生物药剂学与药代动力学实验讲义.doc

实验一 对乙酰氨基酚片生物利用度和药物动力学参数的测定（尿药速度法） 【实验目的】 掌握用尿药浓度法测定药物制剂生物利用度（BA）、、等动力学参数的原理与方法，并加深对这些参数的理解。同时了解尿药浓度法的特点、数据处理方法及实验设计。 【实验原理】 单室模型口服尿药浓度速度法基本公式为 ·····················（1） 尿药总排出量可以从下式求得 ··························（2） 应用尿药浓度法直接测定生物利用度基本公式为 相对生物利用度＝···················（3） 【实验材料】 1．仪器 万分之一电子天平，紫外分光光度计，离心机。10ml具塞刻度试管（160支），1ml刻度吸管（24支），5ml刻度吸管（12支），100ml容量瓶（7个），250ml容量瓶（3个），洗耳球（24个）。250ml量杯（4个），1000ml量杯（8个）。 2．试剂及配制 0.4％氢氧化钠溶液（需250ml） 4N盐酸溶液 (需1000ml)：取33.2ml浓盐酸，加蒸馏水溶解，稀释至100ml。 显色剂(需1500ml)：取0.2 N NaOH溶液80ml，加1％酚溶液10ml。振摇混匀后，加入碳酸钠－溴溶液100ml，混匀即得。 0.2N NaOH溶液：取NaOH 8g，加蒸馏水溶解，并稀释到1000ml。 1％酚溶液：吸取1ml液化酚（含量在99％以上），溶解于蒸馏水中，稀释至100ml。当天鲜配。 3N 碳酸钠－溴溶液：取10.6g无水碳酸钠，溶解于蒸馏水中，加15ml饱和溴水溶液混合均匀，并稀释至100ml。当天鲜配。 饱和溴水溶液：取适量液态溴，加入蒸馏水中，振摇溶解，放置至少24h后再使用。 3．药品 对乙酰氨基酚片（0.5g/片，100片/瓶，1瓶） 【实验内容与方法】 1. 对乙酰氨基酚片含量测定 取本品10片，精密称定，研细，精密称取本品适量（约相当于对乙酰氨基酚40mg），置250ml量瓶中，加0.4％氢氧化钠溶液50ml与水50ml，振摇15分钟，加水至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml，置100ml量瓶中，加0.4％氢氧化钠溶液10ml，加水至刻度，摇匀，照紫外－可见分光光度法（附录Ⅳ A，2005年药典二部），在257nm波长处测定吸光度，按C8H9NO2的吸收系数（E1cm1%）为715计算，即得。（计算公式A=ELC） ★数据记录：（测定波长257nm） ；样＝ ； ；样（g/g）＝ 2.尿药标准曲线的绘制 （1）对乙酰氨基酚贮备液的配制 取本品10片，研细，105℃干燥30min，精密称取本品细粉适量（相当于含对乙酰氨基酚1g），用蒸馏水溶解于250ml容量瓶中，冷却至室温后，稀释至刻度，置冰箱保存备用。 ★数据记录：样＝ ；＝ ；（μg/ml）＝ （2）标准溶液的配制 分别精密吸取上述浓贮备液2.5ml、5.0ml、7.5ml、10.0ml、15.0ml、20.0ml，加蒸馏水至100ml。制得标准溶液浓度分别为： ★数据记录： μg/ml， μg/ml， μg/ml， μg/ml， μg/ml， μg/ml （3）标准曲线的绘制 表1 标准曲线的绘制 操 作 0 2.5ml 5.0ml 7.5ml 10.0ml 15.0ml 20.0ml 标准溶液浓度（μg/ml） 0 标准液（ml） 1 1 （其它浓度操作与加入量2.5ml相同） 无药尿液（ml） 1 1 4N盐酸（ml） 4 4 水溶液煮沸时间（h） 1 1 加蒸馏水至（ml） 10 10 吸取上述液（ml） 1 1 加显色剂至（ml） 10 10 放置时间（min） 40 40 平均吸光度A （620nm） 3.尿药浓度测定 （1）受试者：8名自愿者，男女不限，身体健康。 （2）服药、集尿：服药前48h内不应服用含有对氨基苯酚的药物。服药者需禁食早餐。早7:30喝水150ml，7:55采集尿样作空白尿及作标准曲线之用。并尽可能将尿排空。早8:00用150ml 37℃左右的温开水吞服药片1片（0.5g/片）或者溶液剂（片剂溶解于50ml温开水，再喝100ml温开水），按表2时间收集尿液。收集时间不得改变，应收集完全，不得损失，并精确计算体积。保持尿样不被污染，每次计量后，记下毫升数。留尿样约10ml置冰箱中供测定用（试管应先编号，避免搞错！）。收尿容器必须用水冲洗，沥干备用。 表2 尿液取样时间表 编 号 采样时间 尿液体积（ml