灌心术蛙心搏材料.doc

华南师范大学实验报告 学生姓名?????????????学号???????????? 专????业?生物科学??????????年级、班级?????????? 课程名称?人体及动物生理学实验?实验项目??蛙心搏的观察与描记?? 期外收缩与代偿间歇?? 蛙类离体心脏灌流???? 实验类型??验证??设计??综合?实验时间?201??年??月????日 实验指导老师??胡?严?实验评分????????????????? 1 实验目的 1.1学习暴露蛙类心脏的方法和蛙类心脏的描记方法 1.2熟悉蛙心的结构和各部分的自动节律性活动 1.3蛙类离体心脏灌流 2 实验原理 青蛙的心脏有两心房和一心室，心脏的起搏点是静脉窦。静脉窦的节律最高，心房次之，心室最低。正常情况下，心脏的活动节律服从静脉窦的节律，其活动顺序为：静脉窦、心房、心室。 心肌兴奋时兴奋性变化的主要特点是有效不应期特别长(平均250ms),相当于心肌整个收缩期和舒张早期。它是骨骼肌与神经纤维的100倍和200倍。这一特性是保证心肌能收缩和舒张交替进行,不出现强直收缩的生理学基础。 当刺激频率多数刺激落在有效不应期内，最多引起期外收缩，不会发生强直收缩。一次期外收缩之后所出现的一段较长的舒张期称为代偿间歇。 心肌具有自动节律性收缩的特性，可用人工灌流的方法，研究心脏活动的规律及特点；可观察灌流液成分的改变对离体心脏活动的影响。 3 材料和仪器 3.1材料：青蛙3~5只 3.2仪器：常规手术器械、蛙板、蛙心夹、毁髓针、棉球、滴管、纱布、棉线、任氏液、小烧杯（或培养皿）、污物缸、秒表（手机秒表）、两个针头（针灸针）、双针形露丝刺激电极、张力换能器、支架、滑轮、双凹夹、PowerLab生理实验系统、蛙心插管（斯氏套管）、套管夹 3.3试剂：任氏液，0.65%NaCl溶液，5%NaCl溶液，2%CaCl2溶液，1%KCl溶液，1:5000肾上腺素，1:10000乙酰胆碱溶液，300U/ml肝素溶液 4 方法与步骤 4.1蛙心搏的观察与描记 4.1.1 双毁髓，暴露蛙心脏：小心剪去心包膜 4.1.2观察蛙心脏的结构。 4.1.3仔细观察静脉窦、心房及心室收缩的顺序和频率。在主动脉干下方穿一条线，将心脏翻向头端，看准窦房沟作第一结扎。观察心脏各部分搏动节律的变化，用秒表计数每分钟的搏动次数。待心房和心室恢复搏动后，计数其搏动频率。然后再房室交界处穿线，准确结扎房室沟。待心室恢复搏动后，计数每分钟心脏各部分搏动次数。 4.2期外收缩与代偿间歇的观测 4.2.1连接好实验装置，将刺激电极安放在心室外壁，使之既不影响心搏又能同心室紧密接触，刺激电极与刺激输出端相连。分别在心室的收缩期，舒张早期、中期和晚期给予适当强度单脉冲（阈上刺激），观察期外收缩和代偿间歇的发生。 4.2.2观察结果，保存数据。 4.3蛙类离体心脏灌流 4.3.1.双毁髓，暴露蛙的心脏，分辨蛙心脏的血管：动脉圆锥、左主动脉、右主动脉、静脉与静脉窦； 4.3.2.斯氏蛙心插管法：在左主动脉下穿线，离左右主动脉分支处（近动脉圆锥）2mm结扎左主动脉，在左右主动脉下再穿一线打活结备用，准备好蛙心套管（任氏液+1滴肝素溶液），在左主动脉的分支上部位剪一小斜口，将套管插入心室（收缩期），当看到血液冲进套管，液面上下移动，即可结扎动脉和套管。 4.3.3.连接好实验装置 4.3.4.记录正常心搏曲线，准备好加药标记，以下实验过程中保持chart连续不停的记录，滴加0.65%NaCl溶液并标记，观察到心搏明显变化后，吸去套管内溶液并同时做冲洗标记，用新鲜的任氏液清洗2~3次，待心搏曲线恢复正常。注意，换液时切勿碰套管，保持灌流液面一致。（以下实验同）。保持Chart连续采样直到实验结束。接着分别滴加几滴5%NaCl， 2%CaCl2溶液，1%KCl溶液，肾上腺素溶液（1:5000），滴加1~2滴 1:10000乙酰胆碱溶液实验 4.3.5.实验结束，保存数据，回放记录，卸下实验装置，清理仪器、桌面卫生，并关PowerLab和电脑电源 5 实验结果 5.1 观察心搏的过程，数据如表1所示： 表格 1斯氏结扎记录表 实验项目 频率/次.min-1 静脉窦 心房 心室 对照 53 53 53 第一结扎 54 34 38 第二结扎 51 35 0 斯氏结扎实验结果显示，正常蛙心的节律性搏动开始于静脉窦，并依次扩布到心房和心室,所以我们可以看到的是在对照组中，静脉窦、心房和心室的心跳频率都是53次/min。 在静脉窦和心房之间的窦房沟进行第一结扎后，可以诱发房室交界处心肌组织的自律性搏动，但其自律性低于静脉窦，所以我们可以看到在第一结扎时，静脉窦的频率是54次/min，心房和心室的频率都比静脉窦的低很多，