肿瘤侵袭转移研究进展及新世纪里的机遇与挑战.ppt

肿瘤侵袭转移研究进展及新世纪里的机遇与挑战 广东医学院病理学教研室 唐慰萍 1．人类对肿瘤生长与转移特性的认识 正常细胞转化为癌细胞必具备的六种能力 自身产生足够的生长信号 对抑制生长的信号失去敏感性 逃避凋亡调控机制 持续的血管再生能力 无限的自我复制 侵袭和转移 人类对肿瘤侵袭转移的认识 肿瘤是高度异质性的细胞群体 转移是一个多步骤、序惯的复杂过程 转移的发生是多因素相互作用的结果 2．具有不同转移潜能的癌细胞亚群的分离及转移动物模型的建立 转移细胞株筛选方法 体外筛选：有限稀释法等 CNE-2Z-H5,F1 体内筛选：裸鼠皮下-淋巴结转移灶循环或肺转移灶循环， 原位移植构建转移鼠模型等。 3．癌细胞侵袭转移相关因素的细胞生物学研究 癌细胞电泳率观察： 体外电泳率高的癌细胞其体内侵袭转移能力强。 癌细胞粘附性研究： 高转移癌细胞株对内皮细胞及基底膜粘附率明显高于低转移细胞株；同时，高转移癌细胞株的自身粘附力降低 。 4．肿瘤侵袭转移过程中的基因调控变化 （1）癌基因与肿瘤侵袭转移 高转移鼻咽癌细胞株(CNE-2Z-H5-9)中： c-myc、c-erbB-2、bcl-2、TGFα、EGFR、PDGFR等癌基因产物表达增强 (3) 转移相关基因和转移抑制基因 Tiam-1基因： 从小鼠T细胞淋巴瘤细胞中克隆出的转移相关基因。 Tiam-1蛋白能与CD44v、细胞骨架蛋白Amkyrin结合 。 参与细胞骨架的组织、细胞粘附、运动等过程。 转移抑制基因 nm-23 基因： 通过与NDPK相似途径参与细胞分化、信号转导的调控。 影响微管的聚合以调节细 胞运动。 影响G蛋白的信号转导过程。 与转移的关系： 在多数肿瘤中， nm23-H1表达水平与转移潜能呈负相关 常出现等位基因缺失，造成其蛋白功能异常 其它：如E-cadherin、KAI、Kiss、Maspin等基因 各种癌基因、抑癌基因在胃癌中表达情况： 我们的实验发现多种癌基因、抑癌基因、转移相关基因在各型胃癌原发灶及转移灶中的表达存在一定差异。 免疫组化检测各种癌基因在胃癌中的表达情况 胃腺癌原发灶和淋巴结转移灶中CD44v5和CD44v6基因的突变 CD44v5扩增成功28例，有两例发生突变。原发灶与转移灶一致。 CD44v6扩增成功30例，有四例突变。两例原发灶与转移灶一致，另两例转移灶见突变。 5. 微环境改变与肿瘤侵袭转移 （1）蛋白水解酶在癌侵袭转移中的作用 丝氨酸蛋白酶类，如纤溶酶原激活因子uPA、tPA、uPAR、PAI等； 金属蛋白酶类：如基质金属蛋白酶(MMPs)及其抑制剂 半胱氨酸蛋白酶类：如组织蛋白酶B，D等 弹性蛋白酶类 uPA、uPAR、PAI在不同转移潜能鼻咽癌细胞株中的表达情况 此外，我们还发现低氧可以诱导PAI表达，但使u-PA,u-PAR表达下降 基质金属蛋白酶(MMPs) 在鼻咽癌组织中的表达情况 （2）肿瘤血管生成与癌转移 肿瘤血管生成受多种促进血管生长因素和抑制血管生长因子的共同调控 淋巴管生成的研究正受关注 肿瘤血管生生成的调节 6.信号转导与癌转移 各种癌基因、抑癌基因和转移调控基因的表达产物都参与某种信号转导过程. 癌侵袭转移过程中存在多条信号转导途径的紊乱 如Ras-Raf-MAPK通路 、FAK途径 NF-κB途径、AP-1途径和Wnt通路等 7．侵袭转移相关基因的克隆及功能研究 克隆与鉴定癌侵袭转移相关基因一直是肿瘤生物学家关注的最大热点。 基因克隆与鉴定技术进展迅速 如差异显示技术(DD-PCR)、代表性差异显示（RDA)、抑制消减杂交(SSH)及cDNA微阵列技术等。 我们实验室： 已初步构建高低不同转移潜能的鼻咽癌细胞株差异cDNA消减文库，并进行生物信息学分析 问题与展望： 转移各步骤和不同微环境中癌细胞基因表达谱变化尚难确定 各信号转导通路之间形成的交叉对话(Cross-talking)机制有待阐明 肿瘤临床诊断、疗效评价及预后判断的敏感标记物有待确定。 高通量技术平台的建立将为肿瘤转移研究带来新的希望 谢谢！ l uPAmRNA 246bp M CNE - 2Z CNE - 2Z - H5 CNE - 2Z - H5 - 9 图1 uPA在鼻咽癌细胞中的表达 图2 各鼻咽癌细胞RT-PCR结果uPA mRNA与GAPDH mRNA灰度比值 图3 uPAR mRNA在鼻咽癌细胞中的表达 图4 各鼻咽癌细胞RT-PCR uPAR mRNA结果与GAPDH mRNA灰度比值 图5 PAI-1 mRNA在鼻咽癌细胞中的表达 图6 各鼻咽癌细胞RT-PCR结