新生儿溶血的检测zhy.ppt

复习 新生儿溶血病的机制 ABO-HDN的特点 Rh-HDN的特点 临床表现 新生儿溶血病血清学检查 通过血清学检查可了解：母婴血型是否不合、母亲血清是否存在与患儿红细胞相对应的IgG性质的抗体及效价、患儿红细胞是否被来自母亲的IgG抗体所致敏，从而对新生儿溶血病进行预防诊断和治疗。 血型血清学检查对新生儿溶血病的诊断、预防和治疗有重要意义 产前检查 孕妇血样本检查(产前检查)是孕妇血液常规进行产前检查，用以鉴定这些孕妇妊娠患新生儿溶血病胎儿的危险，一旦被鉴定有此危险时，定期过筛试验可用于确定影响的程度。 产前新生儿溶血病的预测 产前免疫血液学检查 羊水检测 其它检查 IgG分型 B超、胎心等 产前免疫血液学检查的内容 孕产史与输血史 夫妇血型 IgG不规则抗体 孕产输血史的影响 孕妇血样本检查 2、抗体筛选和鉴定 取母亲血清与筛选红细胞作抗体筛选试验 。 如果该试验阳性，应进一步用配组谱细胞作 抗体鉴定，以确定抗体的特异性。当检出某一抗 体后，需进一步鉴定双亲的相关红细胞抗原。 如夫妇ABO血型配合，可直接用孕妇血清加丈夫红细胞做抗体筛查试验。 检出有意义的抗体后，应定期复查，观测抗体效价变化情况，抗体效价持续升高提示胎儿可能受害。必要时可准备产后立即换血。 如果抗体筛选试验阴性，只有丈夫红细胞出现阳性反应，则提示孕妇血清中存在针对低频率抗原的抗体。 如果孕妇血清中抗体未针对其丈夫或婴儿的血型抗原，则该抗体可能是由于输血等原因引起的对胎儿无害。 检测Rh系HDN的同时，注意母婴ABO系HDN的并存，需以缺乏该Rh抗体相应抗原的A(B)红细胞进行检测证实。 如母亲Rh D阴性，A型 父亲Rh D阳性 B型 检测母亲体内除抗-D外，是否存在抗B 应该用母亲血清+Rh D阴性的B型红细胞反应 母婴Rh血型不合溶血病的血清学检查 孕妇血样本的检查 Rh阴性第一次怀孕孕妇的抗体检测应分别在20、28、34周进行。检测包括对母亲的血清用抗体筛选红细胞以及(在ABO血型配合时）丈夫红细胞作抗体筛选。 经产妇或曾输过Rh阳性血，怀孕初期作抗体筛查，一旦检出，则至少每4周检测一次，密切观察抗体效价变化。 孕妇血样本检查 3、血清中IgG抗体及效价的检查： ABO系HDN由IgG抗A(B)引起，检测母亲血清中有无IgG性质的抗A(B)抗体及效价，即可预ABO系HDN发生的可能性。 效价测定方法： 应用2-巯基乙醇（2-Me）或二硫苏糖醇（DTT）破坏或中和IgM抗体使之不能再与盐水介质中相对应的红细胞凝集。经处理后的血清加盐水进行倍比稀释 加入相对应的红细胞用间接抗球蛋白法检测。 IgG抗体的检测方法 当IAT效价盐水效价4倍或以上时结果可信。 IgG抗A、B效价可以从32开始检测，其它不规则抗体均从1或2开始检测。 用唾液血型物质中和IgM抗A,B？ 值得注意的是无公认的检测高滴度抗A、抗B的实验方法，亦无明确的实验室操作指南。 思考： 1、 你认为是否所有的孕妇都应该作抗体筛查？为什么？ 2、如果不是，什么情况下建议孕妇作抗体筛查？ 产前检查——羊水检查 抽取羊水检测胆红素 检测羊水中卵磷脂和鞘磷脂的比例(L/S) 检测羊水中血型抗原帮助判断ABO血型 羊水穿刺术容易造成母亲和胎儿出血，并引起母亲的免疫反应，因此现在很少有医院采用。 新生儿溶血患儿血样本检查 患儿血样本检查是诊断HDN的最有利证 据，证实患儿红细胞是否被来自母体的IgG 抗A（B）抗体所致敏。 试验包括红细胞直接抗球蛋白试验、游离抗体试验、抗体放散试验。 新生儿溶血患儿血型鉴定 ABO血型鉴定：常规方法 Rh血型鉴定：常规方法 新生儿溶血患儿血型鉴定 ABO血型鉴定：常规方法 Rh血型鉴定：Rh溶血病婴儿的Rh血型定型比较困难，原因是婴儿红细胞的直抗呈强阳性，无论在酶，抗球蛋白中都必然呈阳性，所以一般的检测方法都不能适用。 Rh-HDN患儿Rh血型鉴定 对新生儿红细胞进行热放散（不必放散到直抗完全阴性）后再用酶法或抗球蛋白法或盐水法鉴定血型。 用恰当的盐水介质抗体。包括所有的单克隆盐水介质试剂; 对于化学改性的盐水介质试剂除非说明书中注明可以用于直抗阳性细胞的血型鉴定，一般不能在此应用。 新生儿红细胞的“遮断现象” 新生儿RhD阳性并且红细胞完全被母亲的抗D所饱和，以至于红细胞上没有D位点与盐水介质定型试剂起反应，又称封闭性D。 此时用盐水介质抗体检测结果可能出现弱阳性甚至阴性。 因此此时如果母亲为RhD阴性，且血清中已经检出抗D