迪安分子诊断.docx

??“全世界每年死亡的患者中，有1/3是药物不良反应所致。这是由传统的给药方式造成的，医生没有考虑人的个体差异，而是千人一药，千人一量。”——中国遗传药理学的开拓者、中国工程院院士周宏灏????????大规模人群调查和世界卫生组织调查均发现药物安全性问题是住院病人致死最重要的原因之一，居于全部死亡原因的第五位。最佳用药剂量很大程度上取决于药物相关基因变异，即单核苷酸多态性（SNP）。SNP的复杂性决定了药物反应的多态性，所以个体化用药也意味着理想的治疗需要进行全基因组的药物筛选。目前，个体化治疗已经成为恶性肿瘤、高血压、糖尿病等重大慢性疾病临床治疗的发展方向和最有效的手段。肿瘤个体化用药及有关检测?????????????????????????????????????????目前常用的抗肿瘤化疗药物对患者治疗的有效性低于70%，约20%-35%的患者接受了不恰当的药物治疗。如果肿瘤治疗能够同病异治、因人而异、实施个体化治疗，将能够大大提高疗效，避免过度治疗和降低患者经济负担，减少医疗资源的浪费。随着药物基因组学以及蛋白质组学、转录组学等高通量分子检测技术的出现，分子靶向技术治疗癌症的个体化治疗手段——即从个体基因组中分析和鉴别患者之间存在的疾病相关的个体差异，并利用这些差异来合理的指导临床治疗，已经成为医学界广泛共识。????????卫生部2010年11月首次发布了《结直肠癌诊疗规范》，明确规定：确诊为复发或转移性结直肠癌时，应进行相关基因状态检测，制定个体化治疗方案，患者确定为复发或转移性结直肠癌接受爱必妥、帕尼单抗（抗EGFR单抗）时，必须检测肿瘤组织的KRAS基因状态。肿瘤细胞表面存在着接收不同信号的通道。抗EGFR单抗通过阻断EGFR二聚体的形成，抑制其下游的细胞内信号传导，从而抑制肿瘤细胞的存活、增值等。但如果KRAS基因突变可旁路激活细胞内信号传导，从而导致抗EGFR单抗失效。所以，通过检测KRAS基因有否突变，医生就可以有针对性地区别给药。南京军总全军病例中心——迪安分子病理诊断中心????????南京军区南京总医院病理科是国内规模最大、水平最高的病理专业科室之一，同时开展医教研全面工作的病理专业科室，2005年首批成为全军临床病理中心。迪安诊断与南京军总病理中心整合优质技术资源，建立了“南京军总全军病理中心-迪安分子病理诊断中心”，配备了领先的技术平台（包括基因芯片、基因测序、实时荧光PCR、荧光原位杂交技术等），由多位博士、教授、主任医师亲自指导，旨在为华东乃至全国的医疗机构和患者提供高质量的肿瘤分子检测、诊断、咨询及学术推广服务。中心是全国性的、少有的具有医疗资质的专业分子病理诊断平台，是您肿瘤个体化用药相关检测服务的最佳选择。技术平台一：焦磷酸测序平台??????QIAGEN公司基于Pyrosequencing技术而研究开发的PSQ 96系统是一个理想的遗传分析技术平台，它既可进行DNA序列分析，又可进行基于序列分析的SNP检测及等位基因频率测定,它具有以下优点：1．不需要制胶，不需要毛细管，也不需要荧光染料和同位素。?2．10分钟内可分析96个样品的SNP，可满足高通量分析的要求。?3．每个样品孔都可进行独立的测序或SNP分析，实验设计灵活。?4．序列分析简单，结果准确可靠。利用该技术平台可开展以下项目：1．临床药物基因组学2．微生物分型及耐药检测3．疾病风险预测4．临床遗传学?5． DNA甲基化程度定量分析6．法医学鉴定???????焦磷酸测序法应用于肿瘤基因突变及甲基化、个性化用药相关检测相比荧光定量PCR法和Sanger测序法检测，具有更高的灵敏度，准确性和更高的通量，结果直观，判读更加简单、准确、快速，具有明显的优势。?二、荧光定量PCR （Roche LlightCyclerTM 480）结合高分辨融解曲线平台??????高分辨率熔点曲线分析（High Resolution Melting Analysis，HRM），无需序列特异性探针，无需测序，也不受突变碱基位点与类型的局限，应用Roche LlightCyclerTM 480荧光定量PCR仪器分析，即可完成对样品基因型的判断：◆操作简便快捷——通过实时荧光PCR+HRM技术，90分钟即可获得多达数十个样本的检测结果。?◆灵敏度高——最低检测限为5-10个基因拷贝。?◆选择性好——可在混有野生型基因组DNA情况下，检测出0.1-0.01％的突变基因，是测序方法的25倍-250倍。???? 可检测血清、血浆、尿沉渣等样本的微量突变或异常甲基化基因，可动态监测肿瘤靶向药物治疗后的突变情况。?三、荧光原位杂交（FISH）平台??????FISH(fluorescence in situ hybridization)技术是一种重要的非放射性原位杂