【2017年整理】食品原料中真菌毒素的酶联免疫检测技术应用.doc

陇东学院农林科技学院2014届毕业论文开题报告论文题目食品原料中真菌毒素的酶联免疫检测技术应用姓 名刘德政学 号2010311111班 级2010级食品科学与工程本科班指导老师韩雍来 源导师指定分类试验类一﹑课题研究现状﹑意义﹑拟研究的主要问题﹑重点﹑难点﹑研究方法和步骤﹑预期效果课题研究背景和意义﹑研究综述1.课题研究的背景、目的和意义1）研究的背景真菌毒素是真菌的二次性代谢产物，与真菌本身的生长发育无关，并不是所有代谢物都有毒， 一种真菌可能产生多种毒素，多种真菌可能产生同一种毒素。危害较大的有黄曲霉毒素、赭曲霉毒素A、单端孢霉烯族毒素、玉米赤霉烯酮、伏马毒素和麦角类生物碱等。 黄曲霉毒素是天然物中致癌性最强的毒素，也是世界各地的农产品及食品最易受其污染的一种真菌毒素，联合国粮农组织估计全世界谷物供应的 25% 受真菌毒素污染。 这些真菌毒素会通过被污染的谷物、饲料和由这些饲料喂养的动物所提供的动物性食品进入我们的食物链，从而对人畜表现出致癌性、遗传毒性、致畸性。作为一级预防的主要措施，就是制定真菌毒素的限量标准，因此，准确检测真菌毒素含量的技术手段变得极为重要。2）研究的目的、意义食品原料中存在的真菌毒素一直是威胁我们生命安全的重要因素,需要对原料中存在的这些有毒有害物质进行有效的检测。在食品安全的日常监管中,这些检查必须能够快速进行,并且在非实验室条件下操作也能提供稳定的性能、且必须具有一定的灵敏度和特异性,酶联免疫检测技术在这些方面具有广泛的运用。这一领域的发展趋势是基本检测方式的改变,常规分析一般只涉及在实验室使用色谱技术进行样品分析,这种传统的理化分析手段将为二级测试方法所替代,即先用简便、快捷的分析方法(如免疫法、生物传感器等)进行现场快速初级监测,然后对初级监测中呈阳性反应的样品进行实验确证,从而可大大减少分析工作量,提高分析效率。真菌毒素检测技术是真菌毒素污染控制的有效抓手,一直是国际关注和研究热点。我国历来重视真菌毒素检测技术研究与开发,近10年取得了重要进展,并在污染监测中发挥了重要作用。本文基于近年来研究进展和应用领域,阐述真菌毒素的酶联免疫检测技术在食品原料中的应用。2.酶联免疫检测技术的应用研究综述酶联免疫吸附分析（enzyme-linked immunosobent assay，简称ELISA）又称酶标法，是在免疫酶基础上发展起来的一种新型的免疫测定技术。由于ELISA具有选择性好、灵敏度高、检测结果准确、实用性强等优点，弥补了经典化学分析方法和其他仪器测试手段的不足，目前已广泛应用于临床医学生物学和分析化学等领域。近年来随着分子生物学技术、ELISA检测技术及其检测仪器设备的快速发展，其在食品安全检测中的应用也日益广泛。以下针对ELISA技术的应用研究做一综述。真菌毒素的检测：黄曲霉毒素 B1 、 M1 以及T-2毒素，脱氧雪腐镰刀菌烯醇（呕吐毒素 DON），二乙酰草镰刀菌烯醇（DAS），玉米赤霉烯酮，赫曲霉毒素A（OA）；农药的检测：主要有除草剂与杀虫剂两大类，例如杀暝松（FN）、甲氟磷酸异已酶（SOMAN）、草不绿（Alachor）、西维因（Carbaryl）、多菌灵及克菌丹（Captan）等；其他类的检测：盐酸克伦特罗，河豚毒素，植物毒素如罌粟硷、吗啡、 HYPERLINK /biology/Special/zaolei/Index.shtml \t _blank藻类毒素，苯并（a）芘，抗生素，激素类以及一些营养物质和食品添加剂如麸蛋白（Gliaclin），酱油蛋白（Soy protein），花生蛋白（Peanut protein），牛乳清蛋白（Borine Whey Protein）等。随着食品工业的发展，对分析检测的要求越来越高，从而也使 ELISA 方法将更趋完善。一方面为提高 ELISA 方法的灵敏度和特异性，制备单克隆抗体的技术的发展，将和 ELISA 法互相结合，从而使食品卫生分析达到 DNA 分子结构水平，促使食品工业的健康发展。酶联免疫检测技术最早是从放射免疫法(Radioimmunoassay,RIA)发展而来的。放射免疫法的优点是特异性强、灵敏度高、精确、简便易行。它包括以标记抗原(Antigen, Ag)为特点的放射免疫分析(Radioimmunoassay,RIA)和以标记抗体(Antibody, Ab)为特点的免疫放射分析(Immunoradiometric assay ,IRMA)。前者以液相竞争结合法居多，既测大分子抗原又测小分子抗原；后者以固相法测大分子抗原为主。最早建立的农药免疫法中，RIA占了很大比重，建立了狄氏剂、艾氏剂、2,4-D和2,4，5-T、对硫磷和百草枯等农药的放射免疫法。但由于进行RIA需使用昂贵的计数器，存在放射性防护和废物处理等