金纳米颗粒的合成.doc

目录 摘要 3 Abstract 4 1.引言 5 1.1. 传统实验方法 5 1.2. 基于纳米颗粒的实验方法 5 1.3. FRET和NSET 5 1.4. 捕光材料—共轭聚合物 6 1.5. 实验机理 7 1.5.1 嵌入染料TO 7 1.5.2 阳离子共轭聚合物PFP 7 1.5.3 实验过程 9 2.实验部分 9 2.1. 实验材料 9 2.2. 表征 10 2.3. 金纳米颗粒的合成 10 2.4. 金纳米颗粒的表面功能化 11 2.5. 金纳米颗粒表面DNA的固定 12 2.6. 表面固定DNA的GNPs的杂化 12 2.7. TO和PFP的NSET实验 12 2.8. 一个碱基不匹配的双链DNA S1核酸酶切反应的分析 13 3. 实验结果及分析 13 3.1. 以CPPs/GNPs/dsDNA复合物进行的核酸酶探测 13 3.1.1. PFP量的优化 13 3.1.2. GNPs-DNA量的优化 14 3.1.3. S1核酸酶探测 16 3.2. 以CPPs/TO/GNPs-dsDNA复合物进行的核酸酶探测 16 3.2.1. PFP量的优化 17 3.2.2.S1核酸酶探测 18 3.3. 用PG作为荧光探针 19 结论 21 参考文献 22 致 谢 24 摘要 我们使用共轭高分子/金纳米颗粒/染料标记的DNA复合物发展了S1核酸酶的一种新型检测方法，此方法利用了金良好的荧光淬灭性质和共轭高分子的信号放大特性。这种方法是由于纳米材料表面能量转移（NSET）中，能量从供体分子到纳米颗粒表面的转移遵循可预测的约为70-100nm的距离。在此过程中，由于从共轭高分子到嵌入染料进而到金纳米颗粒表面的NSET，不存在S1核酸酶的情况下将观察不到嵌入染料的荧光信号。而存在S1核酸酶的情况下，双链DNA被切离金纳米颗粒的表面，NSET过程中断，从共轭高分子到嵌入染料高效的荧光共振能量转移所得的嵌入染料的荧光得以恢复。 关键词 S1核酸酶分析，共轭高分子（CP），金纳米颗粒（GNPs），DNA，信号放大，纳米材料表面能量转移（NSET），荧光共振能量转移（FRET） Abstract A new strategy for S1 nuclease assay has been developed using conjugated polymer/gold nanoparticle/dye-labeled DNA complex by taking advantage of good fluorescence quencher of gold nanoparticles and the amplification feature of conjugated polymer. This method is based on nanomaterial surface energy transfer (NSET) which energy transfer from a donor molecule to a nanoparticle surface follows a predictable distance as large as 70-100 nm. In this process, no signal of intercalated dye was observed in the absence of S1 nuclease due to the NSET from conjugated polymer to intercalated dye and further to the surface of gold nanoparticles. In the present of S1 nuclease, dsDNA was cleaved from gold nanoparticles which intermit NSET process, thus recovering the fluorescence of intercalated dye through efficient fluorescence resonance transfer (FRET) from conjugated polymer. Key Words S1 nuclease assay, conjugated polymer(CP), gold nanoparticles(GNPs), DNA, signal amplification, NSET, FRET. 1.引言 实时高选择性及高敏感的酶检测方法对于科研和经济都是非常重要的。DNA酶切