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《利用育英学校植被进行组织培养》高一三.ppt

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《利用育英学校植被进行组织培养》高一三

*     一、研究背景 植物组培育细胞培养源于19世纪后半叶,当时植物细胞全能性的概念还没有完全确定。人们便对此进行研究。 目前,植物组培已经变成了一种常规的技术,广泛应用于植物的脱毒,快繁,基因工程,一串研究,次生代谢物质生产,工厂化育苗等多方面。     二、研究目的意义 【目的】 针对我校校园绿化状况,利用组培技术和现代园林绿化理论,研究植物的快速发展,繁殖,以及在校园,教室和办公室等的布置,美化校园环境,促进师生身心健康。 【研究意义】 快速繁殖某些稀有或经济价值较大的植物,在短时间内培养出应有价值的植物; 为植物中带有的名都脱毒,防止其影响植物产量与品质以及对农业带来的灾害; 用于植物种质资源的保存,挽救濒临灭绝的植物; 通过研究,掌握技术流程,对校园的植物进行组织培养。 三、研究过程 首先,确定研究内容,了解植物组培有关方面的资料,如:     1.植物繁殖的能力; 2.组培的培养基成分配制以及起作用; 3.组培的技术流程; 4.组织培养技术能够运用的方面; 5.走访校园里的养殖园区,认识植物。 之后,明确研究方案: 1.制定培养方案 2.外植体的选择与处理 3.接种 4.初代培养(形成愈伤组织) 5.继代培养(为了增加量,将愈伤组织切割后再行的培养基中增殖) 6.壮苗与生根培养(经过胚状体途径发育的苗数特别多,且个体弱小,需一个低浓度会无激素培养基培养阶段,以便壮苗生根) 7.试管苗的驯化移栽。 其次,进入动手实际操作环节,并做具体问题具体分析。 四、数据分析和结论 【组培实际操作步骤】    1.将锥形瓶中接入无菌水,放入灭菌锅中灭菌。将培养基按比例冲泡开,封口,放入灭菌锅灭菌。灭菌后,取出,将灭好菌的培养基溶液倒入灭菌后的锥形瓶中,等待其冷却。 2.将胡萝卜用水洗净,切割生殖能力最强的一部分(为里心与外圈中间的白圈)至5mm左右的小块,并用无菌水洗净;     四、数据分析和结论 3.用酒精将切割好的萝卜小块在培养皿中浸泡30-40s(以保证杀尽表面细菌,又不至于破坏植物的自身繁殖组织),取出,用无菌水清洗3-4次; 4.将经过处理的胡萝卜小块,用长镊子夹进培养基,使其大半部分在培养基中。封口。放入培养箱培养。 (注:整个过程都要在酒精灯附近进行,严禁用手触动材料,以免细菌的侵入,长镊子等工具均要在酒精灯上炙烤片刻,待冷却后方可接触所接种的植物。)     【结论】 在整个组培的过程中,最重要的一个环节便是“灭菌” 凡是暴露在空气中的物体,接触自然水源的物体,至少它的表面都是有菌的。依此观点,无菌室等未处理的地方、超净台的表面、简单煮沸的培养基、我们使用的刀、剪在未处理之前、我们身体的整个外表及与外界相连的内表,如整个消化道、呼吸道,即我们呼出的气体、培养容器无论洗得多干净等等都是有菌的。     植物组织培养对无菌条件的要求是非常严格的,甚至超过微生物的培养要求,这是因为培养基含有丰富的营养,稍不小心就引起杂菌污染。 物理方法如干热(烘烧和灼烧)、湿热(常压或高压蒸煮)、射线处理(紫外线、超声波、微波)、过滤、清洗和大量无菌水冲洗等措施;化学方法是使用升汞、甲醛、过氧化氢、高锰酸钾、来苏水、漂白粉、次氯酸钠、抗菌素、酒精化学药品处理。这些方法和药剂要根据工作中的不同材料不同目的适当选 用。     在培养出的各个“植物”中,不乏有各种各样的细菌的身影,它们都会影响植物的组织培养,可见,灭菌是至关重要的!可以通过以下几个方面,注意,并重视,严格按照要求进行操作: 1.在接种前20分钟,打开超净工作台的风机以及台上的紫外线灯; 2.接种员先洗净双手,在缓冲间换好专用实验服,并换穿拖鞋等; 3.上工作台后,用酒精棉球搽拭双手,特别是指甲处。然后搽拭工作台面; 4.先用酒精棉球搽拭接种工具,再将镊子和剪刀从头至尾过火一遍,然后反复过火尖端处,对培养皿要过火烤干; 5.接种时,接种员双手不能离开工作台,不能说话、走动和咳嗽等; 6.接种完毕后要清理干净工作台,可用紫外线灯灭菌30分钟,若连续接种,每5天要大强度灭菌一次。 【组培现状】 近年来,组织培养作为一种研究技术,已广泛地应用于许多学科中,它不仅对理论研究有重要意义,并已展现了十分广阔的应用前景。运用组织培养法繁殖植物,这是组织培养应用于生产的主要的和成效最大的实例。 随着环境的不断变化,许多种类的植物面临灭绝,而且许多植物已经灭绝,留给人类的只能是遗憾。实践证明,通过组织培养的方法可以挽救这些植物,还有许许多多的动物,使部分濒危植物种类得到延续和保存;如果再结合超低温保存技术,就可以使这些植物得到较为永久性的

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