生物技术制药前半部分重点.doc

生物技术制药之晓波重点 1.生物技术：生物技术是应用自然科学及工程学的原理，依靠微生物、动物、植物体作为反应器将物料进行加工以提供产品来为社会服务的技术。 2.基因工程技术：是将一种生物体的基因与载体在体外进行连接，然后转入另一种生物体内，使重组基因在受体细胞内表达，产生出人类所需要的基因产物。 3.细胞工程技术：包括细胞及转基因细胞的离体培养、繁殖、再生、融合以及细胞核、细胞器的移植与改建等操作技术。 4.酶工程技术：在一定生物反应装置中利用酶的催化作用，将相应的原料转化成有用物质的技术。 5.发酵工程技术（工业生产）：培养活细胞以取得生物体或代谢产物的技术。 6.生物制药：生物制药是指利用生物体、生物组织及其代谢产物或生物过程生产药物的技术。 7.生物药物:从生物体中制取的各种天然活性药物及其人工合成或半合成的天然药物类似物。 8.生物技术制药:是用现代生物技术制造生物药物的一门学科。 9.生物技术药物:利用现代生物技术生产的蛋白质或核酸类等生物药物。 10.什么是基因工程制药？ 利用基因重组技术将外源基因导入宿主菌或细胞进行大规模培养，以获得蛋白质药物的技术称为基因工程制药。 11.基因工程药物制造的上游阶段主要包括哪些内容？ 分离目的基因,构建工程菌,目的基因的表达。 12.基因工程药物制造的下游阶段主要包括哪些内容？ 工程菌的大量培养,产品的分离纯化,产品的质量控制。 13.基因重组蛋白的主要纯化技术（层析） 离子交换层析 亲和层析 凝胶过滤层析 反相色谱和疏水色谱 14. 凝胶过滤层析分离纯化蛋白质的原理是什么？ 答：是根据蛋白质分子量的大小来实现分离纯化的。 15.凝胶过滤层析的主要用途? 脱盐 生物大分子的分级分离 生物大分子的分子量测定 16. 由于目的蛋白质和杂蛋白分子量差别较大，拟根据分子量大小分离纯化并获得目的蛋白质，可采用???????（??C?） A、SDS凝胶电泳????? B、盐析法????? C、凝胶过滤?????? D、吸附层析 17.分离纯化早期，由于提取液中成分复杂，目的物浓度稀，因而易采用????（?A??）?????? A、分离量大分辨率低的方法????? B、分离量小分辨率低的方法???? C、分离量小分辨率高的方法?????? D、各种方法都试验一下，根据试验结果确定 18.简述亲和层析的主要步骤 配体固定化 亲和吸附阶段 洗涤阶段 洗脱解离阶段 再生阶段 19.下列哪种色谱依据蛋白质的分子大小进行分离？ (D) A. 离子交换色谱 B. 疏水色谱 C. 亲和色谱 D. 凝胶过滤色谱 20.下列哪种色谱依据蛋白质的等电点和表面电荷进行分离？(A) A.离子交换色谱 B. 疏水色谱 C. 亲和色谱 D. 凝胶过滤色谱 21.基因重组蛋白的主要分离技术包括（ABCD） A.离心 B.沉淀 C.膜分离 D.双水相萃取 22.下列哪项是基因重组蛋白的纯化技术(B) A.有限稀释法 B.离子交换层析 C.分批式操作 D.微载体操作 23.凝胶过滤色谱可用于：(C) A.配体固定化 B.等电点的测定 C.生物大分子脱盐 D.延长半衰期 24.关于疏水层析的陈述，下列哪项是正确的(B) A.表面介质疏水性强 B.流动相是水相 C.分离的产物易变性 D.可用于分子量的测定 25.基因重组蛋白的表达形式主要有 分泌型表达 在周质表达 胞内可溶性表达 包涵体形式表达 26.盐析后得到的重组蛋白能否直接进行： 离子交换层析？否 疏水层析？能 27.基因工程药物的杂质主要来源于宿主（蛋白）残留和宿主基因残留 28.细胞工程制药：是利用动物、植物细胞培养、转基因动、植物细胞及转基因动、植物生产药物的技术。 29. 动物细胞工程制药的主要内容是什么？培养动物细胞以获得多肽和蛋白质类药物；用转基因动物或转基因动物细胞生产疫苗、多肽和蛋白质药物。 30.动物细胞生产药物的优点 有翻译后修饰，与天然产品一致;分泌胞外、纯化方便。 31.动物细胞生产药物的缺点 培养条件高、成本高、产量低。 32.实验室动物细胞培养的基本技术主要有 细胞的原代培养 细胞的传代培养 细胞克隆培养 动物细胞的冻存与复苏 33.原代细胞：直接将动物组织或器官经过粉碎、消化而制得的悬浮细胞称为原代细胞。 34.动物细胞原代培养方法有哪些？ ①组织块培养法②单层细胞培养法 什么是细胞传代？ 将细胞从一个培养器皿中消化、分散并接种至另一个培养器皿中的操作称为细胞传代(passage)。 36.细胞克隆培养：细胞克隆培养即单细胞分离培养，是将动物组织分散后，将一个细胞从群体细胞中分离出来，由单个细胞培养