自编基因工程操作步骤学案.doc

山东省昌乐一中 2011-2012高二生物学案 必修三 编号05 2012.1.4 班级 姓名 1．2 基因工程的基本操作程序 编制：王福玲 徐军胜 审核：王福玲 审批： 【学习目标】： 简述基因工程原理及基本操作程序。 【重点难点】： 1. 基因工程基本操作程序的四个步骤。 2.从基因文库中获取目的基因。 3.利用PCR技术扩增目的基因。 【自主学习】 基因工程的基本操作程序主要包括4个步骤：　　　　　　的获取、基因表达　　　　 的构建、将　　　　　　　　　　　　　　细胞、　　　　　　　　　　的检测与鉴定。 一、目的基因的获取 1、概念：目的基因主要是指编码蛋白质的　　　　　。也可以是一些具有调控作用的因子。 2、来源：（1）可以从自然界中已有　　　　　　　　　中直接分离出来。（2）从　　　　　　中获取目的基因。 3、获取目的基因的方法：根据基因的有关信息，如基因的　　　　　　　序列，基因功能、基因在　　　　　上的位置、基因的转录产物　　　　，以及基因的翻译产物　　　　　等特性来获取目的基因。 （1）利用PCR技术扩增目的基因：①PCR技术是一项在生物体外复制　　　　　　片段的核酸合成技术。②条件：提供已知　　　　 　　的核苷酸序列，根据这段序列合成　　　　。（2）人工合成方法：当基因较小，核苷酸序列已知时，可以用人工方法合成（例如，通过 　　　　　　直接合成）。 二、基因表达载体的构建 1、表达载体的组成 表达载体：目的基因、　　　　　　、　　　　　　、标记基因。 启动子：它是一段有　　　　　　　　　，位于基因的首端，它是　　　　　　　的识别和结合部位，起动转录mRNA。 终止子：位于基因的尾端，终止　　　　过程。 标记基因：用于　　　　受体细胞是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。 2、表达载体的功能：使目的基因在受体细胞中　　　　存在，并且　　　　　　给下一代，同时使　　　　　　能够表达和发挥作用。 三、将目的基因导入受体细胞 1、将目的基因导入植物细胞 （1）农杆菌转化法：①转化：目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程，称为　　　　。②农杆菌特点：在自然条件下能感染　　　　　植物和　　　　 植物，，对　　　　植物没有感染力；Ti质粒的　　　　可以转移至受体细胞，并整合到受体细胞的　　　　　　　　　上。 （2）基因枪法又叫　　　　　　　　　　。 （3）花粉管通道法：利用花粉管通道使目的基因进入　　　　，然后进入　　　　　　。 2、将目的基因导入动物细胞 （1）方法：　　　　　　　　　　　　　。 （2）操作程序：目的基因的　　　　　提纯→取卵（受精卵）→　　　　　　　→移植子宫内发育→新性状动物 3、将目的基因导入微生物细胞 （1）原核生物的特点：，　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。 （2）常用的受体细胞：　　　　　　　　　　　。 （3）转化：　　　处理细胞→　　　　　　细胞→表达载体与感受态细胞混合→感受态细胞吸收　　　　分子，完成转化。 四、目的基因的检测与测定 1、检测：（1）方法：　　　　　　　　　　　　　。 （2）原理：碱基互补配对 （3）内容：①检测转基因生物的染色体DNA上的　　　　　，原理是　　　　　　　技术。②检测目的基因是否转录出　　　，原理是　　　　　　　　技术。③检测目的基因是否翻译成蛋白质，原理是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。 2、鉴定：个体生物学水平鉴定，如抗虫、抗病鉴定等。 【自学检测】 1.下列正确表示基因操作“四部曲”的是 （ ） A．提取目的基因→目的基因导入受体细胞→基因表达载体的构建→目的基因的检测和鉴定 B．目的基因的检测和鉴定→提取目的基因→基因表达载体的构建→目的基因导入受体细胞 C．提取目的基因→基因表达载体的构建→目的基因导入受体细胞→目的基因的检测和鉴定 D．基因表达载体的构建→提取目的基因→目的基因导入受体细胞→目的基因的检测和鉴定 2．下列不属于获得目的基因的方法的是 （ ） A．利用DNA连接酶复制目的基因 B．利用DNA聚合酶复制目的基因 C．从基因文库中获取目的基因 D．利用PCR技术扩增目的基因 3.下列哪项不是基因表达载体的组成成分 （ ） A．启动子 B．终止密码子 C．标记基因 D．复制原点 4.下列哪项不是将目的基因导入植物细胞的方法