胞和一部分芽孢 ________
____ 70~75℃煮30 min或80℃煮15 min 不耐高温的液体 ____
____
____ 70%的酒精 对双手消毒 50%的石炭酸、来苏水 对空气消毒 一定浓度的乳酸、食醋 通过熏蒸对空气进行消毒 紫外线法 紫外线照
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