菌种的液体培养.doc

兰州交通大学化学与生物工程学院 综合能力训练Ⅰ——文献综述 题目:食用菌液体菌种的研究 作者：蒋成 学号：201207749 指导教师：谢放 完成日期：2014-7-16 食用菌液体菌种的研究 摘要： 本综述是对食用菌液体培养的历史以及发展进行介绍，对食用菌液体培养方法和条件进行阐述，以及影响它的因素及之中的检控参数，和液体培养的优点及其运用，和食用菌液体培养的展望的概述。 关键字： 液体菌种 食用菌 1.引 言： l.1食用菌液体培养技术概念的提出 食用菌的液体发酵技术起源于美国，据资料报道，1947年，美国的H．Humfeld对蘑菇进行深层发酵并得到菌丝体，从此食用菌的发酵生产在世界范围内兴起。1958年，J．Snlecs第一个用发酵罐来培养羊肚菌(Mon6dia)，从此食用菌液体培养制种的成功报道在国内外相继出现。1975年日本杉恒武等用1％的有机酸和0．5％的酵母膏作为培养基得到大量的香菇菌丝体，国内从1960年上海植物生理研究所的陈聿美等对蘑菇的深层培养进行研究以来，已经有许多单位和个人对数十种食用菌进行了液体培养的研究[5]。 我国对食用菌液体菌种培养技术的研究始于1958年对蘑菇和侧耳液体培养的研究，并在1963年进行了羊肚菌的规模化、工业化商品生产。从此，食用菌产品的获得开始由简单的农业种植而转入工业发酵生产阶段。 食用菌是一种重要的生物资源，在我国的森林山区中生长的种类与数量较多。在世界上来说，我国的食用菌资源极其丰富，也是最早开发利用食用菌资源的国家之一[1]。现在，随着社会的进步和人类生活水平的提高，人们对食用菌的需求和认识有了较大幅度的提高。但是，传统的小作坊栽培方法及生产方式已远远不能适应食用菌产业日益发展的趋势，大规模的机械化生产，已成为不可抵挡的发展趋势。 当前食用菌生产过程中使用的菌种大多是固体菌种,常以玻璃瓶或聚丙烯塑料袋作容器进行菌丝的培养;菌种生产的基本步骤为:母种扩大 原种生产 栽培种生产;其生产模式为:试管—瓶子—小袋—大袋的手工作坊式。这种传统的食用菌菌种生产过程一般要经过2-3个月的时间才能进行栽培生产[2]。 然而与固体菌种相比食用菌液体培养技术已经取得了很大的进展和可喜的成果，该技术是现代生物工程技术之一，具有生产周期短、效率高、成本低、便于工厂化大规模生产等优点，具有广阔的应用前景和较大的发展潜力[3-4]。 1.2培养条件及方法 （1）母种培养 将冰箱内保藏菌种接种于试管斜面,将培养好的液体菌种菌丝球接种于试管斜面上,在相同条件下(24~25度)培养,进行对比实验并观察记录。 （2）液体菌种培养 将冰箱内保藏菌种接种于液体培养基中,将培养好的液体菌种菌丝球继续接种于新鲜的液体培养基中进行对比实验,24~25度
震荡培养,震荡速度80~90rpm。 （3）栽培发菌实验 将培养好的液体菌种按5%接种量,接种于栽培生产培养料中,24~25度培养,观察记录发菌情况。 1.3食用菌液体制种检控参数 食用菌液体制种与固体制种所需的培养基是不完全一致的，而且固体制种过程中的检控参数很少。液体制种过程中的检控参数比较复杂，包括物理参数及生化参数[6]。 1.3.1物理参数 (1)温度它可影响发酵过程中基质的反应速率及氧的溶解度。温度和菌体代谢、代谢产物的产生有密切的关系。不同的菌体及同一菌体在不同的代谢阶段，其适应的温度也不同。温度可以运用Ptl00温度探头检测，从自动仪表上进行控制。 (2)压力发酵罐内维持一定的压力可控制压力为零时的杂菌污染，并且可增加发酵液中的溶解氧。考虑到二氧化碳在水中的溶解度比氧大很多，因此罐压不宜过度。食用菌液体菌种的生产，罐压一般可控制在0．3—0．5MPa左右。 (3)溶解氧发酵过程中的溶解氧与很多因素有关，包括通风量、搅拌程度、培养基的粘度、压力等。食用菌液体制种过程中，氧的消耗与菌体的不同生长阶段有关，一般在对数生长期为最大。提高通风量，增加搅拌程度，可提高溶解氧，菌丝体的得率也有一定的提高。 1.3.2生化参数 (1)pH发酵液的pH是整个发酵过程中各种生化反应的综合指标，通过对pH的检控，可以了解菌体的生产规律及代谢特征，掌握菌体的生长情况，培养出合格的液体菌种[7,8]。 (2)糖发酵液中的糖包括总糖和还原糖，都可以通过化学方法溅定，还原糖的变化反映了菌体对碳源的利用情况，残糖的多少决定菌体培养的好坏[9]。 (3)氮发酵液中氨基氮的变化显示出发酵液中氮源的变化规律，其含量的测定主要是对取样液进行化学方法测定[10]。 (4)菌丝形态通过对发酵液的镜检，