细胞生物学实验手册.doc

细胞生物学实验手册 前 言 这本实验教材是为高等医学院校细胞生物学教学编写的，适用于五年制本科、七年制 临床专业和研究生班。 细胞生物学实验课的教学目的，主要是通过基本技能训练以及观察分析实验结果，使 学生了解并掌握有关的实验技术原理和操作方法，进而培养学生动手实践、观察分析和解 决问题的能力。为达到此目的，实验内容自成体系，着眼于加强学生的基末技能训练，以及 观察分析问题和科学思维能力的培养。大多数实验采用生活细胞材料，由学生自己动手取 材和实验，使学生能对细胞获得生动的认识。选编了一些生物医学常用的细胞生物学基本 实验，如细胞的显微测量、细胞活力测定、细胞计数、细胞组分的分级分离、细胞组分的化 学反应、细胞生理活动、细胞染色体技术、细胞培养、细胞融合、免疫荧光技术、电镜技术 等，为后续的课程及医学研究打下一定基础。 全书内容共23个实验，五年制本科、七年制医学专业和研究生班教学根据具体情况 选择基本实验，由学生自己动手操作，少数应用大型精密仪器的实验进行参观示教，另附 实验报告一册。 本教材由王芸庆主编、谢荣林副主编，参加编写的有陈兴、谢荣林、宁刚、刘冬杰、黄东阳、纪晓辉、时伟红、朱亚勤、黄集前、王明武、毕卫真、张婕、三维琴和王世藩。荆永显、李虹、王序绘制插图，毕卫真负责印刷出版事宜。 教材初稿曾于1989年《全国医学细胞生物学实验课培训班》试用，参加该班的教师提 出许多宝贵的经验及修改意见，谨此致谢。现在第四版在1993年第三版基础上对部分实 验进行了补充和修改，并增加了“酸性磷酸酶的显示”实验。由于经验不足，水平有限，本教材一定还有很多缺点和错误，敬请使用者批评指正。 目 录 前 言 实验室规则……………………………………………………………… (1) 常用实验动物了解和解剖器械的使用………………………………… (2) 细胞生物学实验绘图方法与要求………………………………………（4） 实验 一 动物细胞的基本形态观察和显微测量…………………………………（5） 实验 二 线粒体的活体染色及电镜照片观察……………………………………（8） 实验 三 液泡系的活体染色及电镜照片观察……………………………………（10） 实验 四 细胞中微丝的染色及微丝与细胞形态的实验观察…………………… (11) 实验 五 细胞器的光镜切片和电镜照片观察……………………………………（13） 实验 六 细胞生理活动的观察……………………………………………………（16） 实验 七 细胞组分的化学反应……………………………………………………（20） 实验 八 细胞核与线粒体的分级分离……………………………………………（23） 实验 九 细胞分裂的形态观察……………………………………………………（26） 实验 十 正常细胞与肿瘤细胞常规核型的标本制备…………………………… (31) 实验十一 细胞融合…………………………………………………………………（36） 实验十二 应用细胞融合技术制备染色体提前凝集标本…………………………（38） 实验十三 培养细胞的形态观察和计数……………………………………………（40） 实验十四 细胞的原代和传代培养…………………………………………………（43） 实验十五 酸性磷酸酶的显示………………………………………………………（46） 实验十六 肿瘤细胞的软琼脂集落培养和测定……………………………………（48） 实验十七 电镜生物标本的制备及镜下观察………………………………………（50） 实验十八 整装培养细胞生物膜系统的光镜和透射电镜标本制备与观察………（54） 实验十九 免疫荧光抗体法检查细胞表面抗原……………………………………（56） 实验二十 姊妹染色单体互换标本制备与分析……………………………………（58） 实验二十一 银染核仁形成区的光镜和电镜标本制备及观察…………………… (60) 实验二十二 染色体扫描电镜标本制备及观察……………………………………（63） 实验二十三 细胞显微摄影…………………………………………………………（65） 附录一 离心机转数与离心力的换算表………………………………（67） 附录二 溶液的配制……………………………………………………（68） 主要参考资料……………………………………………………………（77） 实验室规则 一、遵守实验纪律，按