自家疫苗的制备.doc

自家疫苗的制备与使用 一、制作过程 1、采集病料 病料取自症状典型病程较长或濒临死亡的病猪% Q _- r! o% ]+ J# F$ O* G X病料组织为病原体侵害的靶器官2 W V, T/ P9 Q/ v R4 M4 e, R以高致病性猪蓝耳病为主症的应取肺、肝、淋巴结 Z, p5 L+ B+ h; n采集的病料迅速作冷冻处理以防变质2、切碎 用1000U/ml的双抗液冲洗病料表面,将冷冻的病料切成小块(除去筋膜气管及较粗的支气管,摘除心脏,但一定要取出肺门淋巴结),便于放入搅拌机中3、搅碎将碎块放入高速匀浆机中搅拌4-6次,搅成肉糊4、稀释按病料与生理盐水1：3-5的比例向肉浆糊中加入生理盐水成稀泥状5、过滤：将上步制成物分三次过滤 D6 I6 i; g8 \1 X3 ]. }第一次用一层纱布过滤0 g+ f7 R1 B! _! O+ A, K: u0 \! g第二次用两层纱布过滤1 j: T5 g1 d: T# w- h% L4 E( ^$ Y2 U第三次用四层纱布过滤% _7 N/ j) S, R; y ]; x（每次的滤渣丢弃0 c7 ^( w. p0 s. U6 B6 n. [, w; K滤液待用）向滤液加入生理盐水至所需要制作的量2 _% H( q6 w6 v, e! X6、醛化量 用适量的生理盐水稀释甲醛和溶解叠氮钠（甲醛用量占自家苗量的千分之八；叠氮钠用量占自家苗量的万分之五） 7、混合 将第6所制作的溶液加入第5所制作的滤液中（边搅拌边加入） 8、振荡 将第7步所制作的溶液置振荡器上1小时, J; o0 Q3 X# P2 Z8 y! I6 q) m+ w放入37℃培养箱中72小时（其中每隔4-6小时拿出来置振荡器振荡20-30分钟）1 m f. m$ E- Y5 r7 s; \1 X r, i7 }然后于2-8℃冷藏保存待用, }9 m. m q) v. ? a二、使用方法 1、无菌检查 将灭活后的自家组织苗接种普通琼脂培养基上37℃培养24-72h* `! |$ l! S Y* y3 q未见有细菌生长2、先用自家苗注射一两窝小猪观察两天看有无发生过敏反应、注射部位发生炎症) H$ M x6 i# I% U如果没有上述反应说明自家苗制作成功3、效力试验 采集１０头注射自家苗１５天仔猪的血清用猪蓝耳病抗体ＥＬＩＳＡ检测试剂盒检测效果4、临床观察 假定健康的若干头仔猪、母猪和育肥猪注射自家苗后若未再发生类似的临床症状则表明效果明显: m Z( m b ? m5、使用量 母猪产前４周注射１０ml／头乳猪：７－９日龄肌注１ml/头１５－１８日龄注射２ml/头小猪（３０－３５日龄）３ml／头中大猪５－１０ml／头8 t) ]: M/ T# D+ S0 x4 y. m4 {6、加双抗液：自家苗在临用时需加Ｓ．Ｐ．液或双抗液其配制方法：青霉素（４０万Ｕ）５支链霉素（２００万U）１支* q! R S g% n P; A, a共同溶于２００ml灭菌无离子水中9 W7 N6 a y2 h o0 |8 U( M* ~2 z E混合后分装小瓶置－１０℃～－２０℃冰箱保存备用（１万单位／ml）临用时. G+ p, T d5 g ]6 O( N# Y按１％的量加入营养液或其他溶液中最后浓度是青霉素100U/ml; [/ W) ^* b5 x链霉素１００U／ml8 V9 J V* ~2 ~8 n1 F1 v: a! I三、讨论与体会　 相当部分管片兽医反映有类似情况 K6 [ ]+ g3 }5 Y! a4 Q2、影响自家疫苗质量和效果的因素很多：１）取自活体病程长的猪的病料效果要好；2）使用来自本地、本场猪病料制作的自家苗效果要好；3）自家苗适宜的浓度效果要好；4）对假定健康猪防疫效果要好；5）病料采后迅速降温冷冻保存不腐败制作的自家苗效果要好；6）制作中充分灭活的自家苗效果要好, Z; O* H H/ j6 T3、自家苗治疗作用的机理不明4 Y# n$ H8 C0 A4 m可能性是自家苗中的特异性抗体的作用5 ^: h, \7 k) x9 E( m S2 K, P也可能是异体蛋白的刺激激活了免疫系统而提高了机体免疫力其机理尚须研究 疫苗免疫—制备自家苗预防仔猪大肠杆菌病 相关专题： 猪 时间：2011-10-31 17:30 来源： 阿里巴巴农业频道 【阿里巴巴农业】 仔猪黄白痢是养猪场 广泛存在的常见病，不仅给养猪业带来大量药物开支，也直接影响了仔猪的生长发育。引起仔猪黄白痢的大肠杆菌菌群多、抗原结构复杂(O抗原、H 抗原、K抗原)，且流行菌群有地方差异，因此控制难度较大。l 材料 1．1 病料广西武鸣县两家发生仔猪黄