同型半胱氨酸与高血压防控.pptVIP

同型半胱氨酸与高血压及脑卒中相关性的研究 张伟毅博士 澳大利亚悉尼大学 同型半胱氨酸代谢途径 同型半胱氨酸又称为高半胱氨酸(Homocysteine,Hcy)，是甲硫氨酸的中间代谢产物，在体内由甲硫氨酸转甲基后生成，有两种去路，一是Hcy可在胱硫醚缩合酶(CBS)和胱硫醚酶的催化下生成半胱氨酸，需要维生素B6的参与，或经巯基氧化结合生成高胱氨酸，另外Hcy还可在叶酸和维生素B12的辅助作用下再甲基化重新合成甲硫氨酸，此过程需甲硫氨酸合成酶(MS)的催化，并且必须有N5-甲基四氢叶酸作为甲基的供体，后者是四氢叶酸经5，10-甲烯四氢叶酸还原酶(MTHFR)催化而产生 PCR for TNF-? 高同型半胱氨酸血症 相关疾病： 动脉粥样硬化 (1969) 心脏病 (1984) 脑卒中 (1991): 独立危险因素 中国高血压现状 高血压发病人数 : 约2亿 同型半胱氨酸与高血压: 原发性高血压伴高同型半胱氨酸血症 (血浆中浓度15 umol/L)：1.5 亿(占高血压病人75%) 心脏病及脑卒中发病风险: 28 倍 MTHFR 纯合突变型 (TT): 风险达到40倍 国内脑卒中现状 2008年在国内排名第一的死因为脑卒中 耗资(RMB): 4亿/年 病人: 750万 MTHFR MTHFR:亚甲基四氢叶酸还原酶 位置:?1p36.3（1号染色体短臂36.3） 基因多态性及突变 (43个位点) 基因型及表型 MTHFR 多态性 C677T MTHFR 1995（第677号位点由C突变为T） 不同基因型所保留的MTHFR活性: CC（野生型） – 100 CT（杂合突变型）– 71 (国人突变频率为35%) TT（纯合突变型）– 34 (国人突变频率为22%,白 种人仅10%） A1298T MTHFR 2001 其它7个较常见易突变位点 34 个不常见突变位点 2003 C677T 缺陷 高同型半胱氨酸血症 心脏病 脑卒中 深部静脉血栓 外周神经障碍 胎盘血管问题 (死胎) 胎儿发育不良、唇裂、妊娠中毒症等, A1298T 缺陷 抑郁、焦虑 纤维肌痛 慢性疲劳 偏头痛 痴呆 神经痛 精神分裂症 帕金森氏综合征 MTHFR C677T PCR扩增 基因组 DNA 100ng 引物各 10 pmol 上游引物: 5’-CAAAGGCCACCCCGAAGC-3’ 下游引物: 5’-AGGACGGTGCGGTGAGAGTG-3’ 1 X Taq酶缓冲液(2 mM MgCl2) Taq 酶 0.25 U 退火温度: 680C 产物片段长度: 246 bp MTHFR C677T的限制性片段长度多态性检测 限制性内切酶: Hinf I, 5 U 条 件: 370C 过夜 基 因 型:CC（野生型） - 246 bp TC（杂合突变型）- 246, 174, 72 bp TT (纯合突变型)- 174, 72 bp CBS CBS: 胱硫醚合酶 位置:?21q22.3（21号染色体长臂22.3） PCR for CBS 目的基因: CBS 844位点插入了68个基因 上游引物: 5’-TGCGAGGATGGACCCTTCGG-3’ 下游引物: 5’-GCAGTTGTTAACGGCGGTAT-3’ 1 X Taq酶缓冲液(2 mM MgCl2) Taq 酶 0.25 U 退火温度: 550C CBS的基因型 基因型: DD (野生型)- 148 bp DI（杂合突变型）- 216, 148 bp II（纯合突变型）- 216 bp 需检测人群 高危人群 1、原发性高血压 2、高同型半胱氨酸高血压 3、高血压伴随高血脂、高血糖 4、以前发生过血栓 5、家族史 预 防 叶酸: 400ug/天 孕妇 MTHFR 纯合突变型TT : 更多的叶酸 肝素: 低分子量 * * * * *