经典实验归类分解.doc

教材经典实验归类 一． 观察DNA和RNA在细胞中的分布 实验原理：DNA遇甲基绿呈绿色，RNA可被吡罗红染成红色。 实验步骤 步骤 器材与试剂 作用与原理 （1）制片 ①将牙签刮下的口腔上皮细胞置于载玻片上0.9%的NaCl溶液滴 ②载玻片烘干 1 0.9%的NaCl溶液防止细胞破裂， 维持细胞形态。 2 烘干使细胞固定在载玻片上 （2）水解 8%HCl中30℃保温5分钟 盐酸能改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞，同时使染色体中的DNA与蛋白质分离。 （3）冲洗 用蒸馏水缓流冲洗10分钟 （4）染色 2滴吡罗红甲基绿染色5分钟 甲基绿使DNA染上绿色 吡罗红使RNA染上红色 （5）观察 显微镜下观察 实验结果：细胞核呈绿色，细胞质呈红色。 分布：真核生物的DNA主要分布在细胞核中，线粒体和叶绿体内也含有少量的DNA；RNA主要分布在细胞质中。 二．检测生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质 实验原理：可溶性糖中的还原糖（如葡萄糖、果糖、麦芽糖），与斐林试剂发生作用，可以生成砖红色的沉淀。脂肪可以被苏丹Ⅲ染成橘黄色。蛋白质与双缩脲试剂发生作用，可以产生紫色反应。 1．还原糖的检测 还原性糖：有还原性基团——游离醛基或酮基的糖；如葡萄糖、果糖、麦芽糖。 （1）材料的选取：还原糖含量高，白色或近于白色，如苹果，梨，白萝卜。 （2）试剂：斐林试剂（甲液：0.1g/mL的NaOH溶液，乙液：0.05g/mL的CuSO4溶液），现配现用。 （3）步骤：取样液2mL于试管中→加入刚配的斐林试剂1mL（斐林试剂甲液和乙液等量混合均匀后再加入）→水浴加热2min左右→观察颜色变化（浅蓝色→棕色→砖红色） 2．脂肪的检测 （1）材料的选取：含脂肪量越高的组织越好，如花生的子叶。 （2）步骤：制作切片（切片越薄越好）将最薄的花生切片放在载玻片中央 ↓ 染色（滴苏丹Ⅲ染液2～3滴切片上→2～3min后吸去染液→滴体积分数50%的酒精洗去浮色→吸去多余的酒精） ↓ 制作装片（滴1～2滴清水于材料切片上→盖上盖玻片） ↓ 镜检鉴定（显微镜对光→低倍镜观察→高倍镜观察染成橘黄色的脂肪颗粒） 3．蛋白质的检测 （1）试剂：双缩脲试剂（A液：0.1g/mL的NaOH溶液，B液：0.01g/mL的CuSO4溶液） （2）步骤：试管中加样液2mL → 加双缩脲试剂A液1mL，摇匀 → 加双缩尿试剂B液4滴，摇匀 → 观察颜色变化(紫色) 三．显微镜的使用 1．显微镜的使用：取镜 → 安放 → 对光 → 压片 → 观察 → 收镜。 （1）低倍镜使用：（观察任何标本都必须先用低倍镜，且标本应透明） （2）高倍镜使用： 先使用低倍镜确定目标→移动装片，使目标位于视野中央→转动转换器，换用高倍镜→调焦（转动细准焦螺旋）(视野较暗，可调反光镜或光圈) 四．用高倍镜观察线粒体和叶绿体 1．材料：新鲜藓类叶、黑藻叶或菠菜叶，口腔上皮细胞临时装片 2．原理：叶绿体在显微镜下观察，绿色，球形或椭球形。 用健那绿染液染色后的口腔上皮细胞中线粒体成蓝绿色，细胞质接近无色。 步骤 操作方法 目的与作用 （1）取材 ①新鲜的藓类的叶 ②菠菜叶下表皮略带一些叶肉 ①藓类叶为单层细胞 ②下表皮容易撕取，要略带些叶肉 （2）制片 注意叶片不能太干了，保持有水的状态 以免影响细胞活性 （3）观察 叶绿体呈椭圆形，可随细胞质的流动而流动。叶绿体在弱光下以最大面积（长轴）转向光源，在强光下以最小面积（短轴）转向光源。 （1）取材 漱口，口腔内侧壁上轻刮几下 （2）染色 将口腔细胞放在健那绿液滴上 （3）观察 盖上盖玻片，显微镜下观察，线粒体被染成蓝绿色 问题 1．为什么不用植物细胞来观察线粒体？ 植物线粒体相对较少，叶绿体颜色易掩盖线粒体被染成的蓝绿色。 2．如果观察发现染色不足，如何补色？ 在盖玻片一侧滴加健那绿液，另一侧用吸水纸吸。 五．探究影响酶活性的因素 原理：淀粉遇碘后，形成蓝色的复合物。淀粉酶可以可以使淀粉水解成麦芽糖，麦芽糖遇碘后，不形成蓝色的复合物。 1．材料：新配置的淀粉酶溶液，新鲜肝脏研磨液，可溶性淀粉溶液，过氧化氢溶液等。 2．步骤： （1）探究温度对酶活性的影响 步骤 项目 试管1 试管2 试管3 1 加入可溶性淀粉溶液 2mL 2mL 2mL 2 放置在不同温度环境下5分钟 0℃ 100℃ 60℃ 3 加入新配置的淀粉酶溶液 1mL 1mL 1mL 4 滴入碘液 2滴 2滴 2滴 5 观察结果 变蓝 变蓝 不变蓝 在温度对酶活性的影响的实验中，三支试管的条件，除温度外均相同。 3号试管处在60℃的温度条件下，酶活性最大，试管中的淀粉被分解，滴入碘液后不会变蓝；