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第一章,血液标本的采集和血涂片制备
血清比血浆少了纤维蛋白
采血方法:皮肤,静,动脉
皮肤采血法 静脉
采血部位:手指,足跟 肘部静脉
器材 专用采血针 注射器 真空采血器
量: b,0.1ml 多,0.2
适用范围。
皮肤:左手中指或无名指指端内侧。
穿刺深度约3mm,忌用力挤压
采血的顺序依次为:PLT,RBC ,WBC, HB,
静脉;止血带不超过1分钟。以免淤血和血液浓缩
真空采血法(负压)
注:试管塞:匀松动
针外乳胶套:匀取下
标有不同的色码:适用于不同的检验项目
采血管混血:5~8次
采血后多管血液分配的顺序:血培养——不抗凝的管子—带其他特殊抗凝剂或促凝剂的管子
优点:1.血标本运转方便2.可避免交叉感染3.可减少溶血4.标有不同的色码方便取用
抗凝:用物理或化学的方法,除掉或抑制血液中某些凝血因子以阻止血液凝固的方法。
血液标本种类:全血,血浆,血清(不抗凝),细胞成份。
抗凝剂 原理 适用范围 不适用范围
枸橼酸钠 与钙螯合 血栓止血,血液保养液.ESR 溶解度低
EDTA 盐/EDTA—K2 与钙螯合 多项血液检查尤其 血检与血栓检查/血 (抑制血小板凝聚) PLT/血细胞分析 小板功能检查
肝素 加强AT-血,防止凝血 多数检查项目 CBC特别是WBC和DC
酸形成,抑制血小板凝聚
草酸盐 草酸钙沉淀 少用
物理抗凝:玻璃珠
促凝剂:凝血脂 蛇素 硅石粉
分离胶:快速分离血清和细胞
质量控制:1、生物安全:病人,医务工作者,环境
患者状态:呈理状态,饮食,药物
采血时间:(项目不同而不同:如WBC、肝功(输液,药物的影响
采血部位
采血体位:直立时血液浓缩
压脉带:捆扎时间1min 否则浓缩
避免溶血:①注册器和容器不干燥,不清洁②穿刺不顺③血液注射溶器时未取下针头④抗凝血用力振药⑤血清分离方法不当
避免凝血:出凝血时间,CBC
抗凝剂的选择
试管标识
立即送检
眩晕处理方法:1、拔出针头、平卧2、掐人中和合谷3、静脉、口服葡萄糖溶液
CBC只能温室保存(低温PLT减低)
血浆4°C,24h凝血因子活性减少95%
检测完的血标本,应消毒后集中销毁
血涂片的制备和染色
制备:1、载玻片的清洁2、制备方法
3、良好的血涂片:要求:厚薄适宜,头体尾分明,分布均匀,两侧留有空隙,血膜长度占2/3
影响因素:血滴大小,推片速度,角素
染料:瑞氏:伊红,美蓝
吉氏:伊红,无青
瑞氏染料+甲醇—瑞氏染液(不溶于水)
偏酸—偏红 PH偏碱—偏蓝
过深:甲醇脱色
过浅:复染(先缓冲液再染色)
方法学评价:瑞氏染色法:颗粒着色好 ——————结合使用效果更好
吉姆萨染色法:核和寄生虫着色好
第二章
红细胞检查:1.红细胞计数 (外用血)
显微镜计数:稀释——滴入改良牛鲍计数板(充斥)—计数—换算
血细胞分析仪
方法学评价:(1)显微镜:优点:设备简单. 价低.适用于基层和分散就诊者
缺点:费时.重复性较差,准确性取决于操作者技术水平。误差散在
分析仪:优点:操作简便。效率高 重复性好适合于大批标本检测。
缺点:贵。准确性取决于仪器的性能及工作状态 因有误差(计数域误差):由于计数室内每次血细胞分布不可能完全相同所造成的误差。计数越多,误差越小,不能完全消除。
白细胞的影响:WBC100*109/L应扣除
参考值:成年男性:4.09~5.47*1012/L 女:3.68~5.13*1012 /L 新生儿:5.2~6.4*1012/L
血红蛋白测定:
测定方法 优点 缺点
Hicn测定法 参考方法.操作简便 可检测除SHB之外的 剧毒.脂血.血小板增多,高白
所有Hb稳定可直接定值 细胞/高球蛋白血液标本可致挥发.
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