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单糖发酵试验(五管糖) 试剂:含不同单糖的蛋白胨水培养基 指示剂-----溴甲酚紫 结果判断: A: 不发酵 - B:发酵、产酸 + C:发酵、产酸产气 + 硫化氢(H2S)试验 试剂:含有胱氨酸及醋酸铅(或硫酸亚铁)的培养基 原理:变形杆菌、沙门菌分解含硫氨基酸→ H2S→遇铅或铁离子生成黑色的硫化物 * * 长治医学院微生物学教研室 孟 莉 第2章 细菌的生理 第一节 细菌的理化性状 1、细菌的化学组成 肽聚糖、胞壁酸、磷壁酸等 占细胞总重量75%~90% 碳、氢、氮、氧、磷、硫等 钾、钠、铁、镁、钙等 水: 有机物: 无机离子: 特有成分: 2、细菌的物理性状 半透明;细菌悬液呈混浊状态。菌数越多浊度越大,使用比浊法或分光光度计可以粗略地估计细菌的数量。 体积小、相对表面积大,有利于同外界进行物质交换。因此细菌的代谢旺盛,繁殖迅速。 G+菌 pI 2~3 G-菌 pI 4~5 细胞壁、细胞膜都有半透性,有利于吸收营养和排出代谢产物。 G+菌 20~25大气压 G-菌 5~6大气压 光学性质 表面积 带电现象 半透性 渗透压 菌体内为高渗透压,细菌所处一般环境相对低渗,若处于比菌内渗透压更高的环境中,菌体内水分逸出,细菌就会死亡 中性环境均带负电荷;其带电现象与染色性等密切相关。 第二节 细菌的营养与生长繁殖 根据细菌所利用的能源和碳源的不同,将细菌分为两大营养类型。 1.自养菌(autotroph) 以简单的无机物为原料,合成菌体成分 2.异养菌(heterotroph) 以多种有机物为原料,合成菌体成分并获能量 腐生菌 寄生菌 大部分病原菌 一、细菌的营养类型 所有的病原菌都是异养菌。 二、细菌的营养物质 水: 营养物质必须先溶于水,营养的吸收与代谢均需有水才能进行。 碳源: 来源于糖类,提供能量。 氮源: 来源于氨基酸、蛋白质等,合成菌体成分。 无机盐: 钾、钠、钙、镁、磷、硫等。 无机盐的功用: ①构成有机化合物,成为菌体的成分; ②作为酶的组成部分,维持酶的活性; ③参与能量的储存和转运; ④调节菌体内外的渗透压; ⑤某些元素与细菌的生长繁殖和致病作用密切相关。 生长因子 许多细菌生长必需但自身不能合成的物质,如维生素、氨基酸 等。少数细菌还需特殊的生长因子,如流感嗜血杆菌需要Х、Ⅴ两种因子,Ⅹ因子是高铁血红素,是细菌合成过氧化物酶、细胞色素氧化酶等呼吸酶的辅基; Ⅴ因子是辅酶Ⅰ或辅酶Ⅱ,两者为细菌呼吸所必需。 三、细菌摄取营养物质的机制 各种细菌转运营养物质的方式不同,即使对同一种营养物质,不同细菌的摄取方式也不一样 被动扩散:营养物质从浓度高向低浓度一侧扩散,其驱动力是浓度梯度,不需要提供能量。 简单扩散:不需要任何细菌组分的帮助,营养物质就可以进入菌体内的过程。 易化扩散:需要菌细胞的特异性蛋白等来帮助。 主动转运系统:是细菌吸收营养物质的主要方式,其特点是营养物质从浓度低向浓度高的一侧转运,并需要提供能量。 细菌有三种主动转运系统: 1.依赖于周浆间隙结合蛋白的装运系统 营养物与周浆间隙内的受体蛋白结合后,引起后者构型的改变,继而将营养物转送给细胞膜上的ATP结合型载体,导致ATP水解提供能量和营养物通过细胞膜进入胞质内。 2.化学渗透驱使转运系统 该系统利用膜内外两侧质子或离子浓度差产生的质子动力或钠动力作为驱使营养物越膜转移的能量。转运营养物的载体是电化学离子梯度透性酶,这种酶是一种能够进行可逆性氧化还原反应的疏水性膜蛋白,即在氧化状态与营养物结合,而在还原状态时其构象发生变化,使营养物释放进入胞质内。 3.基团转移 营养物在转运的过程中被磷酸化,并将营养物的转运与代谢相结合,更为有效地利用能量。 即:细菌生长繁殖的条件 对氧气要求:专性需氧菌,如结核杆菌 微需氧菌, 如空肠弯曲菌 兼性厌氧菌, 大多数病原菌 专性厌氧菌,如破伤风梭菌 对CO2要求: 5%~10% CO2 (烛缸法) ①水 ②碳源 ③氮源 ④无机盐 ⑤生长因子 4.气体 3.氢离子浓度(pH) 2.温度 1.营养物质 多数病原菌最适37℃ 多数病原菌最适pH为7.2~7.6 5.渗透压 一般培养基的盐浓度和渗透压适于大多数细菌。少数细菌如嗜盐菌需要在高浓度(3%)的NaCl环境中生长良好。 四、影响细菌生长的环境因素 专性厌氧菌不能在有氧环境中生长的原因 1、缺乏氧化还原
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