车间环境卫生检测规范doc.docVIP

车间环境卫生检测规范 1.目的： 根据GB 12693-2010《乳制品企业良好生产规范》及本公司《生产洁净区环境、卫生管理规定》中的相关规定及要求，特制定本规范。 2.范围 本规范规定了本公司实验室实施车间环境卫生检测的依据、方法及检测结果判定标准。 本规范适用于本公司实验室实施车间环境卫生的各项检测。 3检测项目： 菌落总数、霉菌、酵母、阪崎肠杆菌、大肠菌群、沙门氏菌 4.检测频率及检测时间： 每日生产前进行生产设备、工器具、包装材料、员工个人卫生等部位的涂抹试验。 每日生产过程中对生产车间空气进行沉降试验。 5.职责 由检验人员负责车间环境卫生检测的具体操作。 6.检测方法 6.1空气沉降法 6.1.1 菌落总数： 1）车间空气采样：选取4个采样点，（见附录1车间空气采样位点图）。采样高度为1.2m~1.5m。采样点应远离墙壁1 m以上，并避开空调、门窗等空气流通处。 2）生产车间空气检测采样部位： 混粉间、杀菌机、预封机、真封机、100g灌装间、软包装灌装间、压片间、储粉间等，每部位为一采样点。 3）将营养琼脂平板置于采样点处，打开平皿盖，暴露 30min ,盖上平皿盖。反转平板，置36±1℃培养48h。 4）若为车间空气菌落总数测定，则应计算4个采样点菌落的平均数；若为生产车间空气检测采样部位菌落总数测定，则应计数每个平板上的菌落数，均以每皿菌落数（CFU/皿）报告结果。 6.1.2 霉菌、酵母： 1）、2）同6.1.1 菌落总数。 3）将虎红琼脂平板置于采样点处，打开平皿盖，暴露 30min ,盖上平皿盖。反转平板，置25±1℃培养3d~5 d。 4）若为车间空气霉菌、酵母总数测定，则应计算4个采样点菌落的平均数；若为生产车间空气检测采样部位霉菌、酵母总数测定，则应计数每个平板上的菌落数，均以每皿菌落数（CFU/皿）报告结果。 6.1.3阪崎肠杆菌 1）车间空气采样：选取4个采样点，（见附录1车间空气采样位点图）。采样高度为1.2m~1.5m。采样点应远离墙壁1 m以上，并避开空调、门窗等空气流通处。 2）将阪崎肠杆菌显色平板置于采样点处，打开平皿盖，暴露 30min ,盖上平皿盖。反转平板，置36±1℃培养48h。 3）计数每个阪崎肠杆菌显色平板上蓝绿色菌落，并计算4个采样点蓝绿色菌落的平均数，以每皿阪崎肠杆菌菌落数（CFU/皿）报告结果。 6.2表面涂抹法 6.2.1物体表面涂抹： 6.2.1.1菌落总数、霉菌和酵母 6.2.1.1.1将经灭菌的内径为5cm×5cm的规格板放在被检物体表面，用一浸有灭菌生理盐水的棉签在其内涂抹，然后剪去手接触的部分棉棒，将棉签放入装有10mL灭菌生理盐水/乳糖胆盐发酵管的采样管内及时送检。 6.2.1.1.2将每支灭菌生理盐水采样管充分混匀后，取1mL样液，分别放入灭菌平皿内，加入冷至45℃左右的营养琼脂/虎红琼脂约15mL，每个样品平行接种2个平皿，将营养琼脂平板置36℃±1℃培养48h.；虎红琼脂平板置25℃~28℃培养3~5d. 6.2.1.1.3.计数平板上的细菌/霉菌、酵母菌落数，以每毫升检样中的菌落总数（CFU）的平均数报告结果。 6.2.1.2 阪崎肠杆菌 6.2.1.2.1将经灭菌的内径为5cm×5cm的规格板放在被检物体表面，用一浸有灭菌营养肉汤的棉签在其内涂抹，然后剪去手接触的部分棉棒，将棉签放入装有10mL灭菌营养肉汤的采样管内及时送检。 6.2.1.2.2 将每支灭菌营养肉汤的采样管充分混匀后，取1mL样液，以0.3 mL、0.3 mL、0.4 mL 接种量分别加入三个阪崎肠杆菌显色平板，然后用无菌L 棒涂布整个平板，注意不要触及平板边缘。使用前，如阪崎肠杆菌显色平板表面有水珠，可放在25 ℃～50 ℃的培养箱里干燥，直到平板表面的水珠消失方可使用。 6.2.1.2.3 反转平板，置36±1℃培养48h。 6.2.1.2.4 挑取蓝绿色可疑菌落，采用API 20E进行生化鉴定及进行氧化酶、产黄素试验。 6.2.1.2.4 根据鉴定及试验结果报告检出或未检出阪崎肠杆菌。 6.2.1.3 沙门氏菌 6.2.1.3.1将经灭菌的内径为5cm×5cm的规格板放在被检物体表面，用一灭菌的棉签在其内涂抹，然后剪去手接触的部分棉棒，将棉签放入装有10mL灭菌营养肉汤的采样管内及时送检。 6.2.1.3.2将灭菌营养肉汤的采样管于于36±1℃培养8~18h。 6.2.1.3.3轻轻摇匀采样管内的混合物，取1mL样液转种于10mL亚硒酸盐胱氨酸（SC）内，于36±1℃培养18~24h。 6.2.1.3.4 用接种环取增菌液1环，划线接种于一个科马嘉显色培养基平板，于36±1℃培养18