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实验五-从番茄酱中提取番茄红素和beta胡萝卜素_901809322
实验五:从番茄酱中提取番茄红素和?-胡萝卜素
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实 验 目 的
学习从固体中萃取有机化合物的方法
学习用薄层层析法检验有机化合物的基
本原理。
学习点样,展开和计算Rf值的方法
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天然产物中有机成分的提取方法
浸取法:选用合适的溶剂,根据相似相溶原理,直接把溶剂加到固体样品上加热回流提取,本次试验就用的是此法。平时熬中药也是使用该方法。用水煮中药就是把中药的有效成分提取出来。
水蒸汽蒸馏法:天然动植物中含有一些较易挥发的成分。利用水蒸汽可以把这些物质蒸出提取。天然的很多香料的提取(如橙油的提取)就是用的此法。
连续提取法:原理同第一种方法,但是使用了一种特殊的装置—索氏提取器。使用少量的溶剂能重复用来浸取达到浓缩的目的。如:茶叶种咖啡因的提取就是用此法。
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加热回流装置图
两种化合物的结构
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本实验中薄板层析的爬板
色谱法包括薄层法、柱色谱、纸色谱、气相色谱和液相色谱,本学期只作薄层色谱。
色谱法是分离和鉴定有机化合物的常用方法。
原理:利用混合物各组分在固定相和流动相中溶解度不同,即在两相间中分配系数的不同而使各组分分开。
特点:时间短,分离效果好,需要样品量少。适用于在较高温度下容易发生化学变化的化合物。
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1. 薄层色谱法
事先准备:用铅笔和尺子轻轻画出起始线和终止线;
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点样:用直径1mm的平头毛细管点取提取物,先在废纸上点一下(快速),然后在起始线线上少量多次地点样(保证一定浓度,一般需要50次以上)。待溶剂挥发以后,轻放到装好展开剂的展开缸内,不要让展开剂溅起或倾斜。
展开(爬板):当展开剂爬到终止线时,停止爬行,取出。因为?-胡萝卜素(黄点)易挥发,所以要尽快画出黄点的位置;
Rf值的计算:分离效果好时Rf应为0.15 ~ 0.7
意义:定性鉴定,监测化学反应等。
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点样:再薄板一端10mm(下)及另一端5mm(上)处用铅笔轻轻画一道痕迹,用直径小于1mm的毛细管(平口)点样,点样时样点一定要小,可重复再一点上点几次,使样品点小而又有一定的浓度,一块板上可以点两点;
展开剂的选择:根据样品的极性而定,极性大的化合物可选用极性较大的展开剂。为达到较好的分离效果,可用混合溶剂。做多次展开后可确定一合适的配比。展开时,至溶剂前沿离板顶5mm停止。
显示方法:
A)有色化合物可直接观察;
B)无色的,用显色剂显色,如碘熏法;紫外光显色,用硅胶GF254,有样品点的位置再紫外灯光照射下发暗。
Rf值计算公式:Rf=溶剂的最高浓度中心 ? 溶剂前沿至原点中心的距离。
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注 意 事 项
本次实验使用95%乙醇和石油醚提取。两种混合后用N
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