2011思考复习题汇总.doc

思考复习题 一、总论部分（毕晟） 1.请结合自己的专业，简单设计一个免疫组织化学标记的方案来研究一个课题.(一抗和二抗的名称和来源、一抗的定位预测；实验方案、生物学意义和临床意义、实验设计（每个对照组的意义）、结果判断。 A.实验一：供传染科医生使用 一抗：鼠抗人MMP-2单克隆抗体（鼠抗人VEGF单克隆抗体、鼠抗人MMP-9单克隆抗体各位可以选择不同的抗体来答题，尽量让我们的答案不重复。） 各位可以选择不同的抗体来答题，尽量让我们的答案不重复。 二抗：羊抗小鼠Biotin标记抗体 一抗的定位预测：表达在肝组织的细胞浆中 实验方案：选择原发性肝细胞癌组织、肝癌旁组织、正常肝组织三组石蜡标本切片。通过抗体标记MMP-2（VEGF、MMP-9），经过免疫组化染色后判定相关蛋白表达与肝细胞癌的临床病理特征的关系。 生物学意义：VEGF是肿瘤血管生成和侵袭转移过程中的关键因素，可以通过其相关的特异性受体选择性作用于内皮细胞发挥作用（MMPs可以降解基底膜糖蛋白以及细胞外机制的大部分成分，细胞外机制和血管基膜的降解和肿瘤的侵袭转移密切相关）。 临床意义：通过降低VEGF的RNA和其相关蛋白的表达，可能抑制原发性肝细胞癌的生长，降低肿瘤的转移风险(MMP-2、MMP-9被称为明胶酶A、B，其过度表达与肝细胞癌侵袭转移密切相关，可以作为预测肝癌预后的指标)。 实验设计：通过设立癌旁组织和正常肝细胞组织的对照组，对比各组所研究蛋白在不同组织中表达的差异，进而得出实验结论。 结果判断：采用S-P免疫组化染色后，利用电脑的病理图文报告分析系统进行结果判读，对染色结果定量分析。 2. 免疫组化的应用范围 答： （1）提高病理诊断准确性 （2）对疾病的预后和治疗的意义 （3）癌基因蛋白的应用 （4）对肿瘤增生程度的评价 ki67 PCNA （5）微小病灶的发现 微小癌 微小病灶（如羊水栓塞） （6）在肿瘤分期上的意义 （7）指导肿瘤治疗 （8）免疫性疾病的辅助诊断 （9）病原微生物的检测 3 何谓“套餐式”免疫标记? 举两例说明 免疫组织化学技术以抗原抗体反应为其理论基础，对肿瘤的诊断和鉴别诊断有重要作用。目前常用抗体分为上皮性、间叶组织、神经及神经内分泌、淋巴细胞标志物等四类。由于肿瘤类型极多，部分肿瘤的诊断和分型又极其困难，因此诊断一些肿瘤的免疫组化方案必须是“套餐式”的，即每一种组织的标记物必须用2种以上的抗体，除了能够阳性正面证实的抗体，还要有能阴性反面证实的抗体。例如： Keratin,Vimentin,LCA,S100四种抗体组合，Keratin阳性且其它阴性的结果可以筛选出可疑癌或生殖细胞瘤；Vimentin和LCA阳性的结果可以筛选出可疑淋巴瘤；Vimentin和S100阳性的结果可以筛选出可疑神经内分泌肿瘤；Vimentin阳性的结果可以筛选出可疑肉瘤。 在Keratin阳性的肿瘤中，CK17和CK18阳性的结果提示移行细胞癌和某些管状腺癌；CK17阳性和CK18阴性的结果提示鳞癌、皮肤、鼻咽、食道癌等；CK17阴性和CK18阳性的结果提示腺癌。 研究型抗体选择要素。 研究性抗体需要根据实验所检测的抗原进行选择。根据实验目的选择单克隆或是多克隆抗体，确定抗体的不同种属来源，不同的种类，如IgG或是IgM。根据质量和价格选择性价比最优的抗体。 定义：实验目的抗原是什么。 生化特点：实验目的抗原的分子结构如何，有哪些生物化学特性。 染色体定位：实验目的抗原的染色体定位在哪里。 功能：实验目的抗原在细胞中有哪些作用，是否是细胞结构中的重要成分，或是细胞中重要的信使分子。 表达：明确表达相关抗原的细胞和组织，以及不同的表达时期。 在石蜡切片中的检测：用于检测石蜡切片还是冰冻切片，一般能做石蜡切片的抗体，可能都可以用来检测冰冻切片，但能做冰冻切片的抗体，不一定能检测石蜡切片中的抗原。 5.何谓肿瘤分子标记物?举两例说明 答：是指伴随肿瘤出现，在量上通常是增加的抗原，酶，受体，激素或代谢产物形式的蛋白质，癌基因和抑癌基因及其相关产物等成分。这些成分是由肿瘤细胞产生和分泌，或是被释放的肿瘤细胞结构的一部分，它不仅仅存在于肿瘤细胞内，而且还经常释放至血清或其他体液中，能在一定程度上反映体内肿瘤的存在。比如肝癌中的甲胎蛋白以及前列腺癌中的PSA。 6.何谓靶向治疗? 举两例说明 答：是指针对参与肿瘤发生发展过程的细胞信号转导和其他生物学途径的治疗手段。比如抗CD20抗体美罗华，可以治疗淋巴瘤，抗EGFR的西妥昔单抗，可以治疗转移性结直肠癌。 免疫组化, CGH, LOH,MSI,克隆性重排等的应用范围及应用“盲点”. A 免疫组化的应用范围同第2题 应用“盲点”：由于抗体稀释度、多克隆抗体特异性问题、试剂盒选择、操作中时间温度染色过程等因素使其在结