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第十九章 色谱法导论 generalization of chromatograph analysis 第一节 概述 色谱法是一种物理或物理化学分离分析方法，特别适宜于分离多组分的试样，是各种分离技术中效率很高和应用最广的一种方法。 它是利用各物质在两相中具有不同的分配系数，当两相作相对运动时，这些物质在两相中进行多次反复的分配来达到分离的目的。 第一节 概述 一、色谱法的起源和发展 俄国植物学家M.Tswett于1906年首次提出色谱法。 固定相(stationary phase)：填入玻璃柱内静止不动的一相(固体或液体)。 流动相(mobile phase)：自上而下流动的一相(液体、气体或超临界流体)。 色谱柱(chromatographic column)：装有固定相的柱子。 色带 固定相——CaCO3颗粒 流动相——石油醚 第一节 概述 1906 色谱法 1930 离子交换色谱法（IEC) 1938 薄层色谱法(TLC) 1941 分配色谱法(LLC) 1944 纸色谱(PC) 1952 气相色谱法(GC) 1959 凝胶色谱 (GPC) 1968 高效液相色谱法 (HPLC) 1988 超临界流体色谱(SFC) 第一节 概述 二、色谱法的分类 （一）按两相状态分类 按流动相的状态分类 ： 气相色谱法(GC)：用气体作为流动相的色谱法 液相色谱法(LC)：用液体作为流动相的色谱法 超临界流体色谱法(SFC)：以超临界流体作为流动相的 色谱法 按固定相的状态分类： 气相色谱法分：气-固色谱法(GSC)和气-液色谱法(GLC) 液相色谱法分：液-固色谱法(LSC)和液-液色谱法(LLC) 第一节 概述 （二）按分离机理分类 吸附色谱法：利用物理吸附性能的差异 分配色谱法：利用分配系数的不同 离子交换色谱法：利用离子交换原理 尺寸排阻色谱法：利用分子在固定相中的选择渗透 （三）按操作形式分类 1.柱色谱法 填充柱色谱 毛细管柱色谱 纸色谱法 2.平面色谱法 薄层色谱法 薄膜色谱法 第二节 色谱流出曲线及有关术语 一、色谱流出曲线（色谱图 ） 二、基线 当色谱柱后没有组分通过检测器时，仪器记录到的信号。 三、峰高 色谱峰顶点与基线之间的垂直距离称为色谱峰高，用h表示。 第二节 色谱流出曲线及有关术语 四、色谱峰区域宽度 用来衡量色谱峰宽度的参数，有三种表示方法： （1）标准偏差(?)：即0.607倍峰高处色谱峰宽度的一半。 （2）半峰宽(W1/2)：色谱峰高一半处的宽。W1/2=2.355? （3）基线宽度(W)：色谱峰两侧拐点上切线在基线上截距间的距离。 W=4 ? 第二节 色谱流出曲线及有关术语 五、拖尾因子 计算公式： T=W0.05h/2d1 拖尾因子用于衡量色谱峰的对称性。 T应在0.95～1.05之间，此时色谱峰为对称峰。 第二节 色谱流出曲线及有关术语 六、保留值 （一）保留时间 保留时间（tR）：组分从进样到柱后出现浓度极大值时所需的时间； 死时间（tM）：不与固定相作用的气体（如空气）的保留时间； 调整保留时间（tR ＇）： tR＇= tR－tM 第二节 色谱流出曲线及有关术语 (二) 保留体积 保留体积（VR）： VR = tR×Fc Fc为柱出口处的载气流量，单位：m L / min。 死体积（VM ）： VM = tM ×Fc 调整保留体积(VR＇)： V R＇ = VR －VM 第二节 色谱流出曲线及有关术语 （三）相对保留值ri，s 某一组分i的调整保留值与标 准物s的调整保留值之比，称为组 分i对标准物s的相对保留值ri，s ri，s = t′Ri / t′R s = V′Ri / V′R s 相对保留值只与柱温和固定 相性质有关，与其他色谱操作条 件无关，它表示了固定相对这两 种组分的选择性。 第二节 色谱流出曲线及有关术语 色谱流出曲线上重要信息： （1）据色谱峰的个数，可以判断试样中含组分的最少个数。