第五章中药制剂中各类化学成分分析.ppt

pyh pyh pyh 第五章  中药制剂中各类化学成分分析 江西中医学院药学系 第一节 含生物碱类成分的分析 生物碱（alkaloid）的概念： 是一类含氮的碱性天然有机物，大多数具有复杂的环状结构，氮原子在环内，大多数具有光学活性，又特殊而显著的生理活性。 二、生物碱的性质： 1、性状： 多为无色晶体（少数为无定型粉末，还有为液体〕味苦辛辣，有旋光，与生理活性有关 麻黄碱 挥发性 咖啡因 升华性 2、溶解性：大多极性较小，游离状态下几乎不溶于水，溶于氯仿、乙醚、丙酮等有机溶剂；成盐后水溶性增加。 注意： 酚性生物碱可溶于有机溶剂，也可溶于碱水； 小檗碱盐酸盐难溶于水； 季胺生物碱一般来说水溶性大； 一、定性鉴别 中药制剂成分复杂，注意各成分之间 的相互干扰，进行化学鉴别反应时，先制 备供试品溶液，再提取分离生物碱成分后 进行。 1、沉淀反应： 注意假阳性 通常在酸性水溶液中进行，形成的沉淀的 颜色和形态因生物碱种类不同而不同 2、色谱鉴别： 薄层色谱： 常用吸附剂：硅胶G 氧化铝 展开剂：氯仿、苯 固定相为硅胶 ，流动相常加氨水或二 乙胺 方法：样品 碱化 氯仿提取 浓缩 点样 展开 显色 注意：板层上要有 对照品、对照药材、阴性对照 纸色谱法：不常用 高效液相色谱法： 定性鉴别参数：tR 样品需经预处理，使用预柱 气相色谱法： 适用于具有挥发性且过热不分解的生物碱 二、含量测定 方法较多，有酸碱滴定法、沉淀法、酸性染料比色法、雷氏盐比色法，还有分光光度法、薄层扫描法、高效液相色谱法、气相色谱法等 特点：取样量大，提取时易乳化、费时 沉淀重量法： 方法：样品 （碱化） 有机溶剂提取 蒸干 加酸溶解 沉淀试剂 沉淀 洗涤 干燥 称重 计算 含量 = 沉淀重量×化学因子 / 样品重量 特点：取样量少，操作繁琐费时 2、容量法： 常用方法有：水溶液酸碱滴定法、双相滴定法、络合滴定法、沉淀容量法 酸碱滴定法 （总生物碱的测定） 生物碱分子中含有氮原子具有一定碱性 直接法： ◎用酸滴定（游离生物碱溶于水或水－乙醇液） ◎用强碱滴定（生物碱盐溶于水或乙醇， 弱碱强酸盐显酸性） 2）间接法：加定量过量的酸溶液 碱标准溶液回滴定 终点指示：酸碱指示剂或电位计 碱性较弱的生物碱可用非水滴定法。 光谱法 利用物质对光所具的吸收性能而测定其含量的一种方法。 1、可见分光光度法（比色法）： 生物碱自身有颜色 与氧化剂产生颜色 与其他试剂反应产生颜色 直接比色测定常用于药味少、干扰小的中药制剂中总生物碱的测定 酸性染料比色法： 在一定PH条件下 雷氏盐比色法 方法：生物碱+雷氏盐 沉淀 溶于丙酮 520－526nm处测吸收值 （二）单体生物碱的含量测定法 HPLC ：可采用正相、反相、离子对色谱 常用反相高效液相色谱法（RP-HPLC） 固定相：C18、 C8 ( C8柱较好，硅醇基少） 流动相：加扫尾剂 三乙胺、离子对试剂、 季铵盐（溴化四甲基胺） 电解质缓冲溶液 TLC （TLC-S、TLC-UV） 分析前需用化学方法提取和纯化 固定相－用碱液（0.1-0.5mol/LNaOH或碱性缓冲溶液）代替水制作硅胶板层 流动相——氯仿为基本溶剂，加适量二乙 胺 展开缸内放含氨水的小容器 GC 适用于有挥发性，遇热不分解的生物碱，如：麻黄碱、苦参碱、颠茄