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生化分离工程复习资料
生化分离工程
第一章 绪论
生物物质深度加工过程即生物物质分离、提取、精制的过程成为生物物质分离过程,将其应用于工农业生产部门便形成了生物物质分离工程。
生物技术下游加工过程的特点:1.发酵液或培养液是产物浓度很低的水溶液
2.培养液是多组分的混合物
3.生物产品的稳定性差
4.对最终产品的质量要求很高
生物技术下游加工过程一般步骤:1.发酵液的预处理与固-液分离
2.初步纯化
3.高度纯化
4.产品加工
生物技术产品分类:1.按分子质量大小分类
2.按产品所处位置分类
第二章提取、分离和精制过程中蛋白质活性的稳定性和保存
防止蛋白质纯化过程失活对策:
1.最重要的是要避免细菌的污染
2.水分的除去
3.高浓度的化学物质会使蛋白质变性也应避免
4.高浓度的底物、多元醇和稳定盐有利于稳定蛋白质
5.对蛋白质来说,为了防止硫羟基的氧化和降低光氧化的危险,除去空气至关重要
第三章 发酵液的预处理和菌体的回收
预处理的目的:
1.改变发酵液的物理性质,提高从悬浮液中分离固形物的速率,提高固-液分离器的效率
2.尽可能使产物转入便于后处理的某一相中(多数是液相)
3.去除发酵液中部分杂质,以利于后续各步操作
预处理方法:1.加热法
2.调节悬浮液的PH值
3.凝聚和絮凝(固定手法)
4.使用惰性助滤剂
第四章 细胞的破碎与分离
细胞破碎方法:机械法和非机械法
影响固体剪切细胞破碎的因素:1.转盘外缘速度
2.细胞浓度
3.珠粒大小
4.温度
5.流量
细胞破碎率的评价有直接计数法和间接计数法两种
第五章 离心分离
离心分离可分为:
1.离心沉降:利用固液两相的相对密度差,在离心机无孔转鼓或管子中进行悬浮液的分离操作。
2.离心过滤:利用离心力并通过过滤介质,在有孔转鼓离心机中分离悬浮液的操作。
3.离心分离和超离心:利用不同溶质颗粒在液体中各部分分布的差异,分离不同相对密度液体的操作。
离心沉降设备:
1.瓶式离心机 2.管式离心机 3.多室式离心机 4.碟片式离心机
超离心技术的规模分类为制备性超离心和分析性超离心
制备性超离心分离和纯化的一般方法:
1.差速离心法 2.一般密度梯度离心法 3.等密度梯度离心法 4.平衡等密度离心法
分析性超离心的作用:1.相对分子质量的测定
2.大分子纯度的估计
3.检测大分子中构象的变化
离心设备的放大:
1.等价时间Gt法 2.∑因子法
第六章 膜分离过程
膜分离过程的分类:1.以静压力差为推动力的过程
2.以蒸汽分压差为推动力的过程
3.以浓度差为推动力的过程
4.以电位差为推动力的过程
以静电力差为推动力的膜分离有:微滤、超滤、纳滤和反渗透
以蒸汽分压差为推动力的膜分离过程有两种:膜蒸馏和渗透蒸发
以电位差为推动力的过程原理:阴离子交换膜只能透过阴离子,阳离子交换膜则只能透过阳离子
膜的类型:1.有孔膜和无孔膜
2.膜对称性
3.不对称性或各向异性膜
表征膜性能的参数:通水量、截留分子量、抗压能力、PH适用范围、对热等等
浓差极化:是指在超滤过程中,由于水透过膜,因而在膜表面的溶质浓度增高,形成梯度,在浓度梯度的作用下,溶质与水以相反方向扩散,在达到平衡状态时,膜表面形成一溶质浓度分布边界层,它对水的透过起着阻碍作用。
膜污染:随着操作时间的增加,摸头过流速的迅速下降,溶质的截留率也明显下降的现象。
膜污染原因:1.膜的劣化:a.化学性劣化
b.物理性劣化
2.水生物(附生)污垢
预防和控制膜污染: 1.预处理法
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