药物的安全性评价试验方法2.ppt

全身用药的毒理研究 第一节 新药急性毒性试验 急性毒性：24h内单次或多次大剂量给予某种药物所出现的有害作用。 二、试验内容 （一）半数致死量（LD50） 试验目的：观察一次给予受试药物后动物产生的毒性反应和死亡情况，计算LD50。 6、观察指标：中毒症状、LD50 中毒症状：被毛，行为学变化，情绪，神经症状（震颤、痉挛、抽搐、步态不稳等），呼吸频率，肛门周围有无污染，眼、鼻、口有无分泌物，体温，体重变化等 剖检检查：各脏器的变化等。 组织切片 LD50测定的缺陷： 1、动物消耗量大，获得的信息有限 2、影响因素较多，数据重复性较差 3、从安全性评价角度来看，需要的不是精确的LD50值，而是更多的毒性信息 （二）最大给药量试验 在受试药物合理的最大容积和最高浓度条件下，单次或24h内多次给予试验动物不产生死亡的最大给药量试验。 （三）最大耐受量试验 单次给药引起动物出现明显的中毒反应而未发生死亡的剂量。 多用于毒性较小的药物研究 试验方法： 1、动物：小鼠、大鼠、犬等 2、动物数：小动物10~20只；大动物4~6只（雌雄各半） 3、给药途径：临床给药途径 4、试验对照： 5、观察时间：7~14天大体解剖 如有改变——组织切片 6、结果与评价：描述动物单次大剂量给药或在24h内接受多次大剂量给药后，在短期内出现的与药物相关的毒性反应，发生、发展过程提供不引起动物死亡的最大剂量。 （四）固定剂量试验 不以死亡作为观察终点，而是以明显的毒性体征作为重点进行药物的急性毒性评价。 固定剂量法试验结果的评价 （五）近似致死剂量试验 1、估计可能的毒性范围 2、按50%递增法，设计出含10~20个剂量组 3、测出最低致死剂量和最高非致死剂量后，用二者之间的剂量（即近似致死剂量）给一只动物 三、LD50计算方法 Bliss法 加权概率单位法 寇氏法 改良寇氏法 第二节 新药长期毒性试验 长期毒性：试验动物连续多次接触较大剂量的药物所引起的中毒效应。 长期毒性试验：为观察药物的长期毒性而设计的毒理学试验。又被称为重复给药毒性试验。 长期毒性试验的目的 1、反复多次给药的情况下，实验动物出现的毒性反应、量效关系、主要的靶器官、损害程度及其可逆性。 2、获得反复给药情况下，实验动物能 耐收的剂量范围及完全无毒性反应的安全范围。 一、一般原则 1、试验动物：二种（啮齿类和非啮齿类） 动物数量、性别、年龄、敏感性 2、给药期限：一般为临床疗程的3~4倍时间 创新药品试验周期不少于90天 3、剂量选择：高中低三个组 高剂量组：能充分反映药物的毒性，但不能造成太多动物死亡。 低剂量组：无毒。 4、给药方法：最好与临床给药途径一致 5、观察途径： 日常观察（生长率、食耗、一般观察等） 测定指标：器官重量、血液学变化、血液生化学指标 二、检测项目 1、日常观察： 一般指标：被毛、皮肤、眼睛、呼吸、行为活动、病理检查等。 生长率 食耗 2、测定指标 血液学指标（红细胞、网织红细胞计数、血红蛋白、白细胞总数级分类、血小板等） 血液生化指标（天门冬氨酸氨基转换酶、 丙氨酸氨酸氨基转换酶、碱性磷酸酶、尿酸氮 、总蛋白、白蛋白、血糖、 总胆红素、肌酐、 总胆固醇） 器官重量 三、检测指标的时间 （一）检查间隔 一般症状：每天观察记录 测定指标：定期检查 （二）恢复期观察 最后一次给受试药物后，部分动物进行活杀检测各项指标，留下约1/3~1/4动物进行恢复期观察。 恢复期观察目的：了解毒性反应的可逆性和可能出现的延迟性毒性。 四、结果评价 1、试验结果数据应进行统计学处理 2、根据实验目的，结合观察到的毒性表现作出恰当的评价 3、通过实验结果确定毒性靶器官和毒性表现 4、可结合其他试验同时观察 第三节 制剂的全身毒性试验 一、静脉注射制剂的全身毒性试验 1、血管刺激性试验 目的：观察受试静脉注射制剂经多次给药后对血管刺激反应情况。 试验方法： 动物：家兔 分组：试验组、空白对照组 给药方法：多次静脉注射 观察指标：肉眼观察 病理切片 2、体外溶血试验 目的：观察静脉注射剂是否能引起溶血现象。 试验方法： （1）制备2%红细胞悬液 （2）加样 （3）保温 （4）结果观察 全溶血：溶液澄明，红色，管底无红细胞残留 部分溶血：溶液澄明，红色或棕色，管底有少量红细胞残留 不溶血：红细胞全部下沉，上层液体无色透明。镜检红细胞不凝集。 3、过敏性试验（致敏试验） 目的：观察受试药物经注射给药后有