生物技术组织培养.doc

我国植物组织培养的研究现状及趋势 植物组织培养是从 20世纪 30年代初期发展起来的一项生物技术。它是指在无菌条件下 ,将离体的植物器官 (如根、 茎尖、 叶、 花、 未成熟的果实、 种子等 )、 组织 (如形成层、 花药组织、 胚乳、 皮层等 )、细胞 (如体细胞、 生殖细胞等 )、 胚胎 (如成熟和未成熟的胚 )、 原生质体 (如脱壁后仍具有生活力的原生质体 )培养在人工配制的培养基上 ,给予适宜的培养条件 ,诱发产生愈伤组织、 潜伏芽等 ,进而培育成完整的植株 ,统称为植物组织培养。由于是在试管内培养 ,而且培养的是脱离植株母体的培养物 ,因此也称之为离体培养或试管培养。根据外植体来源和培养对象的不同 ,又分为植株培养、 胚胎培养、 器官培养、 组织培养、 原生质体培养等。 1　 我国植物组织培养的应用现状 1 . 1　 在植物育种上的应用 1 . 1 . 1　 单倍体育种 　 单倍体植株往往不能结实 ,在培养中用秋水仙素处理 ,可使染色体加倍而成为纯合二倍体植株 ,这种培养技术在育种上的应用称为单倍体育种。单倍体育种具有高速、 高效率、 基因型一次纯合等优点 ,因此 ,通过花药或花粉培养的单倍体育种已经作为一种崭新的育种手段 ,并已开始育成大面积种植的作物新品种。 1 . 1 . 2　 胚胎培养 　 在植物种间杂交或远缘杂交中, 杂交不孕给远缘杂交带来了许多困难。而采用胚的早期离体培养可以使胚正常发育 ,并成功地培养出杂交后代 ,再通过无性系繁殖获得数量较多、 性状一致的群体。胚培养已在 50多个科属中获得成功。远缘杂交中 ,可将未受精的胚珠分离出来 ,在试管内用异种花粉在胚珠上萌发受精 ,产生的杂种胚在试管中发育成完整植株 ,此法称为“ 试管受精 ” 。用胚乳培养可以获得三倍体植株 ,为诱导形成三倍体植物开辟了一条新途径。三倍体加倍后能得到六倍体 ,可育成多倍体新品种。 1 . 1 . 3　 细胞融合 　 通过原生质体融合 ,可部分克服有性杂交不亲和性而获得体细胞杂种 ,从而创造出新种群或育成优良品种 ,这是组织培养应用最诱人的一个方面 ,已获得 40余个种间、 属间、 甚至科间的体细胞杂种、 愈伤组织 ,有些还进而分化成苗。目前 ,采用原生质体融合技术已经能将不易杂交的植物 (如番茄与马铃薯、 烟草与龙葵、 芥菜与油菜等 )原生质体融合后获得属间杂种。随着原生质体融合、 选择、 培养技术的不断成熟和发展 ,今后可望获得更多有应用价值的经济作物体细胞杂种及新品种。 1 . 1 . 4　 基因工程 　 用基因工程的方法 ,把目标基因切割下来并通过载体使外来基因整合进植物的基因组是完全有可能的 ,这项研究如果获得成功 ,将克服作物育种中的盲目性 ,而变成按人们的需要操纵作物的遗传变异 ,育成优良品种。目前这项研究成为最热门的领域 ,但植物的遗传背景比原核生物更为复杂 ,因此 ,要用基因工程实现作物改良以增加产量和改善品质 ,这是 21世纪生物技术领域要解决的一个重大科学问题。 1 . 1 . 5　 培养细胞突变体 　无论是愈伤组织培养还是细胞培养 ,培养细胞均处在不断分生状态 ,容易受培养条件和外界环境 (如射线、 化学物质等 )的影响而产生诱变 ,从中可以筛选出对人们有用的突变体 ,从而育成新品种。例如 ,对植物抗病虫性、 抗寒性、耐盐性、 抗除草剂毒性、 生理生化变异株等的诱发为新品种筛选和选育提供了丰富的变异材料。目前 ,这种方法已筛选出抗病、 抗盐、 高赖氨酸、 高蛋白、 矮秆高产的植物突变体 ,有些已应用于生产。 1 . 2　 在植物脱毒和快速繁殖上的应用植物脱毒和离体快速繁殖是目前植物组织培养应用最多、 最有效的一项技术。很多农作物都带有病毒 ,特别是无性繁殖植物如马铃薯、 甘薯、 草莓、 大蒜等。但是 ,感病植株并非每个部位都带有病毒。 White早在 1943年就发现植物生长点附近的病毒浓度很低甚至无病毒。利用植物茎尖组织培养方法 ,取一定大小的茎尖进行培养 ,可获得脱病毒苗,再用脱毒苗进行快速繁殖 ,生产大量脱毒种苗应用于农业生产 ,能极大地提高产量和改善品质。目前组织培养脱毒快繁技术在马铃薯、 甘薯、 甘蔗、 菠萝、香蕉、 草莓等主要经济作物上已成功应用。一些繁殖系数低、 不能用种子繁殖的“名、 优、 特、 新、 奇 ” 作物品种以及脱毒苗、 新育成品种、 新引进品种、 稀缺育种材料、 优良单株、 濒危植物和基因工程植株等都可通过离体快速繁殖 ,且获得比常规方法快数万倍至数百万倍的繁殖效果。另外 ,在观赏植物、 园艺作物、 经济林木上也大量利用了离体快繁技术 ,如华南植物园、 上海园林科研所等单位利用组培快繁方法繁殖兰花、 非洲紫罗兰 ,中国农科院花卉所成功培育