13.2转录后RNA的加工.ppt

L19 RNA体外催化的反应 §13.2 转录后RNA的加工 反应时间 pG9 pG8 pG7 pG6 pG5 pG4 pG3 2、类型Ⅱ内含子的自我拼接 也是由内含子自 我催化完成，但转 酯反应无鸟苷的参 与，两次转酯反应 后内含子形成套索 结构而切下。 §13.2 转录后RNA的加工 3. hnRNA的加工：依赖snRＮP的剪接作用 U3 snRNP参与rRNA的拼接。 U1、U2、U4、U5、U6等snRNA结合形成的snRNP参与 hnRNA的拼接 小核RNA（Small nuclear RNA,snRNA）： 细胞核内存在的小分子RNA，大小约100～300个核苷酸， 因尿嘧啶含量较高得名，称之为U系列的snRNA 。 snRNA与多种蛋白质结合形成snRNP（核蛋白体）参 与hnRNA 的加工。 §13.2 转录后RNA的加工 §13.2 转录后RNA的加工 hnRNA的拼接过程 真核RNA聚合酶Ⅱ和转录因子在启动子上的装配 §13.1 DNA指导下的RNA 的合成：转录 起始复合物装配完成，TFⅡH使CTD磷酸化 2.转录的延伸过程： 延长反应开始后，TFⅡE、TFⅡH释放； 延长因子加入，与RNA聚合酶、TFⅡF形成延伸 复合物，使RNA聚合酶的延长效率大大促进； §13.1 DNA指导下的RNA 的合成 真核生物转录延伸过程与原核生物相似，但因核 膜相隔，没有原核生物的转录与翻译同步现象。 RNA聚合酶前移时会遭遇核小体，电镜可观察到核 小体移位和解聚现象。 §13.1 DNA指导下的RNA 的合成：转录 终止过程与RNA转录后的加工紧密联系； RNA聚合酶的终止反应的机理尚不明确，反应终止后， RNA聚合酶脱磷酸化，并重新进入下一个循环，准备 下一个转录的起始。 3.转录终止 六、RNA生物合成的抑制剂：三类 §13.1 DNA指导下的RNA 的合成 烷化剂：使DNA发生烷基化，发生在G-N7、A-N1或N3 或 N7 、C-N1，易引起嘌呤的水解，在DNA上留下空隙干扰 复制或转录；或引起碱基错配。 嵌入染料：可插入双链DNA相邻的碱基对之间，一般具有芳 香族发色团。溴化乙锭（EB）是一种高灵敏的荧光试剂， 常用来检测DNA和RNA。与DNA结合后抑制其复制和转录。 放线菌素D：放线菌素D与DNA形成非共价的复合物，抑制 其模板功能（低浓度抑制转录，较高浓度抑制复制）。具 有类似作用的还有色霉素A3 、橄榄霉素、光神霉素。 1、模板抑制剂 放线菌素 D：模板抑制剂 放线菌素D的结构与作用 （丫啶） 口 §13.1 DNA指导下的RNA 的合成：转录 2、嘌呤和嘧啶类似物：人工合成的碱基类似物能够抑制 和干扰核酸的合成或直接掺到核酸分子中，形成异常 RNA或DNA。 NH2 NH2 OH F NH2 SH §13.1 DNA指导下的RNA 的合成：转录 SH NH2 3、RNA聚合酶抑制剂 （2）利链霉素：与细菌RNA聚合酶?亚基结合，抑制转录过 程中RNA链的延长反应。 （3）?-鹅膏蕈碱：抑制真核生物RNA聚合酶活性。 （1）利福霉素：抑制细菌RNA聚合酶活性。利福平可以高 效抑制结核杆菌，杀死麻疯杆菌，在体外有抗病毒作 用。 §13.1 DNA指导下的RNA 的合成：转录 一、原核生物RNA的加工 四、RNA的编辑 三、RNA的拼接机理 二、真核生物RNA的加工 §13.2 转录后RNA的加工 本节主要内容 （一）mRNA前体的加工: 返回 一、原核生物RNA的加工 1、原核生物的mRNA大多 不需要加工，通常一边转 录一边翻译，即转录未结 束，翻译已经开始。 细胞内RNA聚合酶的翻译水平远低于核糖体蛋白的翻 译水平，将两者切开，有利于各自的翻译的调控。 类似的加工在某些噬菌体中也很常见。 2、少数多顺反子mRNA需要内切酶切成更小单位。 加工时即将两部分切开。 §13.2 转录后RNA的加工 核糖体大亚基蛋白基因 L10/ L7/ L12 RNA聚合酶亚基基因： β-亚基、β’-亚基 处于同一转录单位，同时转录，单独翻译 （二）、rRNA前体的加工 §13.2 转录后RNA的加工 甲基化 核酸外切酶 6500个核苷酸(30 S) 内切酶RNaseⅢ、P 外切酶 E.coli 30SrRNA前体的结构 §13.2 转录后RNA的加工 （三）、tRNA的加工 内切酶将tRNA两端切断； 核苷酸的修饰与异构化。 在3’-端加CCAOH序列;切 除居间序列； 外切酶从两端向内切去 多余序列：修剪； §13.2 转录后RNA的