2016届高考生物一轮总复习第42讲微生物的培养及应用考点整合解说.doc

第42讲　微生物的培养及应用 [考纲要求]　1.微生物的分离和培养。2.培养基对微生物的选择作用。 考点一　微生物的分离与培养 1．培养基 (1)概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。 (2)营养组成：一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。此外，还需要满足微生物生长对pH、氧气以及特殊营养物质的要求。 (3)种类：按照物理性质可分为液体培养基和固体培养基。 2．无菌技术 (1)含义：指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。 (2)关键：防止外来杂菌的入侵。 (3)不同对象的无菌操作方法(连线) 3．大肠杆菌的纯化培养 (1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 操作步骤 →→→→ 倒平板的方法及注意事项 a．请用文字和箭头写出正确的倒平板操作流程：丙→乙→甲→丁。 b．甲、乙、丙中的灭菌方法是灼烧灭菌。 c．丁中的操作需要等待平板冷却凝固才能进行。 (2)纯化大肠杆菌的方法 纯化培养原理：想方设法在培养基上得到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的菌落，即可获得较纯的菌种。 纯化大肠杆菌的关键步骤：接种。 常用的微生物接种方法有两种 a．平板划线法：是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。 b．稀释涂布平板法：是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。 系列稀释操作(如下图所示)： 涂布平板操作(如下图所示)： (3)菌种的保存方法 对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法。 对于需要长期保存的菌种，可以采用甘油管藏的方法。 [思维诊断] (1)培养基分装到培养皿后进行灭菌(2013·江苏，18A)(　×　) (2)从有机废水中分离分解有机物的微生物时，接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养(2013·江苏，18C)(　×　) (3)消毒的原则是既杀死材料表面的微生物，又减少消毒剂对细胞的伤害(2013·重庆，5A)(　√　) (4)培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，有时还需要加入一些特殊的物质(　√　) (5)无菌操作的对象只要是没有生物活性的材料(如培养基、接种环等)都可采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌(　×　) (6)下图中甲为平板划线法中最重要的环节，乙为操作的结果： 每一次划线后要将接种环灼烧(　√　) 除第一次划线外，每一次划线的起点都是第一次划线的末端(　×　) (7)用稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时，只要稀释度足够高，就能在培养基表面形成单个菌落(　√　) 题组一　培养基及其制备方法分析 1．不同的微生物对营养物质的需要各不相同。下列有关一种以CO2为唯一碳源的自养微生物营养的描述，不正确的是(　　) A．氮源物质为该微生物提供必要的氮素 B．碳源物质也是该微生物的能源物质 C．无机盐是该微生物不可缺少的营养物质 D．水是该微生物的营养要素之一 答案　B 解析　碳源分为有机碳源和无机碳源。当有机物作为碳源时，既是碳源，又可作为能源；当无机物作为碳源时，只能作为碳源，不能作为能源。该碳源是二氧化碳，属于无机物，不能作为微生物的能源物质。 2．下列关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述中，错误的是(　　) A．操作顺序为计算→称量→溶化→倒平板→灭菌 B．将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯 C．待培养基冷却至50 左右时倒平板 D．待平板冷却凝固后将平板倒过来放置 答案　A 解析　制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是计算→称量→溶化→灭菌→倒平板，其顺序不能颠倒。牛肉膏容易吸潮，所以称好后需将称量纸一同放入烧杯，当牛肉膏溶化并与称量纸分离后，用玻璃棒取出称量纸。待培养基冷却到50 左右，用手触摸锥形瓶刚刚不烫手，并且培养基处于溶化状态时开始倒平板，平板冷却凝固后才能倒置。 1．培养基的配制原则 (1)目的要明确：配制时应根据微生物的种类、培养目的等确定配制的培养基种类。 (2)营养要协调：注意各种营养物质的浓度和比例。 (3)pH要适宜：细菌为6.5～7.5，放线菌为7.5～8.5，真菌为5.0～6.0，培养不同微生物所需pH不同。 2．微生物对主要营养物质的需求特点 不同种类的微生物代谢特点不同，因此对培养基中营养物质的需求也不同。 (1)自养型微生物所需的主要营养物质是无机盐，碳源可来自大气中的CO2，氮源可由含氮无机盐提供。 (2)异养型微生物所需的营养物质主要是有机物，即碳源必须由含碳有机物提供，氮源也主要是由有机物提供，部分异养型微生物也可以利用无机氮源。 题组二　无菌技术的操作 3．微生物培养过程中，要十分重视无菌操作，现代生物学实验中的许多方面也要进行无菌操作，防止杂菌污染，请分析下列操作中错误的是(　　) 煮沸消毒可以杀死微生物的营养细胞和部分芽孢　接种