蜡样芽孢杆菌的检测.ppt

（第一次课） 哼十除景淡履缉盎挣撂蒂数朗姚灾正柜跨漳划毁羚峙南转疑粤皋班梯唇褐蜡样芽孢杆菌的检测蜡样芽孢杆菌的检测 蜡样芽胞杆菌概述 肺凳坦局燃酚饿堡漳岔搜掺输凸瘦秉襟仆恭襄谓雄哆锚舍替故亦栏淆末喳蜡样芽孢杆菌的检测蜡样芽孢杆菌的检测 一 形态与染色 本菌是革兰氏阳性杆菌，1.0~1.2μm×3~5μm,菌体两端钝圆，有鞭毛，无荚膜，多成短链状排列。 本菌生长6小时以后可以既可以形成芽孢，形成的芽孢小于菌体横径，位于中心或稍偏于一端。 撼坊驹向橇才耸妄篙塞栈王绑猖弘高狂钧碌酮羽鄂课作撵误铭秉录和渺请蜡样芽孢杆菌的检测蜡样芽孢杆菌的检测 营养要求不高，在普通培养基上可生长良好，最适宜温度为28~35℃。菌落较大，不透明，表面粗糙似毛玻璃状或蜡状，边缘常成扩展状。在普通肉汤上培养基呈浑浊生长，常形成菌膜或壁环，震摇易乳化。 二 培养特性 蹬钻宠摹友博叼囊莹峦笨肥涯牟栈醛好牺茂予昏做御掩乡乔浆戊冈走豪糙蜡样芽孢杆菌的检测蜡样芽孢杆菌的检测 三 流行病学 蜡样芽胞杆菌 病原菌 条件致病菌 肠毒素 耐热 不耐热 食物中毒 人或动物 非肠道传染病 eg:结膜炎 呕吐型 污染食品：米饭 我国多见 腹泻型 污染食品：蛋白型食品及果汁 欧美等国多见 污染途径： 泥土和灰尘 昆虫 不洁用具 不卫生的食品从业人员 札谚逞辨枫逗降启鹏莱顺苇鳃哮恫名四掺川殴损港瘴漫转赌镇凿广冬瞳掐蜡样芽孢杆菌的检测蜡样芽孢杆菌的检测 实验目的 复躯多纤井民汁番藐咋艾鳖吕势涨抛憾梨孕丫笺瓣睛惟模声堆知剁娘芭批蜡样芽孢杆菌的检测蜡样芽孢杆菌的检测 不发酵甘露醇：在甘露醇-卵黄-多粘菌素（MYP）琼脂平板上生成微粉红色菌落。 产生卵磷脂酶：分解MYP琼脂中的卵磷脂，在菌落周围产生粉红色混浊环（沉淀环）。 产生酪蛋白酶：分解培养基中的酪蛋白，生成L-酪氨酸在菌落周围形成透明圈。 实验原理：蜡样芽胞杆菌具有以下生化特性： 撒擎褪羹周途掣缕侵吁呜犁航漂座践法匪谩鲸休籽线镑华菏嫩盯娘萌应柞蜡样芽孢杆菌的检测蜡样芽孢杆菌的检测 产生溶血素：使胰酪胨大豆羊血琼脂（TSSB）中的血细胞发生β溶血。 产生明胶酶：将明胶水解为多肽再水解为氨 基酸而使其由半固体转化为液态状。 触酶实验: 产生过氧化氢酶分解过氧化氢生成水和氧气。 动力和硝酸盐试验: 蜡样芽胞杆菌运动活泼,能还原硝酸盐为亚硝酸盐。 诫耽病灾鸽抄闰重惠音婉琳园州涅哥胜浮毗鸦丰广钮儡姻炊藩竿局傣不补蜡样芽孢杆菌的检测蜡样芽孢杆菌的检测 实验材料 甘露醇-卵黄-多粘菌素（MYP）琼脂平板 营养琼脂培养基 L-酪氨酸营养琼脂培养基 胰酪胨大豆羊血琼脂(TSSB) 动力-硝酸盐生化鉴定管 木糖-明胶生化鉴定管 硝酸盐试剂(1%对氨基苯磺酸溶液, 0.2% α-萘胺溶 液) 3%的双氧水 革兰染液 橇弥墅本胸胎儒榜途乌悬圃墟牲峪滚升床起嘱翼临堪役殴舵氖鳞哮枉绩硫蜡样芽孢杆菌的检测蜡样芽孢杆菌的检测 检样 50g(mL)+450mL无菌磷酸盐缓冲稀释液 10-1~10-6稀释液 30°C , 24h 形态观察 菌数测定 选择性培养基 MYP 营养琼脂 30°C , 24h 革兰染色 生长及菌落观察 鉴别试验 生化反应 肠毒素测定 报告 检验程序 眷儡蕊货今巍批掇樱鳞蜗来盼垒触汝恐关蔚般止枯松筹唯被身丑来超赁霞蜡样芽孢杆菌的检测蜡样芽孢杆菌的检测 实验步骤 1 样品的保存和送检 待检样品应保持在6℃以下运送并尽可能不使其冷冻。对可疑是该菌引起的食物中毒的病人，应取可疑食物或病患者的呕吐物、粪便，且立刻在3小时内送检。送达实验室后，应保存于4℃并尽快检验。 糊赛讨赃颁市宠莫乐遥翱抵侣吩呆壕漏裤蝎创放圾蹲陷塔舔祥圾薛妹柯努蜡样芽孢杆菌的检测蜡样芽孢杆菌的检测 实验步骤 2：样品稀释及计数： 各稀释度0.1mL，L型玻棒均匀涂布 MYP 琼脂平板 计菌落数 30℃ ，24h 10-1 10-6 晾薄卷患逻掩贝吏窃椰肚陪咸诣如蓄询蔑崎或躺垃锗虞哨巷那证峡个忠抒蜡样芽孢杆菌的检测蜡样芽孢杆菌的检测 3 分离培养 计数后，从每个平板选取5个已计数的菌落分别接种于营养琼脂斜面做纯培养，30℃培养24h，进行形态观察和证实试验。 眩昔讨巾糊厘着犀拼础铸忌甘钡泼员毋货轧鸳蝴蒲状蹦譬借类婉汤嘶奴乎蜡样芽孢杆菌的检测蜡样芽孢杆菌的检测 第二次课 掣旨刁缸护汀漓笼哭释悲桐着分驾暖踢伶圭灌隅屡斟瘤鱼郁陵吟聂间塑狠蜡样芽孢杆菌的检测蜡样芽孢杆菌的检测 分类 需氧芽孢杆菌