- 1、本文档共2页,可阅读全部内容。
- 2、有哪些信誉好的足球投注网站(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
查看更多
DNA提取实验报告
实验内容 【实验目的】
理解植物细胞DNA的粗提取和鉴定的原理,初步掌握植物细胞DNA的粗提取和鉴定的方法,观察提取出的物质。
DNA在氯化钠溶液中的溶解度,是随着氯化钠的浓度的变化而改变的。当氯化钠的物质的量浓度为0.14 mol/L时,DNA的溶解度最低。利用这一原理,可以使溶解在氯化钠溶液中的DNA析出。
DNA不溶于酒精溶液,但细胞中的某些物质则可以溶于酒精。利用这一原理,可以进一步提取出含杂质较少的DNA。
DNA遇二苯胺(沸水浴)会染成蓝色,因此,二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。
细胞有两脂质膜,细胞膜和核膜(植物细胞还具有细胞壁),洗涤剂可以溶解细胞的细胞壁,去除脂质和蛋白质。 菜花(或洋葱等)、洗涤剂、NaCl、研钵、纱布、漏斗、烧杯、玻璃棒、量筒(10ml 1支)、滴管、试管(20ml 2支)、天平。
95%酒精、蒸馏水、0.015mol/L NaCl、二苯胺试剂、研磨液。(1)、 材料准备
将新鲜菜花和95%的酒精溶液放入冰箱冷冻室,至少24小时。
量取50 ml洗涤剂,称取0.5g NaCl。
配制0.015mol/L NaCl溶液:称取0.88 g NaCl投入1000 ml容量瓶中,加水到所需体积的刻度线上,溶解后成0.015mol/L NaCl溶液(已配好)。
配制二苯胺试剂:
A液:0.2 g二苯胺溶于10ml冰醋酸,再加1.1ml浓硫酸(比重1.84),若冰醋酸不纯,试剂呈蓝色或绿色,则不能使用。
B液:乙醛的体积分数为0.2%的溶液。(已配好)
配制:将0.1ml B液加入到10 ml A液中,现用现配。
(2)、 DNA的粗提取
取材:称取30 g菜花,去梗取花,切碎。
研磨:将菜花放入研钵中,倒入10 mL研磨液(同时加入洗涤剂),充分研磨10 min。
过滤:将研碎的液体用漏斗和纱布过滤到烧杯中。(也可将滤液倒入塑料离心管中进行离心,用1000 r/min 的旋转频率,离心2~5 min;取上清液放入烧杯中)。在4℃冰箱中放置几分钟后,再取上清液。
加冷酒精:将一倍体积的上清液倒入两倍体积的体积分数为95%的酒精溶液中,并且玻璃棒缓缓地轻轻搅拌溶液(玻璃棒不要直插烧杯底部)。沉淀3~5 min后,可见白色的DNA絮状物出现。用玻璃棒缓缓旋转,絮状物会缠在玻璃棒上。这就是DNA。
(3) DNA的鉴定
取两支试管,分别标记1、2号,各加入0.015mol/L NaCl2 ml,将所得的白色絮状物取出一部分放入1号试管,搅拌使其溶解,然后,向两试管中分别加入2 ml二苯胺试剂混合均匀后在沸水浴中加热5-10min,观察颜色变化。在加热过程中,随时注意试管中溶液颜色的变化(逐渐出现浅蓝色)。在含有最终提取的DNA丝状物的试管中,经过二苯胺颜色反应,试管溶液出现蓝色为DNA,对照试管溶液不变蓝色。1.材料必须充分研磨成糊状,否则洋葱细胞没有彼此分离分离,影响实验效果。
2.加入酒精后摇动或搅拌时一定要轻缓,否则会破坏以至于看不到。
3.二苯胺试剂最好现用现配,否则二苯胺会变成蓝色,影响效果。 指导教师签字:
年 月 日
注:1、报告内的项目或内容设置,可根据实际情况加以调整和补充。
2、学生提交实验报告时间为实验后10日内。
您可能关注的文档
- C++语言程序设计试题.doc
- C060连接线施工组织设计.doc
- C04地块大型综合超市项目桩基工程1.doc
- C12004融资融券业务培训系列课程之一答案整理.docx
- C12007-融资融券业务培训系列课程之四(100分).docx
- C12007融资融券业务培训系列课程之四(100分).doc
- C14072优先股试点的制度设计答案课后测验90分.doc
- C1驾照模拟考试6.doc
- C1驾驶员模拟题及答案(四).doc
- C2C电子商务中由于买方透露隐私导致人身权益受侵犯问题的创新性解决方案.doc
- 10《那一年,面包飘香》教案.docx
- 13 花钟 教学设计-2023-2024学年三年级下册语文统编版.docx
- 2024-2025学年中职学校心理健康教育与霸凌预防的设计.docx
- 2024-2025学年中职生反思与行动的反霸凌教学设计.docx
- 2023-2024学年人教版小学数学一年级上册5.docx
- 4.1.1 线段、射线、直线 教学设计 2024-2025学年北师大版七年级数学上册.docx
- 川教版(2024)三年级上册 2.2在线导航选路线 教案.docx
- Unit 8 Dolls (教学设计)-2024-2025学年译林版(三起)英语四年级上册.docx
- 高一上学期体育与健康人教版 “贪吃蛇”耐久跑 教案.docx
- 第1课时 亿以内数的认识(教学设计)-2024-2025学年四年级上册数学人教版.docx
文档评论(0)