生药考试题2.doc

定义，特点 1.生物技术制药 定义：生物制药就是根据生物体的这些特点从生物体（包括细胞）内制得的相关药物 特点：1. 药理学特性 ⑴ 治疗的针对性强，疗效可靠。 ⑵ 药理活性高 高活性物质。 ⑶ 毒副作用小，营养价值高 。蛋白质、核酸、 糖类、脂类等无害，还有营养作用。 ⑷ 生理副作用常有发生。 不同生物，甚至相同生物不同个体之间的活性物质有结果差异易引起免疫反应（重复给药易产生抗体）、 过敏反应 2、在生产的制备中特殊性 提取纯化工艺复杂/稳定性差/易变质腐败/注射用药要求 3.检验的特殊性 理化性质/生物活性/安全性检验指标 4、剂型要求的特殊性 易被人体胃肠道环境变性/酶解/给药途径会直接影响其疗效发挥。 2.基因载体，基因文库 需要运载工具（交通工具）携带外源基因进入受体细胞，这种运载工具就叫做载体（vector）。 将某种生物体内的DNA全部提取出来，选用适当的限制酶，将DNA切成一定范围大小的DNA片段，然后将这些片段分别与载体连接起来，导入受体菌的群体中，每个受体菌都含有了一段不同的DNA片段。这个群体包含了这种生物的所有基因，称为基因文库 .基因文库包括基因阿组文库.部分基因文库（如:cDNA文库） 3.抗体制药，抗体概念；单克隆抗体，双克隆抗体，双功能抗体，双链特异性抗体 抗体：指能与相应抗原特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。它是机体免疫系统受抗原物质刺激后，B淋巴细胞被活化、增殖和分化为浆细胞，由浆细胞合成和分泌的球蛋白 免疫球蛋白（Ig）是化学结构上的概念，抗体是生物学功能上的概念 所有抗体均是Ig，但并非所有Ig分子都具有抗体活性 单克隆抗体（简称单抗）是针对特异抗原产生的特异纯化抗体，它具体有高度专一性，能精确地瞄准、捕获目标靶点，特异性地与靶目标发生反应，因而有“生物导弹”之称。单克隆抗体是将抗体产生细胞与具有无限增殖能力的骨髓瘤细胞相融合，通过有限稀释法及克隆化使杂交瘤细胞成为纯一的单克隆细胞系而产生的。 由于这种抗体是针对一个抗原决定簇的抗体，又是由单一的B淋巴细胞克隆产生的，所以称为单克隆抗体 给动物接种抗原所获得的免疫血清或抗血清是多种抗体的混合物，它是由多种抗原决定簇刺激多株B细胞增殖分化所产生的， 称为多克隆抗体。 双特异性抗体(bispecific antibody,BSAb)是指能同时识别2种抗原的抗体。1种为对应肿瘤相关抗原。另1种为对应效应成分。 双功能抗体就是双特异性单链抗体（ bispecific single-chainFvs, bisFvs） 非天然抗体，结合抗原的两个臂且具有不同的特异性。 将抗Ａ抗原抗体的轻链可变区基因(VLA)与抗Ｂ抗原抗VHB)通过短肽连接子连接构成双链抗 complementary determining region, CDR）:V区某些特定氨基酸残基显示更大的变异性，构建了抗体分子和抗原分子发生特异性结合的关键部位。H和L链各有三个CDR，其他部分称为框架区 简答 生物制药产业化的特点 四高一长：即高技术，高投入，高风险，高回报，长周期 获取目的基因的六种方法 ①从基因文库中获取 （基因组文库，部分基因文库） ②利用PCR技术扩增目的基因 （变性，复性，延伸） ③通过DNA合成仪用化学方法直接人工合成 聚合酶链式反应的条件和步骤 ① 概念：PCR全称为聚合酶的链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术 ③条件:已知基因的核苷酸序列, 四种脱氧核苷酸, 一对引物,DNA聚合酶 过程: 变性、退火、延伸三步曲 单克隆抗体的特性 高度均一性： 纯度很高的均一性抗体 高度专一性： 只对抗原分子上某一抗原决定簇起反应.大量产生及稳定性：杂交瘤细胞能在体内外无限繁殖之传代 基因克隆【单键链抗体】的优点 （1）分子小,（2）易于进行分子改造（3）体内半衰期短，免疫性低 单克隆抗体的制备即单克隆抗体的定义 单克隆抗体是将抗体产生细胞与具有无限增殖能力的骨髓瘤细胞相融合，通过有限稀释法及克隆化使杂交瘤细胞成为纯一的单克隆细胞系而产生的。 基因文库中目的基因提取方法的优缺点 鸟枪法 优点：操作简便广泛使用。缺点：工作量大，盲目，分离出来的有时并非一个基因 反转录法 优点：专一性较强,缺点： 操作过程麻烦，mRNA很不稳定，要求的技术条件较高 根据已知氨基酸合成DNA法;优点：专一性最高, 缺点：仅限于合成核苷酸对较少的简单基因 基因工程药物的特点 ①它将外源DNA的新组合引入到新的宿主生物中进行繁殖, 克服了生物种间的限制, 为 定向创造新生物带来了可能. ② 能够使一种确定的DNA小片段在新的宿主生物中扩增, 仅仅将需要的DNA片段转入到宿主细胞中, 避免了一些无用的、或有害的