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(三)动物细胞融合的应用 二、单克隆抗体 如何大量生产单克隆抗体? 下图为某同学根据杂交瘤技术的方法,设计的生产破伤风杆菌的实验方案 3、图中B为________过程,常用_________作为诱导剂,该细胞继承___________的遗传特性,既能__________,又能___________。 1、该实验方案的目的是__________ 2、A是从小鼠的脾脏中取得_______,该细胞能够产生______ 4、C过程指细胞培养,该过程包括_____培养和_____培养两个阶段. 制备单克隆抗体 B细胞 抗体 细胞融合 灭活病毒 双亲细胞 分泌抗体 无限增殖 原代 传代 B 体外培养 骨髓瘤细胞 杂交瘤细胞 足够数量的细胞群 注射到 小鼠腹腔 A C 1、动物细胞融合和植物原生质体融合比较, 在动物细胞融合中有特殊性的是( ) A、融合的原理 B、融合的优点 C、融合的诱导手段 D、融合的过程 2、动物细胞融合的目的中最重要的是( ) A、克服远缘杂交不亲和 B、制备单克隆抗体 C、培育新物种 D、生产杂种细胞 3、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合, 得到杂交细胞,经培养可产生大量的单克隆抗 体,与骨髓瘤细胞融合的是( ) A、经过免疫的B淋巴细胞 B、不经过免疫的T淋巴细胞 C、经过免疫的T淋巴细胞 D、不经过免疫的B淋巴细胞 4. 单克隆抗体制备过程中,骨髓瘤细胞和B淋巴细胞 诱导融合后,要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞, 在这种培养基上不能存活增殖的细胞是( ) ①淋巴细胞 ②小鼠骨髓瘤细胞 ③B淋巴细胞自身融 合细胞 ④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞 ⑤杂交瘤细胞 A. ②④ B.①③⑤ C. ①②③④ D.②③ * 一、动物细胞融合 有些细胞的融合是正常的生命活动。如精子与卵细胞的结合。 两个细胞正在融合 受精作用 (一)概念 动物细胞融合也称细胞杂交,是指两个或多 个动物细胞结合形成一个细胞的过程。 (二)动物细胞融合的过程 与植物原生质体融合原理相同,方法类似。 杂交细胞:融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞。 一、动物细胞融合 ? ? ? ? 再分化 ? 植物细胞杂交技术利用什么原理? 用什么方法可以诱导植物细胞融合? 一、原理: 细胞膜具有流动性 细胞的全能性 二、诱导方法:离心 振动 电激 、聚乙二醇 植物细胞杂交技术有什么用途? 三、用途: 获得杂种植株 脱分化 用灭活的病毒诱导动物细胞融合过程 细胞核 病毒颗粒 细胞核 动物细胞A 动物细胞B 杂种细胞 动物细胞融合 ⑴.原理: 1、动物细胞融合的基本原理是什么? 2、动物细胞融合的诱导方式是什么?与植物细胞融合的诱导方式有什么不同? 与植物原生质体融合的基本原理相同,即细胞膜的流动性。 ⑵.诱导方式: 物理法: 电激、振动、离心 化学法: 聚乙二醇(PEG) 生物法: 灭活的病毒 例如:仙台病毒 灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面 细胞膜被病毒颗粒穿通 细胞膜连接 细胞融合,形成杂交细胞 (细胞膜具有一定的流动性) 1.概念: 2.结果: 3.原理: 4.诱导方式 指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程(细胞杂交)。 形成单核的杂交细胞 细胞膜的流动性 物理法:离心、振动、电激 化学法:聚乙二醇(PEG) 生物法:灭活的病毒 动物细胞融合 1.突破有性杂交方法的局限,使远缘杂交成为可能。 2.成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段。 3、重要用途:制备单克隆抗体。 植物细胞杂交与动物细胞融合的比较 主要用途 诱导方法 使用的酶 细胞融合原理 动物细胞融合 植物体细胞杂交 比较项目 细胞膜的流动性 细胞膜的流动性 纤维素酶、果胶酶 胰蛋白酶 物理(离心、振荡、 电刺激) 化学(聚乙二醇) 物理、化学方法 (同左) 灭活的病毒 获得杂种植株 制备单克隆抗体 什么是抗体? 抗体是机体受抗原刺激后产生的、并能与该抗原发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。 三、单克隆抗体 1、抗体是由何种细胞产生的? 浆细胞 2、抗体是如何产生的? B淋巴细胞 抗原 浆细胞 3、一种B淋巴细胞能产生几种抗体? 一种 增殖分化 刺激 抗体 分泌 (二)获得抗体的传统方法 1、把某种抗原反复注射到动物体内,然后从动物血清中分离出所需的抗体。 2、缺点: 产量低,纯度低,特异性差。 1、在体外培养的条件下,一个B淋巴细胞有没有可能无限增殖? 不可能 2、我们学过的什么细胞具有这样的能力? 癌细胞
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